Белково-липидный профиль крови при аутоиммунных состояниях в эксперименте

Значительным шагом вперёд в решении вопроса атеросклерогенеза стало выявление важные роли аутоиммунного компонента (1,8) состоящий из <<β>> и при <<β>> липопротеидов.

Накопившиеся данные обуславливали утверждение аутоиммунной теории механизма развития атеросклероза, требующий дальнейшего экспериментального обоснования. Моделирование атеросклеротического том направлений для поиска моделей максимально приближённых к естественной патологии человека необходимы.

Материал и методы исследований. Следуя ранее (2) разработанному принципу воспроизведение патологических процессов различных органах по аутоиммунной типу органоспецифическая сенсибилизация, нами смоделировано аутоаллергическое поражение сосудов путём специфической иммунизации тканевым гомоантигеном. При этом ставилась задача, выявление возможности детерминации становления симптомов, соответсвующих атеросклеротическому процессу. Учитывая, что в развитии последнего изменения белково-липидного профиля крови является характерным, нами предприняты в этом направления исследования их сдвигов в динамике.

Проведены хронические опыты на 10 собаках иммунизированных сосудистотканевым гомоантигеном приготовленным по разработанному на нашей кафедре методом.

Сосудисто-тканевой гомоантиген вводилось подкожно пятикратно с интервалом в дня из расчёта 0.5мл на 1кг веса животного. Определялось фракции липидов и фосфолипиды, разделённых путём тонкослойной хроматографии, концентрация общего белка рефрактометрически, белковые фракции сыворотки крови, липопротеиды методом электрофореза на бумаге и в полиакриламидном геле . Исследования производились в динамике после последней иммунизации сосудисто-тканевым гомоантигеном, а в дальнейшем на 15е,30е,45е,60е,75е,90е сутки в динамике развития функциональных сдвигов.

Результаты опытов обработаны методом математической вариационной статистики.

Результаты и их обсуждение. В отчете иммунизации сосудисто-тканевым гомоантигеном в содержании липидов крови возникали отчетливые сдвиги, выявлявшие определенные закономерности.

Отмечается увеличение фосфолипидов и НЕЖК после гомоантигенной стимуляции /P<0,01/.

Концентрация свободного холестерина и триглицеридов , начиная с периода гомоантигенной стимуляции и в течение всего периода исследовании характеризуются постепенным нарастанием их количества, достигая своего максимума в концу исследования /P<0,001/.

Со стороны эфиров холестерина проявляются незначительные колебания их количества в период гомоантигенной стимуляции, на 15и 30е сутки после последнего введения антигена.

Начиная с 45ой сутки исследования концентрация эфиров холестерина постепенно нарастает достигая своего максимума на 90е сутки.

Общие липиды характеризуются постепенном нарастанием в течение всего периода исследования /P<0,001/.

Нарушение липидного обмена и колебания отдельных его тестов в начальные периоды сенсибилизации можно рассматривать как одно из проявлений общей реакции организма, возникающей в процессе развития болезни , или защитный механизм сосудистой стенки в ответна антигенное воздействие, возможно, вызывающего некоторое усиление внутрисосудистого липолиза и увеличение количества гепарина. Увеличение концентрации липидов во второй половине экспериментального аутоиммунного процесса, возможно, происходит из-за понижения активности энзимной сосудистой стенки в результате развития в них дегенеративных процессов.

Проведенные исследования показали, что уровень общего белка сыворотки крови начиная после последнего введения гомоантигена и в течении всего периода исследования имеет тенденцию к увеличению его количества, достигая своего максимума на 90е сутки /P<0,001.

Это увеличения общего количества белка возможно обусловлено не истинным увеличением протеинов крови, а в определенной степени гиперлипемией (3), в результате нарушения образование комплекса холестерина с белками в сторону его усилия. Это дает основание рассматривать изменении синтеза белка как один из компонентов компенсаторной реакции организма 3

обеспечивающий в определенный отрезок времени нормализацию нарушившихся обменных процессов при развитии аутоиммунного атеросклеротического процесса (6), Возможно, что одним из проявлении изменения биосинтеза белка гомоантигенной сенсибилизации, является появление определенных антигенных изменений в ткани сосудов, которые в свою очередь могут приводить к появлению иммунологических реакции, возникающих в ходе развития атеросклеротического процесса (7).

Следует также учитывать, что усиление синтеза общего количества белка, вероятно тесно связано увеличением содержания отдельных фракции глобулинов (β,α) в следствии усиленного их синтеза(9). Со стороны белковых фракций выявлено незначительное уменьшение альбуминов α1,α2 глобулиновой фракции, удерживающиеся до конца.

Постепенное увеличение в течение всего периода исследования β,α глобулиновой фракции (P<0,001). Относительное или абсолютное уменьшение альбуминов и α1,α2 фракции глобулинов, вероятно обусловлено снижение скорости их синтеза печени(6) при сенсибилизации ангиоантигена. Кроме того уменьшения количества альбуминов,возможно, происходит из-за ускоренного их распада – гиперкатабалическая гипопротеинемия.

Увеличения содержания β,α фракции глобулинов на фоне гипоальбумении в ранние стадии гомоантигенной сенсибилизации можно оценить как компенсаторное ускорение их синтеза вызванное на начальное снижение онкотического давления.

Дальнейшее увеличение содержания β и α глобулинов тесно связано с увеличением синтеза противососудистых антител, либо с усиленным следующие изменения со стороны липопротеидов сыворотки крови.

После гомоантигенной стимуляции отмечается незначительное увеличение α и уменьшение β фракции, которые вновь возвращаются к фоновому уровню на15е сутки исследования после последнего введения антигена. Начиная с 45го дня исследования концентрации β фракции липопротеидов постепенно увеличивается, а α фракции уменьшается, достигая к концу исследования своих максимумов /P<0,001/.

Изменения липопротеидов разделенных на полиакриламидном геле характеризуются также незначительным нарастанием α фракции продолжающиеся по 60е сутки исследования /P<0,02/.

Начиная с 75го дня исследования концентрация (активность) α фракции начинает уменьшаться, с постепенным нарастанием β фракции, которое достигает своего максимума на 90е сутки исследования/P<0,001/.

Тенденцию к снижению содержания β липопротеидов в первые дни сенсибилизации сосудисто-тканевым гомоантигеном можно объяснить резким повышением концентрации гепарина в крови, активизирующий липопротеиновую липазу, переводящие крупные молекулы липопротеидов в более мелкодисперсные.

В основе стойкого повышения содержания β-липопротеидов крови в поздние этапы экспериментального аутоиммунного атеросклеротического процесса лежат многие факторы, в том числе нарушения процесса биосинтеза и трансформации липопротеидных комплексов, постоянно происходящего в организме(9), в результате торможения распада β-липопротеидов из-за замедления их кругооборота , понижение активности липопротеиновой липазы , что может быть обусловлена как дефицитом гепарина, являющегося «ко» фактором этого фермента , так и наличием его ингибиторов.

Высшее указанное свидетельствует о том , что липопротеиновый спектр крови повышается в следствии тех же причин, которые вызывают гиперхолестеринемию и гипертриглециридемию , поскольку большая часть этих компонентов входит в состав β – липопротеидов .

Таким образом , проведенные исследования свидетельствуют , что повышенный по сравнению с нормой уровня свободного холестерина , триглицеридов, общего белка сыворотки крови , сдвига в белковых фракциях и β липопротеидов , прежде всего об ускоренном эндогенном их синтеза при аутоиммунном атеросклеротическом процессе.

ВЫВОДЫ

• 1.    Аутоиммунное повреждение сосудистой стенки способствует нарушению метаболизма липидов

• 2.    Увеличение количество общего белка и сдвиги белковых фракции(β,α)является косвенным подтверждением образованием и наличия противососудистых антител играющих важную роль в повреждении сосудистой стенки .

• 3.    Отражением нарастающего отложения циркулирующего иммунного комплекса в сосудистом стенки может быть параллелизм в увеличение концентрации общего белка и β – липопротеидов.