Алкалоиды Berberis исследования алкалоидов Berberis amurensis rupr

Из молодых побегов amurensis rupr. Кромо ранее выделенных алкалоидов, получены берберрубин, оксиакантин, псевдопальматин и новое апорфиновое основание амуренин. На основании спектральных данных и химического преврашения установленно его строение.

Berberis amurensis rupr.является кустарником высотой до 3 м, относится к семейству Berberidaceace и произрастает, в основном, на Дальнем Востоке. Плоды, листья и этого растения издавна применяются в народной медицине при лечении гипертонии, заболеваний печении, а также как кровоостанавливающее средство.В научной медицине настойка листьев применяется при маточном кровотечении[1].

Ранее из этого растения выделены берберин, ятроррицин, пальматин, магнофлорин, бербамин и бербамунин[2,3,3,4,5,6].

В настоящей работе даются результаты исследования алколоидов молодых побегов. В.amurensis произрастающих в окрестностях поселения Барабаш (Приморский край, Хасанский район). Экстракцией этанолом изолировали 0,34 % суммы алкалоидов.Хроматографированием полученной суммы на колонке с силикагелом выделили берберин,берберрубин, псевдопальматин, ятроррицини новое основание амуренин (I) в виде хлоридов. Из третичных алкалоидов выделили оксиаконтин и бербамунин. Известные алкалоиды, выделенные из этого растения, идентифацировали путем физико – химических констант, спектральных данных, а также сравнением с подлиными образцами. Среди них берберрубин, оксиакантин и псевдопальматин были выделены из данного растения впервые.

Амуренин(I) представляет собой оптически активное красталлическое основание, обладает фенольными свойствами, дает кристаллическое о-ацетилпроизводное (II). В ИКспектре I имеются полосы поглощения при 3200 см^-I (от активного водорода), 1470, 1580,160 см^-I (от бифенильной системы) [6]. УФ- спектр Iиммеет максимумы при λ max 265, 275, 306, lgξ 4,23; 4,25; 4,16, характерные для монозамещенных апорфиновых алкалоидов в кольце в [7].

При масс-фрагментации I, под электронным ударом, наряду с образованием ионов с m/z326(М+), 325(М -I), 309 (М - 15), 296, 268 (М- 58), образуется максимальный ион с m/z 58, что характерно для четвертичных апорфинов[8]. Данные спектра ПМР I, снятые в CD 3 OD и отнесение сигналов протонов согласно их значений по хим. cдвигам приводятся в таблице 1.

По значению хим.сдвигов трехпротонный синглет при 3,60 м.д., однопротонный сигнал при 6,82 отнесены к С1-ОСН3 и С3-Н соответственно.

Метоксильная группа 3,82 м.д. может находится при С 2 или С 10. Для определения расположения гидроксильной и метоксильной группы в кольцах А и D мы исследовали спектр ПМРо-ацетиламуренина (II).

При сравнении данных спектра ПМР I и II можно обнаружить, что синглет при 6,82 в спектре I смещается в слабое поле только на 0,06 м.д. в спектре II, дублеты при 6,65 м.д. на 0,31 м.д. 7,11 на 0,24 м.д., а дублет при 7,72 м.д. на 0, 23 м.д. смещается в слабое поле.

Следовательно, в амуренине (I) фенольный гидроксил занимает положение при С-10, а метоксильная группа – при С 2

Данные спектров ПМР I и II снятых в СD3 OD (I МДС =0, м.д.)

Амурении (II)			Ацетиламуренин (II)
Протоны	Величина хим.сдвига м.д.	J (Гц)	Величина  хим.сдвига м.д.	J (Гц)
Н+ (СН 3 ) 2	3,30 (ЗН.с)	-	3,02 (ЗН. с)
	3,36 (ЗН.с)	-	3,38 (ЗН.с)
С I - ОСН 3	3,60 (ЗН.с)		3,60 (ЗН.с)
С 2 - ОСН 3	3,82 (ЗН.с)		3,83 (ЗН.с)
С 3 – Н	6,82 (IН.с)		6,88 (IН.с)
С 8 –Н	7, II (III. d)	8,5	7,35 (IН.d)	8,5
С 9 –Н	6,65(IН.d.d)	8,55;1,5	6,96(IН.d.d)	5,5;1,8
С 11 –Н	7,72 (IН.d)	1,5	7,95(IН.d)	1,8
С 10 –ОСОСН	-	-	9,23(ЗН.с)

Таким образом, на основании спектральных данных и химического превращения предложено химическая структура 1

амуренина.

3     4

9               1.R=H    2.R=COCH 3

ЭКСПРЕМЕНТАЛЬННАЯ ЧАСТЬ

Ик – спектры снимали на спектрометре UR- 20, УФ – на спектрометре HifaеhiEPS - 3 Т (этанол),масс- спектры на спектрометре М Х – I310 с системой прямого ввода в ионный источник, при ионизирующем напряжении 60- 70 В и температуре 160 – 170 0 , ПМР – на спектрометре вs – 567 А Tesla (ЧСФР) в дейтерометаноле с добавлением дейтерохлороформа.

Химического сдвиги приведены относительновнутренного этанола ГМДС в б шкале.

Для ТСХ использовали силикагель марки LS5/40 (ЧСФР), для колоночной хроматографии - силикагель марки КСК с размерами частиц 125 -160 мм и системы растворителей: I) хлорофоррм - метанол (9:1,) (4:1) ; 2) хлороформ - метанол- конц НС1 (50:50:0,1; 3) хлороформ - этанол (4:1).

ЭКСТРАКЦИЯ МОЛОДЫХ ПОБЕГОВ В.AMURENSIS RUPR.

1240г измельченних молодых побегов трехкратно экстрагировали этанолом холодным способом. Смешанные спиртовые экстракты упарили, густой остаток растворили 5%-ным раствором соляной кислоты. Полученный раствор фильтровали, двухкратно промили эфиром. Затем подщелочили 25% - ным раствором аммиака до РН 9 и алкалоиды последовательно извлекали эфиром, хлороформом и смесью хлороформа с этанолом (4:1). После упаривания растворительей получили 0,68 г эфирной, 2,11 г хлороформной суммы и 1,34 г суммы алкалоидов полученной из смеси хлороформа с этанолом. (Сумма четвертичных алкалоидов). Общая сумма алкалоидов составляет 0,34% от веса сухого растения.

РАЗДЕЛЕНИЯ СУММЫ АЛКАЛОИДОВ

0,680 г эфирной суммы хроматографировали на колонке с силикагелем (20 г). Алкалоиды элюровали хлороформом и смесями хлороформа с метанолом в различных соотношениях. При элюировании смесью хлороформ - метанол (97:3) выделили 0,23 г оксиакантина, а при 96:4 0,34 г - бербамунина.

2,15 г хлороформной суммы хроматографировали на колонко с силикагелем аналогично эфирной суммы. При этом выделили 0,72 г берберина, 0,14 г псевдопальматина, 0,24 г берберрубина, 0,12 г ятроррицина и 0,07 г амуренеина в виде хлоридов.

Разделением четвертичной суммы, аналогично хлороформной суммы, выделили допольнительно 0,31 г берберина, 0,26 г ятроррицина и 0,12 г псевдопальматина в виде хлоридов.

Амуренин хлорид. Кристаллизуется из ацетона, т.пл.I94- 195 ⁰

(хлорид), /α / D - 164 ⁰( С.0, 03. СН 3 ОН).

АЦЕТИЛИРОВАНИЕ АМУРЕНИН ХЛОРИДА

К 0,04 г амуренина хлорида добавили 2 мл свежеперегнаного уксусного ангидрида и 0,5 мл абсолютного пиридина. Смесь кипятили до полного растворения основания. Затем упарили на водяной бане досуха. К остатку прибавили 5 мл ацетона и нагревали до полного растворения. При охлаждении из раствора вышли бородавчатые кристаллы 0–ацетил амуренина хлорида (II). Т.пл. 186 – 187 0

Масс:м/z 368 (М +), 367, 359, 352, 325, 58 (100%). ИК Y^КВr мах 1760 см^-1