Анализ статуса метилирования гена опухолевой супрессии гена RAR2 в циркулирующих ДНК крови при раке легкого

Материал и методы. В работе использованы образцы крови здоровых индивидуумов и боль- ных раком легкого. Кровь разделяли на плазму и клетки крови, фракцию внДНК, связанных с клеточной поверхностью, получали последовательной обработкой клеток фосфатным буфером, содержащим ЭДТА, и раствором трипсина. Уровень метилирования гена опухолевой супрессии RARβ2 оценивали методом ПЦР.

Результаты. Показано, что метилированные формы промоторов генов RARβ2 могут быть детектированы в 75–84% случаев в опухолевой ткани и плазме крови у больных раком легкого и в 23% случаев в ткани и плазме крови у индивидуумов, не обнаруживающих симптомов развития онкозаболеваний (Hsu H.S. et al., 2007; Brait M. et al., 2009). В силу этого необходимым условием создания методов анализа, позволяющих диагностировать рак, является не только качественная, но и количественная оценка уровня метилирования промоторных областей генов в норме и при развитии злокачественных опухолей. Методом количественной ПЦР нами показано, что уровень метилирования гена RARβ2 в цирДНК крови достоверно выше при раке легкого, чем в норме. При этом количество метилированных форм гена RARβ2 в цирДНК в плазме и цирДНК, связанных с клеточной поверхностью, представлено в соотношении 1:1.

Выводы. Полученные данные свидетельствуют о том, что определение уровня метилирования последовательностей генов опухолевой супрессии в циркулирующих ДНК крови может быть использовано для поиска и верификации новых диагностических ДНК-маркеров, ассоциированных с развитием РЛ.

СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2010. Приложение № 1