Антагонистическая активность бифидобактерий и фитобактериальных средств

Начальной точкой развития дисбиотических состояний различных биотопов организма является подавление индигенного микробного компонента, прежде всего бифидо- и лактобактерий, которые в норме оказывают сдерживающее влияние на размер популяций эндогенных условно-патогенных микроорганизмов и в значительной степени ответственны за поддержание резистентности биотопа к колонизации экзогенными патогенными микроорганизмами, так называемой «колонизационной резистентности» [1, 2, 5].

В последние годы особый интерес для исследователей и клиницистов представляет микробиоценоз кишечника, нарушение которого сказывается на состоянии органов и систем всего организма. В результате развившегося дисбактериоза кишечника бактериальные метаболиты могут переносится в кровеносное русло. Это создает дополнительную нагрузку на функциональные возможности детоксицирующих систем организма, в свою очередь, различные повреждения этих систем ведут к нарушению микробиоценоза того или иного биотопа.

При многих патологических состояниях человека и животных микрофлора кишечника претерпевает существенные изменения в результате прямого воздействия токсического соединения на микроорганизмы или опосредованно за счет тех или иных эндогенных продуктов.

Снижение колонизационной резистентности и барьерной функции кишечника способствует контаминации микрофлорой толстого отдела кишечника верхних отделов желудочнокишечного тракта и транслокации факультативных микроорганизмов из просвета кишечника во внутренние органы.

Таким образом, контроль за составом нормальной микрофлоры кишечника и разработка методов коррекции нарушений микробной экологии являются важным этапом профилактики и лечения различных болезней. В профилактике и лечении дисбактериозов различных биотопов в настоящее время делается упор на применение биологических препаратов из нормальной микрофлоры кишечника, в частности бифидобактерий [2,7].

Бифидобактерии играют весьма существенную роль в нормализации белкового, углеводного, липидного и минерального обмена организма хозяина за счет продукции большого количества ферментов и других биологически активных веществ благодаря антагонистической активности повышают резистентность организма к ряду патогенных микроорганизмов, а также оказывают позитивное регулирующее воздействие на общий иммунологический статус макроорганизма [4].

Все эти положительные свойства бифидобактерий позволили использовать их как основу при создании фитобактериальных средств, обладающих выраженным комплексным стимулирующим действием на макроорганизм в целом или на его отдельные системы и органы.

Терапевтическая эффективность фитобакте-риальных средств заключается в содержании в них большого количества жизнеспособных клеток бифидобактерий, способных приживаться в кишечнике и обладающих антибактериальной активностью по отношению к посторонней условно-патогенной и патогенной микрофлоре.

Целью настоящего исследования явилось изучение антагонистической активности бифидобактерий шт. B.bifidum 1 и шт. B.longum B 379 M , сухих водорастворимых экстрактов корней солодки голой Glycyrrhiza Glabra L. (ГФХ, ст.260, Extractum Glycyrrhizae siccum) и плодов шиповника Rosa (ГФ XI, ст.38), а также фито- бактериальных средств с использованием данных штаммов бифидобактерий и водорастворимых растительных экстрактов по отношению к тест-культурам условно-патогенных и патогенных микроорганизмов (Е.coli 408 Новгордская, S.aureus 209 p, Pr.vulgaris 50, Ps.aeruginosa ATCC10145).

В сухом экстракте корней солодки содержание глицирризиновой кислоты не менее 17%, в экстракте из плодов шиповника аскорбиновой кислоты не менее 0,2%.

Антагонистическую активность бифидобактерий, водных растворов растительных экстрактов и фитобактериальных средств определяли методом серийных разведений [3,6]. Для этого тест-культуры культивировали совместно с фильтратами бифидобактерий, 1%-ными водными растворами растительных экстрактов и фитобактериальными средствами в разных разведениях.

При изучении антагонистической активности бифидобактерий шт. B. bifidum 1 и B. longum B 379 M по отношению к S.aureus 209 p, Pr.vulgaris 50, Ps.aeruginosa ATCC 10145 и Е.coli 408 Новгордская установлен антагонизм микрофлоры фитобактериальных средств и водорастворимых экстрактов из корней солодки голой и плодов шиповника, который носил как бактерицидный (подавление роста), так и бактериостатический характер (угнетение роста) тест-культур (табл. 1).

Таблица 1

Примечание: + - отсутствие роста; +- - торможение роста; бифидобактерии культивированы на молочной основе;

экстракты - 1% водные растворы; фитобактериальные средства - бифидобактерии на молочной основе с экстрактами.

Антагонистическая активность бифидобактерий, растительных экстрактов и фитобактериальных средств in vitro

Рост тест-культур Ps.aeruginosa ATCC 10145 и Pr.vulgaris 50 подавлялся в разведениях фильтрата 1:2 и 1:4 соответственно, а бактерио-ститическое действие проявлялось в разведениях 1:32 и 1:16. Бифидобактерии шт. B.longum B 379 M проявляли более высокую антагонистическую активность по отношению к изучаемым условно-патогенным тест-культурам, чем бифидобактерии шт. B.bifidum 1 .

Подавление роста тест-культур Е.coli 408 Новгордская и S.aureus 209 p наблюдали в разведениях бифидобактерий шт. B.longum B 379 M 1:4, угнетение роста в разведении 1:64.

Фитобактериальные средства с бифидобактериями шт. B.longum B 379 M с экстрактами из корней солодки голой и плодов шиповника обладают более высокой антагонистической активностью по сравнению с бифидобактериями шт. B.bifidum 1. Очевидно, это объясняется тем, что бифидобактерии B.bifidum 1, культивируе- мые на молочной основе, обладают более слабой биохимической активностью, чем бифидобактерии B.longum B 379 M.

Самая высокая антибактериальная активность выявлена у фитобактериального средства с использованием бифидобактерий шт. B. longum B 379 M с экстрактом плодов шиповника и для культивирования бифидобактерий на молочной основе для конструирования фитобактериаль-ных средств рекомендован шт. B.longum B 379 M. Наряду с определением антагонистической активности фитобактериальных средств были проведены исследования по изучению стабильности этого свойства при хранении фитобакте-риальных средств в течение 7 суток при температуре 2-4 ^оС. Полученные данные показали, что хранение указанных средств в течение этого срока не снижало их антибактериальную активность.

Таким образом, учитывая, что в лечении повреждений печени существенное место занимают средства растительного происхождения, а в терапии – нарушения микробной экологии кишечника, наиболее распространенным способом является использование эубиотиков, в частности бифидобактерий. Целесообразным представляется применение сочетания фито- и бактериопрепаратов для профилактики и лечения заболеваний органов гепатобилиарной системы.