Антиоксидантная защита костного мозга при действии стресса

В работе отражена динамика состояния антиоксидантных ферментов в костном мозге и сыворотке крови у животных при действии 5-часового эмоционально болевого стресса (ЭБС).

По современным представлениям одним из принципов регуляции стрессовых состояний является активация естественных защитных механизмов организма [1, 3, 5]. При формировании адаптационных защитных эффектов значительная роль принадлежит системе антиоксидантов.

Вместе с тем вопрос о значительной роли антиоксидантов при ЭБС в костном мозге изучен недостаточно. Целью данной работы является изучение активности антиоксидантых ферментов (СОД, каталазы), гуморального белкового антиок-сиданта-церулоплазмина (ЦП) в сыворотке крови и гомогенате костного мозга при действии ЭБС.

Материалы и методы исследования

ЭБС воспроизводили у 48 самцов линии Вис-тар массой 180-200 г, по ранее описанной методике [2, 7] в форме так называемого невроза тревоги, продолжающегося 1,5 ч. Главными чертами этой модели ЭБС являются, во-первых, наличие конфликта между выработанным условным рефлексом избегания тока путем ухода на платформу и безусловным болевым раздражением на этой же платформе и, во-вторых, напряженное ожидание электроболевого воздействия, обусловленного тем, что электрические воздействие на платформе наносились через достаточно длительные и случайные промежутки времени.

Активность супероксиддисмутазы (СОД) (К.Ф.1.15.1.1.) определяли на основании измерения скорости реакции восстановления нитротетра-золия синего (НТС) в присутствии НАДН и феназинметасульфата при неферментативном образовании супероксидного радикала [6]. Определение активности каталазы (К.Ф.1.11.1.6.) осуществляли методом, основанным на реакции разложения перекиси водорода каталазой и определении свето-поглощения комплекса перекиси водорода с молибдатом аммония при X = 410 нм. 25 мкл гомогената слюны смешивали с 2 мл 0,03 % перекиси водорода (4). Определение церулоплазмина (ЦП) в сыворотке крови проводили по модифицированному методу Ревина (Бестужева С.В., Колб ВТ., 1976).

Статистическую обработку полученных данных проводили с вычислением критерия Стьюдента, использую компьютерную программу «Sta-tistika 5.0».

Результаты и обсуждение

На рис. 1 представлены результаты опыта по определению антиоксидантных ферментов и витамина Е в сыворотке крови. Из анализа данных рис. 1 следует, что активность СОД уменьшается сразу через 1 ч ЭБС на 20 % (р < 0,01), через 5 ч-на 17 % (р < 0,05). В восстановительный период

И СОД

■ Каталаза

□ Церулоплазмин

□ Витамин Е

Рис. 1. Антиоксидантная защита при ЭБС в сыворотке крови животных: 1 - контроль; 2 - ЭБС 1 час; 3 - ЭБС 5 часов; 4 - ЭБС 5 часов + 2 суток восстановления. Достоверность различий с контролем по t-критерию Стьюдента: * - р < 0,05; ** - р < 0,01

Латюшин Я.В.

через двое суток после пяти часового ЭБС активность СОД увеличилась, но оставалась ниже нормы на 8 %. Активность фермента каталазы уменьшилась через 1 ч ЭБС на 19 % (р < 0,01), через 5 ч - на 16 % (р < 0,05). Через двое суток после 5-часового ЭБС активность каталазы нормализовалась.

Параллельно с СОД обезвреживания супероксидного аниона кислорода выполняет церулоплазмин (ЦП) [8]. Содержание ЦП через 1 ч ЭБС снизилось на 20 % (р < 0,01), через 5 ч ЭБС - на 12 % и через двое суток после ЭБС достигло исходных величин.

Эндогенный витамин Е также обладает антиоксидантной защитой и относится к структурным антиоксидантам. Через 1 ч ЭБС содержание витамина Е снижается на 12,2 % (р < 0,05), через 5 ч ЭБС - на 9 % и через 5 ч + 2 сут. восстановления -на 6 % (рис. 1).

Витамин Е, эффективно реагирует со свободными радикалами, образующимися при распаде гидроперекисей, снижая возможность образования ПОЛ. Последовательное воздействие двух координированных между собой ферментных систем -супероксиддисмутазы и каталазы - ингибирует образование гидроксильных радикалов. Поскольку эффективность взаимодействия гидроксильных радикалов с полиеновыми липидами исключительно высока и имеет лишь диффузионные ограничения, эти ферментные системы играют центральную роль в регуляции ПОЛ на стадии инициирования.

ся на 24 % (р < 0,01). Через двое суток после 5-часового стресса содержание ЦП увеличивается на 20 % (р < 0,01).

Активность ферментов СОД и каталазы в костном мозге через 1 ч ЭБС увеличивается на 10 и 9 % соответственно (р < 0,05). Через 5 ч ЭБС и через 2 суток после 5 ч ЭБС активность ферментов в костном мозге нормализовалась.

Таким образом, при эмоционально болевом стрессе антиоксидантная система защищает клетки костного мозга от повреждения.