Изучение токсичности опытного биопрепарата «Антигаллерин» для медоносной пчелы

Введение . К одной из особенностей природного потенциала Дальнего Востока следует отнести наличие благоприятных условий, позволяющих заниматься пчеловодством. Этому способствуют богатая медоносная растительность и климатические условия региона.

Одним из опасных паразитов медоносной пчелы является восковая моль, которая способна наносить существенный ущерб пчелиным семьям, даже при условии поддержания чистоты на пасеке и в местах хранения сот [8].

Опасность представляет не взрослое насекомое, а его личинки. При благоприятных условиях они уничтожают все запасы суши и воскового сырья, повреждают расплод в гнезде, препятствуют росту пчелиных семей, вынуждают пчел покидать улей [7].

Комплекс мероприятий по борьбе с восковой молью включает профилактику и проведение специальных ветеринарных методов (физических, химических и биологических), из которых наиболее перспективным является биологический, так как он гарантируют наиболее безопасное воздействие в отношении медоносной пчелы [1, 6, 11]. Применяемые с этой целью биологические инсектициды оказывают губительное действие на личинок моли [3].

Для эффективной биологической борьбы с этим вредителем в природно-климатической зоне Приамурья сотрудниками отдела микробиологии ФГБНУ ДальЗНИВИ разработан опытный препарат на основе штамма Bacillus thuringiensis 846-Bt, запатентованный под номером RCAM 00045 [4, 12], – биоинсектицид для борьбы с большой восковой молью [2].

Все разрешенные к применению препараты на основе Bacillus thuringiensis относят к 4-му классу токсичности [13], так как в отличие от традиционных инсектицидов они не обладают прямым токсическим действием, однако при применении инсектицидов необходимо проводить исследование на токсичность, что является актуальным при борьбе с восковой молью в пчеловодстве.

В связи с этим перед нами была поставлена цель – изучить токсичность опытного препарата «Антигаллерин» для пчел.

Материалы и методы. Работа выполнена в отделе микробиологии ФГБНУ ДальЗНИВИ. Для реализации поставленной цели в условиях лаборатории были проведены исследования по определению острой и хронической токсичности опытного биопрепарата.

Определение параметров токсичности препарата проводили в лабораторных условиях на здоровых молодых пчелах в соответствии с «Методическими рекомендациями по изучению токсического действия пестицидов и биопрепаратов на пчел» [9] и «Методическими указаниями по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» [5, 10]. Пчел содержали в энтомологических садках. Кормление и содержание осуществляли по общепринятой методике.

Испытывали действие препарата «Антигал-лерин» при контактном и кишечном воздействии в трех дозах с концентрацией: 1,5×108спор/мл (минимальная), показавшей 100%-ю эффективность при обработке против восковой моли; 3,0 ×108 спор/мл (средняя); 6,0 ×108 спор /мл (максимальная).

Острую кишечную токсичность изучали методом группового скармливания препарата пчелам, а острую контактную – методом орошения группы пчел с помощью аэрозольного распылителя однократно. При изучении хронической токсичности препаратом воздействовали аналогично, но трехкратно, с интервалом 24 часа. В период воздействия опытного препарата за пчелами вели ежедневное наблюдение, а после его отмены наблюдение велось еще в течение 72 часов. Для каждой дозы и каждого вида воз- действия были сформированы опытные группы пчел по 10 в каждой. По принципу аналогов были подобраны и пчелы контрольных групп.

При групповом скармливании пчел выдерживали 2 часа в энтомологических садках без корма, а затем давали мед с Антигаллерином в заданной концентрации из мерных пробирок в течение 60 мин. После этого мед с препаратом заменяли на чистый. Общий расход корма с препаратом делили на число особей в садке, определяя среднюю дозу на одно насекомое. Пчелам контрольной группы скармливали мед без добавления препарата.

При изучении параметров контактной токсичности опытных пчел опрыскивали препаратом, разведенным в стерильной дистиллированной воде в испытуемой дозе. Контрольных пчел опрыскивали дистиллированной водой.

Садки с испытуемыми пчелами содержали при температуре 27–29°С и относительной влажности 70–80 %. Степень токсичности определяли по результатам ежедневного учета количества погибших пчел в течение 3 последующих суток.

Данные, полученные в ходе исследований, будут использованы при разработке инструкции по применению опытного биопрепарата «Анти-галлерин».

Результаты исследований . Анализ исследований по изучению острой токсичности показал, что однократное скармливание Антигалле-рина с кормом в минимальной, средней и максимальной дозах не оказывало отрицательного влияния на поведение опытных пчел и не вызывало их гибели (табл. 1).

Таблица 1

Кишечное действие биопрепарата «Антигаллерин» на пчел при однократном воздействии

Группа	Испытуемые концентрации	Процент живых пчел после воздействия
		24 ч	48 ч	72 ч
Контрольная	-	90	90	90
Опыт 1	1,5×108 спор /мл	100	100	100
Опыт 2	3,0×108 спор /мл	100	100	100
Опыт 3	6,0×108 спор /мл	100	100	100

При контактном воздействии признаков интоксикации у пчел также не наблюдалось (табл. 2).

Таблица 2

Контактное действие биопрепарата «Антигаллерин» на пчел при однократном воздействии

Группа	Испытуемые концентрации	Процент живых пчел после воздействия
		24 ч	48 ч	72 ч
Контрольная	-	90	90	90
Опыт 4	1,5×108 спор /мл	100	100	100
Опыт 5	3,0×108 спор /мл	100	100	100
Опыт 6	6,0×108 спор /мл	100	100	100

При изучении кишечного и контактного действия Антигаллерина гибель пчел наблюдали только в контрольной группе, где количество погибших пчел не превышало 10 %.

При изучении хронической кишечной токсичности Антигаллерина нами были получены следующие результаты. В группах контрольной и опытной, получавшей с кормом минимальную дозу препарата на протяжении всего экспери- мента, признаков интоксикации не выявлено. В опытных группах уже через сутки после повторного скармливания препарата наблюдались признаки интоксикации и гибель 20 % пчел, получавших Антигаллерин в средней дозе, и 100%-я гибель пчел, получавших максимальную дозу (табл. 3), а на третьи сутки еще 20 % пчел погибло в группе, получавшей Антигалерин в средней дозе.

Таблица 3

Кишечное действие биопрепарата «Антигаллерин» на пчел при хроническом воздействии

Группа	Испытуемые концентрации	Количество живых пчел через 24 часа после воздействия, %			Количество живых пчел после отмены воздействия, %
		1-е воздействие	2-е воздействие	3-е воздействие	через 48 часов	через 72 часа
Контрольная	-	100	100	100	100	100
Опыт 7	1,5×108 спор /мл	100	100	100	100	100
Опыт 8	3,0×108 спор /мл	100	100	80	80	60
Опыт 9	6,0×108 спор /мл	100	100	0	0	0

При изучении контактной хронической токсичности на протяжении всего периода наблюдений признаков интоксикации не выявлено, поведение пчел в опытных группах не отличалось от контроля. В группах контрольной и опытной, получавшей воздействие в максимальной дозе, отмечена незначительная гибель пчел – 10 %, что допускается при изучении токсичности на пчелах (табл. 4).

Таблица 4

Контактное действие биопрепарата «Антигаллерин» на пчел при хроническом воздействии

Группа	Испытуемые концентрации	Количество живых пчел через 24 часа после воздействия, %			Количество живых пчел после отмены воздействия, %
		1-е воздействие	2-е воздействие	3-е воздействие	через 48 часов	через 72 часа
Контрольная	-	100	100	100	90	90
Опыт 10	1,5×*108 спор /мл	100	100	100	100	100
Опыт 11	3,0×108 спор /мл	100	100	100	100	100
Опыт 12	6,0×108 спор /мл	100	100	90	90	90

В группах контрольной и опытной, получавшей с кормом минимальную дозу препарата на протяжении всего эксперимента, признаков интоксикации не выявлено.

В опытных группах, получавших среднюю и максимальную дозы препарата «Антигаллерин», уже через сутки после повторного скармливания наблюдалась интоксикация и гибель пчел 20 и 100 % соответственно.

При изучении контактной хронической токсичности на протяжении всего периода наблюдений признаков интоксикации не выявлено, поведение пчел в опытных группах не отличалось от контроля. В группах контрольной и опытной, получавшей воздействие в максимальной дозе, отмечена незначительная гибель пчел – 10 %.

Результаты исследований по изучению острой токсичности показали, что однократное скармливание Антигаллерина с кормом в минимальной, средней и максимальной дозах не оказывает отрицательного влияния на поведение опытных пчел и не вызывает их гибели. При контактном воздействии признаков интоксикации не наблюдалось.

Выводы. Таким образом, при изучении токсичности препарата «Антигаллерин» на пчелах выявлено:

• 1.    Данный препарат в изученных дозах не обладает острой кишечной и контактной токсичностью для пчел.

• 2.    Препарат не обладает хронической токсичностью для пчел при его контактном действии.

• 3.    Препарат обладает выраженными свойствами хронической токсичности для пчел при кишечном действии в дозах, превышающих минимальную (показавшую 100%-ю эффективность при обработке против восковой моли 1,5×10⁸спор /мл) в 2 и в 4 раза.

Таким образом, однократное скармливание Антигаллерина с кормом в минимальной, средней и максимальной дозах не оказывает отрицательного влияния на поведение опытных пчел и не вызывает их гибели. При изучении хронической контактной токсичности признаки интоксикации не были выявлены в минимальных дозах, а в средних и максимальных наблюдалась гибель пчел в 20 и 100 % случаев соответственно.

Для борьбы с восковой молью рекомендуем дозу опытного биопрепарата с концентрацией 1,5×108спор/мл, которая является минимальной для 100%-го максимального эффекта и не является токсичной при однократном скармливании пчелам в лабораторных условиях.

Данные, полученные в ходе исследований бактериального препарата на токсичность, следует применять в процессе обоснования мероприятий по борьбе с восковой молью в природно-климатических условиях Приамурья.