Биохимические изменения в крови молочных коров при активизации воспроизводительной функции гамавитом и гипофизином

Гамавит - комплексный физиологически сбалансированный водный раствор, содержащий плаценту денатурированную эмульгированную, нуклеонат натрия, набор аминокислот, витаминов, солей. Гипофизин Ла Вейкс - содержит карбетоцин (1-дезамино-1-монокарбо-2-(О-метил)-тирозин-окситоцин) в количестве 0,07 мг, в качестве синтетического действующего начала действие аналогично окситоцину, но более продолжительно и разносторонне. Биохимические исследования крови проводили по общепринятым методикам [10]. Определяли в динамике содержание следующих показателей: общий белок; альбумины; фракции глобулинов; креатинин; билирубин (общий); холестерин; триглицериды. Было подобрано пять групп коров сразу после отела (рис.).

Первой группе животных (n=25) внутримышечно вводили биокорректор гамавит в дозе 10 мл/гол/сут однократно начиная со 2-х суток после родов, в сочетании с пептидным синтетическим препаратом гипофизином внутримышечно в дозе 5,0 мл/гол однократно. Второй группе коров (n=25) гамавит и гипофизин вводили в аналогичных дозах, начиная с 21-х суток после родов. Третьей группе коров (n=25) проводили аналогичное введение препаратов на 45-е сутки после родов. Четвертой группе животных (n=25) - препараты применяли в тех же дозах, но на 60-е сутки после родов. Пятая группа коров (n=25) - контроль (интактные животные).

У пяти коров в каждой группе для проведения биохимических исследований осуществляли взятие крови из яремной вены четыре раза: первый раз - до начала введения препаратов; второй, третий и четвертый разы - согласно схеме исследований в течение исследуемого периода времени (90 суток). Учет эффективности стимуляции воспроизводительной функции у коров всех групп (n=25) осуществляли по показателям оплодотворяемости, индекса осеменения, количества полноценных половых циклов наличия заболеваний репродуктивных органов.

роды 0 2

90 сут

2-я группа

Гамавит + гипофизин

кровь

кровь

кровь

кровь

роды 0

90 сут

3-я группа

Гамавит + гипофизин

кровь

кровь

кровь

кровь

роды 0

90 сут

4-я группа

80 90сут

роды 0

5-я группа

кровь

кровь

кровь

кровь

роды 0 2

90сут

Схема исследований

Полученный цифровой материал обработан статистически с использованием ПК и пакета прикладных программ Microsoft office excel. Разницу считали достоверной: при * – р<0,05; ** – р<0,01; *** – р<0,001 – по сравнению с предыдущим значением показателя внутри каждой из групп животных.

Результаты исследований. Как известно, одной из основных функций белков является участие их в окислительно-восстановительных процессах, особенно при становлении и активизации воспроизводительной функции у самок животных.

Полученные результаты изменения белковых показателей в крови коров 1-й группы (табл.1) после применения биокорректоров гамавита и гипофизина (введение препаратов на 2-е сут после родов) показали, что содержание общего белка достоверно повышается: к 21-м суткам на 12,1; 45-м суткам – на 24,0 % и к 90-м суткам остается без изменений. В изменениях показателей белковых фракций к 90-м суткам исследований отмечена тенденция снижения по отношению к первоначальным значениям уровня альбуминов на 32,1 % и повышения γ-глобулиновой фракции на 53,2 %.

Во 2-й группе коров (введение препаратов на 21-е сут) также отмечена тенденция повышения уровня общего белка к 45-м суткам – на 15,4 % с последующим неизменным состоянием его на 60-е сутки и достоверным повышением к 90-м суткам на 19,1 % (82,06±1,91 г/л, р<0,05) от первоначального значения.

Белковые показатели крови коров

Таблица 1

Группа (n=5)	Показатели
	Общий белок, г/л	Альбумины, %	Глобулины, %
			α 1	β	γ
1-е взятие крови
1	75,52±2,59	48,22±5,52	9,16±0.99	11,84± 1,36	30,98±6,5
2	68,88± 3,41	60,12± 2,70	14,82± 2,64	10,84±0,75	14,24±1,6
3	72,84±2,22	52,28±4,18	7,16±0,89	14,86±1,58	25,70±4,73
4	69,02±1,93	64,48±2,26	9,16±1,11	4,88±0,86	21,48±1,81
5	68,78±1,64	56,5±2,24	9,10±0,59	11,28±1,48	23,12±1,79
2-е взятие крови
1	85,12±1,37*	41,46±3,45	8,54±0,60	11,68±0,65	38,32±3,4
2	79,52± 3,33	50,70±314	13,0 ±2,73	6,36 ±1,48*	32,74±2,7***
3	81,58± 2,16	44,08±3,83	7,80±1,55	13,18±1,53	34,94±4,24
4	73,86±2,78	50,02±4,26	9,02±0,72	13,62±1,80	27,34±3,45
5	76,68±3,80	42,64±3,04**	9,76±3,05	12,64±1,82	34,96±3,7*
3-е взятие крови
1	93,68±1,67**	52,40±11,88	8,20± 0,82	11,90± 1,80	41,48±4,6
2	73,54± 2,50	52,84 ±364	8,94 ±1,22	13,26± 1,2**	24,96±4,2
3	83,88±2,27**	41,10±2,67	10,88±0,82	15,32±1,57	32,70±3,52
4	78,64±2,58	49,56±5,01	8,78±0,98	17,28±1,78	27,34±3,45
5	80,78±2,85	44,68±3,85	10,34±0,85	13,52±1,59	31,06±3,69
4-е взятие крови
1	92,06±2,99	32,78±4,97	7,80±1,99	12,08 ±0,73	47,34±6,3
2	82,06±1,91*	49,24± 312	11,04 ±1,02	10,0± 2,26	29,92±6,3
3	82,42±2,60	44,20±3,24	9,12±0,97	13,68±0,69	33,0±3,22
4	78,20±2,12	46,16±4,79	11,0±0,98	13,26±1,35	27,34±3,45
5	86,24±4,60	42,12±6,72	10,40±2,02	9,42±1,06	38,06±9,50

Снижение количества альбуминов к концу исследований составило 18,1%. Изменения α- и γ-глобулиновых фракций у животных 2-й группы за период исследований были незначительными. Отмечено повышение к 60-м суткам исследований на 22,7 % по отношению к первоначальному значению количества β-глобулинов, которое составило 13,26± 1,2 %, р<0,01.

В 3-й группе коров (введение препаратов на 45-е сут) установлена тенденция повышения содержания общего белка к 45-м суткам исследований (на 12,2%) по отношению к первоначальному значению и достоверное увеличениек 60-м суткам до 83,88±2,27 г/л (на 15,2%, р<0,01). Среди белковых фракций к 90-м суткам отмечена незначительная тенденция снижения от первоначальных значений альбуминов - на 15,5 %, в-глобулинов - 7,6 и повышения а-глобулинов - на 28,4 и Y-глобулинов - на 28,4 %.

У коров 4-й группы (введение препаратов на 60-е сут) количество общего белка также имело тенденцию незначительного повышения (на 13,3%) к 90-м суткам исследований. Содержание альбуминов к концу исследований имело тенденцию снижения на 28,4 %. Среди глобулиновых фракций была установлена тенденция повышения в-глобулинов к 60-м суткам исследований (довведения препаратов) в 2,7 раза. Количество а- и Y-глобулинов увеличилось к 90-м суткам соответственно на 20,0 и 38,2 %.

У животных 5-й группы (контроль) изменения белковых показателей крови также характеризовались тенденциями повышения к 90-м суткам уровня общего белка (на 25,5%), а-глобулинов (на 14,2%), у-глобулинов (в 1,6 раза) и снижением количества в-глобулинов (на 16%). Содержание альбуминов достоверно снижалось (на 24,6%) к 45-м суткам исследований и составило 42,64±3,04 %, р<0,01. В последующем к 90-м суткам исследований их уровень практически не изменился.

Полученные данные динамики белковых показателей в сыворотке крови коров всех исследуемых групп показали, что в течение исследуемого периода времени после родов (сервис-период), который составляет 90 суток, отмечено повышение уровня общего белка, но у животных 1, 2, 3-й групп эти изменения были статистически достоверными после введения гамавита и гипофизина. Данные изменения свидетельствуют о стимулирующей обмен белков функции полипептидной природы гамавита и регуляторного влияния гипофизина на нейро-эндокринные взаимосвязи в организме животных в послеродовом периоде. Отмеченная общая тенденция для всех групп животных снижения количества альбуминов в крови к 90-м суткам, свидетельствующая о снижении интоксикации организма, активизации обменных процессов и повышении инволюции репродуктивных органов, была в наибольшей степени выражена у коров 1-й группы, которая составила 32,1%. Среди изменений в показателях глобулиновых фракций следует отметить достоверное повышение уровня Y-глобулинов у животных 2-й и 5-й (контроль) групп. Отмеченные изменения характеризуют наличие послеродовых морфофункциональных нарушений в органах, вызывающих реакцию со стороны организма факторов неспецифического иммунного ответа. У животных 2-й группы установлено достоверное повышение количества в-глобулинов в сыворотке крови к 60-м суткам исследований, которое очевидно связано с активизацией гормоно-синтезирующей функции яичников и коры надпочечников, стимулирующих через систему внутриклеточных образований выработку белков.

В сыворотке крови животных имеются различные азотсодержащие небелковые вещества, которые выполняют важные функции по поддержанию гомеостаза организма и свидетельствуют об имеющихся нарушениях детоксикационных свойств печени и органов иммунной системы.

У коров 1-й группы (табл. 2) к 90-м суткам исследований отмечено повышение содержания в сыворотке крови: креатинина - на 32,9 %, р<0,01; холестерина - на 54,5 % ; триглицеридов - на 33,3 %; фосфолипидов - на 4,9 %, р<0,05 от первоначального значения (на 2-е сут). При этом отмечено достоверное повышение содержания (в 3 раза) уровня билирубина к 21-м суткам после применения препаратов, который в дальнейшем снизился до исходного состояния. Такое же кратковременное достоверное повышение с 21-х по 45-е сутки (в 2 раза) было установлено и по количеству холестерина в периферической крови.

Динамика азотсодержащих и липидных веществ в крови

Таблица 2

Группа (n=5)	Показатели
	Креатинин, мкмоль/л	Билирубин, мкмоль/л	Холестерин, ммоль/л	Триглицериды, ммоль/л	Фосфолипиды, ммоль/л
1	2	3	4	5	6
1-е взятие крови
1	119,4± 4,9	3,69± 0,9	2,2 ±0,3	0,09±0,01	1,43±0,08
2	239,7 ±2,2	11,3 ±2,3	2,2 ±0,1	0,09 ±0,01	1,61±0,05
3	134,6± 13,6	6,0 ±0,7	2,3± 0,07	0,086 ±0,01	1,60±0,06
4	136,6 ±16,5	13,2 ±3,8	2,3± 0,1	0,16 ±0,02	1,41±0,05
5	116,9±6,9	8,7 ±1,9	1,9 ±0,1	0,09±0,01	1,48±0,05

Окончание табл. 2

1	2	3                1	4               1	5 1	6
2-е взятие крови
1	86,7 ±19,3	9,73± 1,53*	3,2 ±0,2*	0,12±0,01	1,75±0,06
2	170,7± 20,7	7,0 ±1,4	3,5± 0,2***	0,15±0,01*	1,43±0,06
3	100,8± 2,9*	6,5± 0,3	4,1 ±0,22***	0,12± 0,01	1,59±0,05
4	127,9± 9,1	6.6± 0,7	3,3±0,2*	0,15±0,01	1,49±0,04
5	121,7±10,8	4,9 ±0,8	3,0± 0,3*	0,12 ±0,03	1,50±0,06
3-е взятие крови
1	108,4±4,3	6,47±1,82	4,5± 0,4*	0,13±0,02	1,60±0,05
2	157,6± 7,2***	5,3 ±1,0	3,5 ±0,3	0,12± 0,02	1,61±0,03
3	150,7±8,8 ***	4,3 ±0,3**	3,8 ±0,29	0,11± 0,01	1,64±0,06
4	137,4 ±6,1	6,7 ±1,4	5,5± 0,5**	0,16 ±0,03	1,50±0,06
5	133,4±1,0	5,6 ±0,8	4,6± 0,5	0,15 ±0,02	1,51±0,04
4-е взятие крови
1	158,7±11,3**	3,65± 0,55	3,4 ±0,3	0,12± 0,01	1,50±0,04*
2	97,2 ±11,5**	4,0 ±0,5	5,0 ±0,4*	0,21±0,03*	1,80±0,06*
3	155,4± 25,5	6,6 ±0,7*	5,0 ±0,3*	0,15± 0,02	1,62±0,05
4	176,3±12,6	4,9±0,5	4,7 ±0,3	0,17±0,02	1,51±0,05
5	140,0±28,0	6,1 ±1,0	4,0 ±0,7	0,18 ±0,01	1,47±0,06

Во 2-й группе животных было установлено, что концентрация креатинина в крови к концу исследований характеризовалась достоверным снижением его уровня в крови в 2,5 раза. Такая же динамика повышения к 90-м суткам установлена и в содержании холестерина, где отмечено достоверное увеличение его концентрации к концу исследований в 2,2 раза.

Уровень триглицеридов имел тенденцию постепенного повышения к 90-м суткам на 42,7 %. а количество билирубина, наоборот, постепенно снижалось к этому времени в 2,8 раза. Концентрация фосфолипидов к 90-м суткам достоверно повысилась от первоначального уровня на 11,8 % и составила 1,80±0,06 ммоль/л, р<0,05.

В 3-й группе коров динамика содержания изучаемых показателей к 90-м суткам характеризовалась достоверным повышением (на 12,4%) по сравнению с первоначальным уровнем и также достоверным увеличением количества билирубина на 10,0 % (р<0,05), холестерина – в 2,1 раза (р<0,05) и триглицеридов – в 2,3 раза (р<0,05). Содержание фосфолипидов за период исследований не менялось.

У коров 4-й группы общая картина изменений биохимических показателей была аналогичной в предыдущих группах. Установлена тенденция повышения к концу исследований количества креатинина на 29,0 %, отмечено достоверное увеличение холестерина в 2,1 раза, а уровень триглицеридов и фосфолипидов – без заметных изменений. Содержание билирубина к 90-м суткам, наоборот, снизилось по сравнению с исходным состоянием в 2,6 раза.

В 5-й (контроль) группе животных содержание креатинина в крови в отличие от предыдущих групп не имело достоверных изменений к 90-м суткам. Отмечена тенденция снижения к концу исследований концентрации билирубина на 29,9 %, достоверное повышение к 45-м суткам холестерина в 2,1 раза, а также тенденция увеличения уровня триглицеридов в 2 раза. Количество фосфолипидов – без изменений.

Полученные результаты изменений в содержании азотсодержащих и липидных компонентов в сыворотке крови коров исследуемых групп показали, что к 45-м суткам после родов происходят изменения в протекании процессов метаболизма, которые характеризуются изменением уровня содержания креатинина, холестерина, триглицеридов в 1, 2, 4-й группах независимо от введения испытуемых препаратов. Введение гамавита и гипофизина способствовало достоверному повышению уровня холестерина в крови (1–4-е группы), триглицеридов и фосфолипидов (3-я группа), а также снижению количества креатинина (2-я группа) против повышения этого показателя в 5-й (контроль) группе.

Заключение. Картина изменения уровня глобулиновых фракций в крови коров исследуемых групп в целом была одинаковой, но в 5-й контрольной группе отмечено достоверное повышение в 1,5 раза γ-глобулиновой фракции на 45-е сутки после родов. До конца исследований этот уровень практически не изменился. У животных 1, 3 и 4-й групп повышение этой фракции было недостоверным. Во 2-й группе коров увеличение γ-глобулиновой фракции после введения биокорректоров к 45-м суткам было в 2,3 раза, что характеризует усиление активизации нейроэндокринных факторов неспецифической защиты организма в послеродовом периоде по снижению степени токсикоза, ускорению инволюции матки и быстрому купированию воспалительных процессов из-за возможной активизации условно-патогенной микрофлоры в репродуктив- ных органах. Уровень β-глобулинов в крови коров большинства исследуемых групп имел недостоверные изменения, и только у коров 2-й группы изменения этой фракции имели место после применения биокорректоров. У животных этой группы отмечено снижение β-глобулинов после введения препаратов к 45-м суткам на 41,4 %, а затем повышение их количества к 60-м суткам в 2 раза, что, по-видимому, является следствием повышения уровня стероидных гормонов в крови коров. В связи с тем, что фракция β-глобулинов состоит из двух белков трансферина и гемопексина, при повышении содержания трансферина, осуществляющего транспорт трехвалентного железа, будут активизироваться процессы снижения воспалений в репродуктивных органах. Достоверное снижение за период исследований уровня альбуминов в крови коров 5-й группы до нижней границы физиологической нормы характеризует нарастание процессов снижения его синтеза в печени. Это состояние очевидно связано с протекающими процессами послеродовой интоксикации организма и воспалительными процессами в репродуктивных органах. Снижение содержания альбуминов связано прежде всего с морфо-функциональной недостаточностью печени в послеродовом периоде. Учитывая то, что альбумин, являясь простым низкомолекулярным белком, уменьшаясь в количестве, теряет свойства связывания воды в тканях и соответственно снижает коллоидно-осмотическое давление, транспорт ионов магния, кальция, стероидных гормонов, у таких коров будут задерживаться процессы индукции половой цикличности и оплодотворяемости. Исходя из этого, применение биокорректоров гамавита и гипофизина обуславливает в том числе и некоторое гепатопротекторное действие.

Полученные данные свидетельствуют, что в течение максимально возможного сервис-периода для молочных коров, который составляет 90 суток [7], совместное применение гамавита и гипофизина на 21-е сутки (2-я группа) способствовало оплодотворяемости 84,0 % животных при минимальном индексе осеменения (1,4) и количестве послеродовых заболеваний (16,0%). Эффективность профилактики скрытого мастита составила 60,0 против 36,0 % в контроле.

Таким образом, для стимуляции воспроизводительной функции и профилактики послеродовых заболеваний коров рекомендуется применение синтетических пептидных препаратов гамавита внутримышечно в дозе 10 мл/гол/cут в сочетании с гипофизином Ла Вейкс в дозе 5,0 мл/гол однократно на 21-е сутки после родов.