Апоптоз и ангиогенез в опухолях эндометрия: взаимосвязь с активностью ферментов синтеза и метаболизма эстрогенов



АПОПТОЗ И АНГИОГЕНЕЗ В ОПУХОЛЯХ ЭНДОМЕТРИЯ: ВЗАИМОСВЯЗЬ С АКТИВНОСТЬЮ ФЕРМЕНТОВ СИНТЕЗА И МЕТАБОЛИЗМА ЭСТРОГЕНОВ

Н.В. Бочкарева, Н.Г. Крицкая, О.В. Савенкова, Л.А. Коломиец,

А.Л. Чернышова, И.В. Кондакова, А.Б. Мунтян

ГУ «НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН», г. Томск

Многочисленные исследования свидетельствуют о важной роли эстрогенов в инициации и поддержании роста злокачественных опухолей эндометрия. Ферменты синтеза

(ароматаза, стероид сульфатаза) и метаболизма эстрогенов (эстроген гидроксилазы, катехол-О-метилтрансфераза (КОМТ) и глутатион-S-трансфераза (ГТ)) в значительной степени регулируют соотношение процессов пролиферации, дифференцировки, апоптоза и ангиогенеза в злокачественных опухолях эндометрия. Поэтому целью настоящего исследования явилось изучение активности ферментов синтеза и метаболизма эстрогенов во взаимосвязи с экспрессией р53, рецепторами эстрогенов (ER) и прогестерона (PR), маркерами апоптоза (Bcl-2 и Bax) и ангиогенеза (СD31) в опухолях эндометрия.

В исследование были включены 17 больных раком эндометрия с I–II стадией заболевания. Гистологические срезы готовились из парафиновых блоков по традиционной методике. Иммуногистохимические исследования проводили по стандартной методике. Использовали визуализирующую систему LSAB2 фирмы “Dako”, хромоген – ДАБ, препараты докрашивали гематоксилином. Использовали специфические антитела к вышеперечисленным маркерам фирм “Dako”, “Новокастра”, “BD Biosciences-Pharmingen”. Активность ферментов определялась в образцах опухолевой ткани, предварительно гомогенизированной в жидком азоте, с использованием радиометрических и спектрофотометрических методик.

Известно, что белки семейства Bcl являются либо индукторами (Bax и др.), либо ингибиторами (Bcl-2 и др.) апоптоза. В опухолях эндометрия, экспрессирующих Bcl-2 (n=10), выявлена высокая встречаемость белка р53 – продукта мутантного гена р53 (80 %), высокая экспрессия проапоптотического белка Bax и преимущественно высокая и умеренная степень васкуляризации опухолей (70%). B Bcl-2 – отрицательных опухолях (n=7) белок р53 выявлялся только в 57 % случаев, степень кровоснабжения опухолей была в основном слабая (в 71 %), однако экспрессия Bax была также высокой. Причем Bcl-2-положительные опухоли имели более высокую активность ароматазы и КОМТ по сравнению с Bcl-2-отрицательными опухолями. При анализе клинико-морфологических параметров выявлено, что все опухоли, не экспрессирующие Bcl-2, являлись эндометриоидными карциномами, в то время как среди Bcl-2-положительных опухолей в 40 % выявлены неэндометриоидные карциномы, характеризующиеся агрессивным течением. Таким образом, проведенное исследование показало, что опухоли, экспрессирующие и неэкспрессирующие антиапоптотический протеин Bcl-2, харак- теризуются различным уровнем экпрессии р53, неоангиогенеза и активностью ферментов синтеза и метаболизма эстрогенов.

Известно, что плотность кровеносных сосудов во многих типах опухолей является прогностическим фактором в отношении риска метастастазирования. B опухолях эндометрия со слабым кровоснабжением (n=8) ингибитор апоптоза Bcl-2 экспрессировался только в 37 % случаев, экспрессия Bax была от слабой до выраженной. Около половины опухолей несли оба вида рецепторов. Опухоли с умеренным и выраженным кровоснабжением (n=9) достаточно часто экспрессировали Bcl-2 (в 66 %), в то же время для этих опухолей характерна более низкая интенсивность экспрессии Bax. Причем опухолей с рецепторным фенотипом ER+PR+ мы не выявили, преобладали опухоли с фенотипом ER-PR+ (55 %). Интересно, что для опухолей эндометрия с умеренным и выраженным кровоснабжением была характерна высокая активность ароматазы, стероидсульфатазы и эстрогенгидроксилаз, превышающая активность данных ферментов в опухолях со слабым кровоснабжением более чем в 2 раза.

Анализ основных клинико-морфологических параметров в данных подгруппах не выявил существенных различий в отношении возраста, стадии, гистотипа и степени дифференцировки, в то время как анализ биохимических и иммуногистохимических параметров показал, что опухоли с различной степенью кровоснабжения являются принципиально разными. B опухолях с развитой кровеносной сетью активность ферментов синтеза эстрогенов и I фазы метаболизма была намного выше, чем в опухолях со слабым кровоснабжением. B то же время в этих опухолях в большинстве случаев отсутcтвуют ER и выявлена высокая частота экспрессии Bcl-2, что в совокупности может свидетельствовать, во-первых, о высокой резистентности таких опухолей к апоптотическим сигналами, во-вторых, о высокой вероятности реализации генотоксических эффектов метаболитов эстрогенов у данной подгруппы больных.

B целом, необходимо проведение дополнительных исследований с целью изучения прогностической значимости маркеров апоптоза, ангиогенеза и активности ферментов синтеза и метаболизма эстрогенов у больных раком эндометрия.