Аллельный полиморфизм генов 11_-1Р и IL-18 и рак молочной железы

ГУ «НИИ клинической иммунологии СО РАМН», г. Новосибирск1

ГУ «НИИ терапии СО РАМН», г. Новосибирск2

Институт цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск3

ГУ «НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМН»4

Актуальность. Гены семейства ИЛ-1 играют важную роль в регуляции механизмов опухолевого роста и противоопухолевого иммунитета, так, ИЛ-1B и ИЛ-18 – это полифункциональные цитокины, участвующие в процессах злокачественной трансформации, роста опухоли, инвазии и метастазировании. В особенности важен ИЛ-18, который влияет на дифференцировку преимущественно Т-хелперов 1-го типа и активирует NK клетки, участвуя в формировании клеточного иммунного ответа и противоопухолевого иммунитета. Известно, что аллельный полиморфизм промотора гена может влиять на уровень продукции соответствующего медиатора. Противоречивые сведения, полученные при исследовании связи полиморфных вариантов генов этих цитокинов с опухолями различной локализации (в том числе и рака молочной железы) в различных популяциях, свидетельствуют о необходимости исследования их роли в конкретной популяции для выяснения прогностической значимости.

Цель исследования . Получить данные для сравнительного анализа распределения частот аллелей генов ИЛ-18 и ИЛ-1B у больных раком молочной железы и здоровых женщин Западной Сибири.

Материал и методы. Образцы ДНК женщин, больных РМЖ, были получены в НИИ онкологии (г. Томск), здоровых женщин группы популяционного контроля – в НИИ терапии (г. Новосибирск). Выделение ДНК из образцов периферической крови осуществлялось депольно-хлороформным методом с протеина- зой К. В работе использовались специфические последовательности праймеров для ПЦР. Для точек IL-1β(+3954)C/T и IL-1β(-31)С/T использовался ПДРФ-анализ с рестриктазами Taq I и Alu I соответственно. Для точек IL-18(-137) C/G и IL-18(-607)C/A использовалась аллель-специфическая полимеразная цепная реакция. Статистическая обработка производилась с помощью программы Statistica 5.0.

Результаты. Впервые получены данные о распределении аллельных вариантов генов ИЛ-1β и ИЛ-18 в группе популяционного контроля среди женщин Сибирского региона. Для ИЛ-18(-137)C/G: GG – 39,2 %, GС – 55,1 % и СС – 5,7 %. Частоты аллелей: С – 0,33 и G – 0,67. Для ИЛ-18(-607)C/A: СС – 35,8 %, CA – 54,3 % и AA – 9,9 %. Частоты аллелей: С – 0,63 и А – 0,37. Для ИЛ-1β(-31)C/T: TT – 41,9 %, CT – 46,6 % и CC – 11,5 %. Частоты аллелей: С – 0,35 и Т – 0,65. Для ИЛ-1β(+3954)C/T: CC – 52,9 %, CT – 40,9 % и ТТ – 6,2 % соответственно. Частоты аллелей: С – 0,73 и Т – 0,27. Полученные нами данные о распределении частот генотипов и аллелей в целом более характерны для кавка-зоидных популяций. Анализ частот генотипов показал достоверное различие частот генотипов ИЛ-18(-137)CC и ИЛ-18(-607)CC в группе больных РМЖ и здоровых женщин популяции Западной Сибири: 12 % и 5,7 %, 47,2 % и 35,8 % соответственно. Для генотипа ИЛ-18(-137)CC – ОШ=0,94 (0,73–1,2) и для генотипа ИЛ-18(-607) CC – ОШ=1,4 (1,11–1,8). Мы не получили статистически значимых отличий в распределении генотипов ИЛ-1β(+3953)С/Т и ИЛ-1β(-31)C/T среди женщин, больных РМЖ, и здоровых женщин Западной Сибири. В наших исследованиях, а также исследованиях других авторов было показано влияние полиморфного варианта гена ИЛ-18 на продукцию ИЛ-18 фракцией моноцитов. Так, в частности, продемонстрировано, что у добровольцев с генотипом -137GG была выше спонтанная и ЛПС-стимулированная продукция ИЛ-18 по сравнению с генотипом -137GC. Так же показано увеличение спонтанной продукции ИЛ-18 в случае ИЛ(-607)АA и стимулированной продукции для генотипа -607 СА по сравнению с генотипом -607 СС. Так как ИЛ-18 влияет на дифференцировку преимущественно Т-хелперов 1-го типа и активирует NK клетки, участвуя в формировании клеточного иммунного ответа и противоопухолевого иммунитета, то, исходя из результатов наших исследований, а также литературных данных, можно предположить, что повышенная частота встречаемости аллеля С в позиции -137 и -607 промоторного участка гена ИЛ-18 в группе больных РМЖ женщин приводит к формированию менее эффективного противоопухолевого иммунного ответа за счет снижения уровня продукции ИЛ-18 иммунокомпетентными клетками.

Выводы. Полученные нами данные о распределении частот аллельных вариантов генов цитокинов ИЛ-1β и ИЛ-18 в группе популяционного контроля среди женщин Сибирского региона в целом близки к распределению частот аллельных вариантов среди кавказоидных популяций. Результат анализа частот генотипов показал достоверное различие частот генотипов ИЛ-18(-137)CC и ИЛ-18(-607)CC в группе женщин, больных РМЖ, и здоровых женщин популяции Западной Сибири: 12 % и 5,7 %, 47,2 % и 35,8 % соответственно. Для генотипа ИЛ-18(-137)CC – ОШ=0,94 (0,73–1,2) и для генотипа ИЛ-18(-607)CC – ОШ=1,4 (1,11–1,8). Статистически значимых отличий в распределении генотипов ИЛ-1β(+3953)С/Т и ИЛ-1β(-31) C/T между больными РМЖ и здоровыми женщинами Западной Сибири не выявлено.

Работа выполнена в рамках интеграционного проекта СО РАМН «Молекулярногенетические механизмы формирования и прогрессии РМЖ».