Влияние шрота биоженьшеня на морфофункциональные показатели печени и резистентность здоровых норок

Адаптогены способны воздействовать на мембраны, повышая их стабильность, изменяя проницаемость и активность связанных с ними ферментов, кроме того, проникая в клетку, адаптогены активизируют внутриклеточные структуры и могут пополнять эндогенный фонд антиокислительной системы. Подобное многообразие действия адаптогенов на различные клеточные системы вызывает адаптационную перестройку метаболизма. Вероятно, главным в этой перестройке [2] является более экономное расходование энергии, появление способности организма нормально функционировать при меньших затратах энергии.

Цель исследования. Изучить влияние шрота биоженьшеня на биохимические, морфологические показатели крови и резистентность здоровых норок.

Задачи исследования. Выяснить влияние шрота биоженьшеня в различных дозах на морфофункциональные показатели печени и резистентность здоровых норок.

Материалы и методы исследования. Материалом исследования служили норки стандартного окраса (темно-коричневые). Для проведения научно-производственных опытов были подобраны норки основного стада по принципу аналогов, содержащиеся в типовых шедах.

Для опытов использовано вторичное сырье выжимки – шроты каллусной культуры биоженьшеня. Биохимический анализ показал, что в нем, кроме микроэлементов, содержится: протеина – 15,3 % абсолютно сухого вещества; сахара – 1,6 %; крахмала – 1,6 %; глюкозидов – 1,08 %; витамина В 1 –0,26 мг%; витамина В 2 – 0,53 мг%. Результаты исследований шротов свидетельствуют о том, что в них сохранено до 60 % действующего начала.

Под опыт взято 60 условно здоровых норок, которые разделены на 4 группы по 15 голов в каждой. 1-я – контрольная; 2-я, 3-я, 4-я – опытные (табл.). Длительность опыта 60 дней. Шроты биоженьшеня задавали в течение 30 дней от начала опыта. От опытных и контрольных групп кровь для исследований брали до начала опыта и на 5-, 10-, 20-, 30-, 60-й день от начала опыта.

Схема опыта

Группа	Количество голов	Схема опыта
Здоровые норки
1	15	Без биоженьшеня
2	15	1,5 г шрота биоженьшеня
3	15	3 г шрота биоженьшеня
4	15	7 г шрота биоженьшеня

Кормление животных всех групп было одинаковым, его, так же как и поение, проводили вручную. Параметры климатических условий для всех групп норок были одинаковыми в течение проведения опытов.

Для морфологических исследований брали кусочки печени норок. Материал уплотняли путем заливки его в парафин с предварительной фиксацией в 5%-м растворе формалина. Срезы получали на санном микротоме, окрашивали гематоксилин-эозином, по Шабадашу.

Гистологические препараты изучали под микроскопом Microri MC 400. Фотографирование проводили с помощью фотокамеры Sanyo Color CCD.

Гематологические исследования проводили по общепринятым методикам. Пробы крови у норок для исследований брали из мякиша лапки перед кормлением. Количество эритроцитов и лейкоцитов определяли с помощью пробирочного метода с дальнейшим подсчетом в камере Горяева. Лейкоцитарный профиль мазков крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе, подсчитывали с помощью микроскопа под иммерсией, гемоглобин – гемометром Сали в г/л. Общий белок определяли рефрактометрическим методом на рефрактометре в г/л. Фракции сывороточных белков (альбумины, α -, β -, γ -глобулины), исчисляемые в г/л, определяли нефелометрическим методом, основанным на способности различных белков осаждаться фосфатными растворами определенной концентрации.

Фагоцитарную активность нейтрофилов крови определяли по методу В.В. Меньшикова (1987) с латексом и выражали в процентах. Бактерицидную активность сыворотки крови определяли также используя методические рекомендации В.В. Меньшикова (1987), выражая полученную величину в процентах.

Статистичечкую обработку полученных данных проводили с применением компьютерной программы Excel 2000.

Результаты исследования. В ходе опыта установлено, что при применении шрота каллусной культуры биоженьшеня в группах условно здоровых норок изменений в печени не выявлено: в объеме не увеличена, упругой консистенции, на разрезе дает незначительный соскоб коричневого цвета.

При гистологическом исследовании срезов печени здоровых опытных норок общая архитектоника печени обычного вида, гепатоциты складываются в балки, расположенные радиально по направлению к центральным отделам долек, с довольно четкими контурами. Цитоплазма печеночных клеток с мелкими вакуолями, с отрицательной реакцией на жир. Ядра клеток круглой формы, светлые. Среди них кое-где встречаются и гиперхромные, несколько увеличенные в размерах (рис. 1).

Рис 1. Печень норки опытной группы. Стенка центральной вены (ЦВ) не утолщена. Балочное строение печени не нарушено. Печеночные клетки имеют мелкую зернистость ]. Окраска гематоксилин-эозином (ок.15х; об. 40х)

При окраске по Шабадашу отмечается диффузное отложение глыбок гликогена в гепатоцитах, особенно у норок 3-й группы (3,0 г шрота биоженьшеня) (рис. 2.).

Рис. 2. Печень норки третьей опытной группы. В гепатоцитах большое количество красно-фиолетовых глыбок гликогена ↑. Окраска по Шабадашу (ок.15х; об. 40х)

Печень норок контрольной группы к 60-му дню опыта несколько увеличена в объеме, дряблой консистенции, кирпично-красного цвета. На разрезе паренхима слегка выбухает за пределы капсулы, на тыльной стороне ножа остается сальный налет.

При гистологическом исследовании отмечается очаговое нарушение балочного строения печени и крупнокапельное инфильтративное ожирение гепатоцитов с периферии долек печени и частично с центральных участков (рис. 3).

Рис. 3. Печень норки контрольной группы. Крупнокапельное инфильтративное ожирение гепатоцитов ↑. Окраска гематоксилин-эозином (ок.15х; об. 10х)

Во всех опытных группах на 60-й день от начала опыта произошло достоверное увеличение исследуемых показателей естественной резистентности, но лучшие результаты были получены в 3-й группе, где доза шрота биоженьшеня была 3,0 г на один килограмм живой массы. В этой группе к 60-му дню произошло достоверное увеличение по сравнению с контролем: уровня гемоглобина на 2 %; количества эритроцитов на 35,6; общего белка на 3,8 и белковых фракций: альбуминов на 9,2, β-глобулинов на 28 и γ-глобулинов на 1,6 % (рис. 4).

Общий белок

Контроль

1,5г шрота биоженьшеня

3,0г шрота биоженьшеня

7,0г шрота биоженьшеня

Рис. 4. Биохимические, морфологические показатели крови и показатели неспецифического иммунитета здоровых норок под влиянием различных доз шрота биоженьшеня на 60-й день опыта

Полученные нами данные согласуются с результатами других ученых, которые в своих работах использовали спиртовые настойки и отвары корней женьшеня [3].

Под влиянием шрота биоженьшеня происходит достоверное повышение клеточных и гуморальных факторов резистентности норок. Наилучший эффект был получен у норок 3-й группы (шроты 3 г), о чем свидетельствует достоверное повышение ФАН на 1,5 % и БАСК на 6,6 % по сравнению с контролем (рис.4).

Клинические наблюдения за здоровыми норками показали, что они были более активны, чем норки в контрольной группе.

Выводы . Таким образом, применение выжимок шрота каллусной культуры биоженьшеня способствует развитию в организме животных состояния неспецифически повышенной сопротивляемости, что согласуется с данными других авторов [1], которые отмечали влияние гликозидов на биомембраны, проницаемость и активность связанных с ними ферментов; активизирует внутриклеточные структуры, антиоксидантную систему; тормозит перикисное окисление липидов в биомембранах; придает детоксицирующее и иммуномодулирующее действие. Применение биоженьшеня в дозе 3 г на килограмм живого веса предотвращает развитие морфофункциональных изменений в гепатоцитах печени норок.