Антибиотикочувствительность кишечной микрофлоры молодняка сельскохозяйственных и лабораторных животных

Как известно, длительное и систематическое применение антибиотиков приводит к формированию антибиотикорезистентной части популяции условно-патогенных микроорганизмов и к изменениям нормального состава микрофлоры желудочно-кишечного тракта, а именно к стойким кишечным дисбак- териозам протейной, кандидозной, клостридиозной, стафилококковой этиологии, которые сопровождаются повышением колонизационной активности патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, а также удлинением сроков их персистирования в кишечнике макроорганизма [3, 4].

Цель исследований . Изучение антибиотикочувствительности кишечной микрофлоры молодняка сельскохозяйственных и лабораторных животных.

Методика и результаты исследований . Материалом для исследований послужили свежевыделенные фекалии животных. Исследуемый материал суспендировали в изотоническом растворе хлорида натрия в отношении 1:10 и высевали на плотные питательные среды. Все посевы инкубировали в термостате при температуре 37^°С 18–24 ч. В пробах фекалий проводили качественный учет энтеробактерий, сальмонелл, стафилококков и энтерококков. Со сред обогащения делали высев на среду Эндо для выделения энтеробактерий и на висмут-сульфит агар для определения сальмонелл. Для выращивания стафилококков и энтерококков использовали специальные питательные среды: стафилококкагар и энтерококкагар. Всю работу проводили с соблюдением стерильности, со сменой пипеток при переходе от предыдущего разведения к последующему. Для идентификации и дифференциации выделенных микробных культур использовали набор для биохимической идентификации микроорганизмов: «СИБ» (системы индикаторных бумажек для межродовой и видовой идентификации энтеробактерий). Результаты исследований представлены в табл. 1.

Видовая принадлежность выделенных микробных культур

Таблица 1

В результате бактериологических исследований на основании изученных свойств из кала животных было выделено 116 микробных культур, из них Escherichia coli – 5 культур, Edwardsiella tarda – 4, Edwardsiella hoshinae – 3, Enterobacter agglomerans – 7, Enterobacter gergoviae – 3, Enterobac-ter aerogenes – 2, Enterobacter sakazakii – 3, Enterobacter cloacae – 2, Enterococcus faecalis – 8, Enterococcus faesum – 10, Citrobacter amalonaticus – 4, Citrobacter freundii – 6, Citrobacter diversus – 3, Klebsiella pneumonia subsp.thinoscleromatic – 3, Klebsiella pneumonia subsp. pneumonia – 4, Klebsiella pneumonia subsp. ozaenae – 3, Klebsiella oxytoca – 4, Lactobacillus spp. – 4, Proteus vulgaris – 3, Salmonella Arizona, Salmonella gallinarum – 2, Serratia rubidaea – 5, Shigella dysenteriae – 4, Shigella boydii – 3, Shigella flexneri – 5, Staphylococcus epidermidis – 5, Staphylococcus aureus – 7, Yersinia en-terocoitica – 6 культур.

Чувствительность выделенных микробных культур к различным антибиотикам определяли методом диффузии в агар с применением стандартных дисков, содержащих антибиотики. В стерильные чашки Петри разливали по 15 мл плотной питательной среды МПА. На поверхность застывшего и слегка подсушенного агара стерильно вносили 0,5–1,0 мл суспензии суточной культуры исследуемых культур.

Бактериальную взвесь равномерно распределяли по поверхности агара стерильным шпателем. После этого на поверхность засеянной среды стерильным пинцетом раскладывали диски с антибиотиками по 5–6 дисков в каждую чашку на расстоянии 25 мм от центра чашки. Чашки выдерживали в термостате при 37°С 16–18 ч, после чего читали результаты опыта путем измерения зон задержки роста микробов вокруг диска, включая диаметр самого диска, и результат выражали в миллиметрах. При зоне задержки до 10 мм штамм расценивался как антибиотикорезистентный, 11–15 мм – как слабо чувствительный, 15–25 мм – как чувствительный к антибиотикам. Зоны, превышающие 25 мм, свидетельствовали о высокой чувствительности микроорганизма к данному антибиотику. Результаты исследований представлены в табл. 2.

Таблица 2

Сводные данные чувствительности выделенных микробных культур к антибиотикам

Все исследованные микробные культуры, выделенные из фекалий животных, проявляли разную степень чувствительности и устойчивости к антибиотикам.

Чувствительность выделенных микробных культур к антибиотикам была следующей: наибольше количество выделенных культур проявляли высокую чувствительность к цефолатину – 81 культура (67,5 %); наименьшее количество культур проявляли антибиотикорезистентность и слабую чувствительность к цефолатину – по 3 культуры (2,5 и 2,5 %) соответственно, чувствительны к цефолатину оказались 33 культуры (27,5 %).

Наибольшее количество культур оказались чувствительны к цефотаксиму – 57 культур (47,5 %), антибиотикорезистентные – 31 культура (25,8 %), слабочувствительные – 9 культур (7,5 %), высокочувствительные – 23 культуры (19,1 %).

К полимиксину оказалось чувствительно наибольшее количество антибиотикорезистентных и наименьшее количество чувствительных микробных культур – по 97 и 8 культур (80,8 и 6,6 %) соответственно, слабочувстительны к антибиотику оказались 15 культур (12,5 %). Высокочувствительных микробных культур к антибиотику выявлено не было.

Антибиотикорезистентность к эритромицину отмечена у 21 культуры (17,5 %), чувствительные к антибиотику оказались 3 культуры (44,1 %), высокую чувствительность к эритромицину проявили 46 культур (38,3 %). Слабочувствительных микробных культур к антибиотику выявлено не было.

Чувствительность к левомицетину проявили 9 культур (32,5 %), высокочувствительность к антибиотику отметилась у 74 культур (61,6 %), антибиотикорезистентость к антибиотику проявили 7 культур (5,8 %).

Антибиотикорезистентность к тетрациклину установлена у 18 культур (15 %), слабую и высокую чувствительность к антибиотику имели соответвенно 31 и 43 культуры (25,8 и 35,8 %), чувствительность к антибиотику выявлена у 28 культур (23,3 %).

Наибольшее количество слабочувствительных и наименьшее количество высокочувствительных культур выявлено к линкомицину – 39 и 17 культур (32,5 и 14,1 %), антибиотикорезистентность проявилась у 22 культур (18,3 %), чувствительность к антибиотику проявили 42 культуры (35 %).

Антибиотикорезистентность к бензилпенициллину проявили 66 культур (55 %), чувствительность к антибиотику отметилась у 16 культур (13,3 %), высокую чувствительность к бензилпенициллину проявили 38 культур (31,6 %). Слабочувствительных микробных культур к данному антибиотику выявлено не было.

Результаты проведенных исследований по определению антибиотикочувствительности к выделенным микробным культурам показали, что наибольший процент чувствительности был к цефа-лотину (67,5 %) и цефотаксиму (47,5 %), слабочувствительны культуры были к линкомицину (32,5 %), антибиотико-резистентные оказались к полимиксину (80,8 %).

Заключение . Учитывая распространение устойчивости условно-патогенных и патогенных бактерий к антимикробных препаратам и возрастающее число полирезистентных видов, для лечения кишечных инфекций необходимо подбирать соответствующее сочетание антибиотиков и биологических препаратов на основе живых микроорганизмов – представителей нормальной микрофлоры – пробиотикам, так как они обладают антагонистической активностью в отношении патогенных и условно-патогенных штаммов, противостоящих развитию устойчивости микроорганизмов и не нарушающих состав полезной микрофлоры животных.