Анализ таргетных противоопухолевых пептидов - ингибиторов циклин-зависимой киназы 6

Российское общество клинической онкологии том / vol. 10 №3s1 • 2020

MALIGNANT TUMOURS

Russian Society of Clinical Oncology

Экспериментальная онкология ферации оценивалось в режиме «реального времени» системой RTCA iCELLIgence (ACEA Biosciences) и методом проточной цитометрии по анализу фаз клеточного цикла, окраской PI фиксированных образцов.

Результаты: Исследуемые ИПК достоверно (р < 0,05) увеличивали уровень апоптоза и некроза в культурах пролиферирующих опухолевых клеток, клеточная гибель возрастала пропорционально концентрации пептидов в дозах от 10 до 40 мкМ, и составляла от 62,4%± 5,8% до 85,3%± 6,7 % в зависимости от структуры ИПК и клеточной линии. После 24 часового воздействия на клетки ИПК апоптоз составлял от 29,7%± 3,8% до 76,1%± 8,3%, также в образцах наблюдалось достоверное снижение уровня экспрессии Bcl-2. Было обнаружено, что наибольший цитотоксический и проапоптотический эффекты оказывали последовательности ИПК, имеющие в структуре несколько молекул изолейцина.

Анализ антипролиферативных свойств ИПК показал, что при увеличении концентрации пептидов до 20 мкМ наблюдается полная остановка процессов пролиферации, причем большинство клеток находится в G1-фазе клеточного цикла, т. е. блокируется переход G1-S (основная точка воздействия CDK6). Также отмечено снижение экспрессии pRb (в 1,8–2 раза по сравнению с контрольными значениями), что подтверждает специфичность цитостатического воздействия. Т. о. было показано, что пептидные последовательности, полученные с помощью методов математического моделирования, проявляют выраженные свойства ингибиторов CDK6.

Заключение: Разработанные пептидные конструкции оказывают выраженные специфические цитотоксический и цитостатический эффекты на опухолевые клетки и могут являться потенциальными кандидатами для дальнейшей разработки противоопухолевых препаратов.

Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 20-015-00068/20.