Циклофиллин а как потенциальный маркер рака желудка

НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск1,

ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет Росздрава», г. Томск2

Актуальность. Циклофилин А является представителем семейства иммунофилинов и играет важную роль в формировании компетентного фолдинга белков, хемотаксисе и сигнальной трансдукции. Некоторое время назад предметом для изучения стала взаимосвязь между экспрессией циклофилина А и опухолевым патогенезом. Уровень синтеза циклофилина А значительно повышается при немелкоклеточном раке легкого, наряду с фактором, ингибирующим миграцию макрофагов (MIF). Увеличение экспрессии циклофилина А отмечается также в клеточных линиях опухоли поджелудочной железы в эксперименте. В карциноме эндометрия показано 27-кратное увеличение экспрессии циклофилина А по отношению к нормальной ткани.

Вестерн-блот анализ. Растворимую фракцию белков разделяли в градиентном полиакриламидном геле (10–22 %), переносили на поливинилдифторидную мембрану (PVDF, Millipore) и инкубировали с коммерческими антителами к циклофилину А (Santa Cruz Biotechnology, Inc).

ПЦР-анализ в режиме реального времени. Образцы опухолевой и нормальной ткани от 18 больных использованы для выделения РНК с целью оценки генной экспрессии циклофиллина А (mРНК) методом обратной транскрипции и ПЦР в реальном времени (ОТ-ПЦР).

Иммуногистохимическое исследование (ИГХ). Парафиновые блоки опухолевого материала от 35 пациентов послужили для подтверждения белковой экспрессии in situ и оценки влияния клинико-патологических особенностей злокачественного процесса на экспрессию белка в опухолевых клетках.

Работа выполнена при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (08-04-13705-офи_ц) и Международного научно-технического центра (# 3909).