Цитогенетическое обследование жителей Республики Северная Осетия-Алания с нарушением репродуктивной функции

Чопикашвили Лидия Васильевна, доктор биологических наук, профессор, заведующая кафедрой зоологии

Цель работы: проведение цитогенетического обследования жителей Северной Осетии с нарушением репродуктивной функции до и после приема антимутагенов.

Методика исследования. Цитогенетическое исследование проведено у 38 человек. Из них 22 человека (6 мужчин, 14 женщин) – жители Северной Осетии с нарушением репродуктивной функции (средний возраст 36 лет). В эту группу вошли жители с нарушениями сперматогенеза (6 человек: 5 человек с олигоспермией, 1 человек с азооспермией), а также с привычной потерей беременности – 10 человек, с первичным бесплодием – 6 человек. 5 человек из числа лиц с нарушением репродукции обследованы дважды до и после приема антимутагенов (средний возраст 31 год). В качестве возможных антимутагенов использовали афобазол и биомассу проростков пшеницы. Афобазол – селективный анксиолитик (2-[2-(морфолино)этилтио]-5-это-ксибензимидазола гидрохлорид). Выбор лекарственного средства «афобазол» и его суточная доза основывались на результатах исследований, свидетельствующих в пользу наличия у афоба-зола антимутагенной и антитератогенной активности [4-5]. В работе использован афобазол производства ООО «Фармстандарт» в суточной дозе 30 мг в три приема перорально на протяжении 14 дней. Биомасса проростков пшеницы применялась по 1 столовой ложке 1 раз в день. Здоровые жители без нарушений репродуктивной функции и не связанные с вредным производством (16 человек: 12 женщин и 4 мужчин) вошли в группу сравнения, средний возраст в которой был равен 29 годам.

Цитогенетическое исследование проводили на препаратах метафазных хромосом лимфоцитов периферической крови, культивируемых в условиях in vitro, в соответствии со стандартной процедурой [2]. Цельную кровь (1 мл) культивировали макрометодом в культуральной смеси, состоящей из среды RPMI 1640 («Sigma») – 7,5 мл, сыворотки эмбриональной («BioClot») – 1,5 мл в пробирках объемом 15 мл. Для стимуляции деления клеток использовали фитогемагглютинин («ПанЭко») в концентрации 0,01 мг. Фиксацию клеточного материала осуществляли на 48-м часу культивирования. На каждого больного анализировали от 100 до 300 метафазных пластинок. Ахроматические пробелы учитывали отдельно. Всего проанализировано 6070 метафазных пластинок. Статистическую обра- ботку фактического материала проводили по φ-критерию.

Результаты исследования. В табл. 1 представлены результаты цитогенетического обследования 16 здоровых доноров без нарушений репродуктивной функции. При анализе 2180 метафазных пластинок было выявлено 55 поврежденных метафаз (2,5±0,3%). Выявленный результат по количественным и качественным показателям не отличается от данных других авторов, установленным при цитогенетическом обследовании здоровых доноров [7-9].

Таблица 1. Частота хромосомных аберраций у жителей Северной Осетии с нарушением репродуктивной функции

Примечание: * - р<0,001 по сравнению со здоровыми жителями без нарушений репродуктивной функции и не связанными с вредным производством; ** - р<0,001 по сравнению с лицами с нарушением репродуктивной функции, которым антимутагенная профилактика не проводилась

Анализ частоты хромосомных аберраций жителей РСО-А с нарушением репродуктивной системы выявил достоверные отличия по сравнению с группой контроля (табл. 1). При анализе спектра хромосомных аберраций выявлено изменение частот отдельных типов аберраций, следует отметить, что доля аберраций хромосомного типа зафиксированных у доноров с нарушением репродукции составила 52,5%, тогда как в группе здоровых жителей была равна 36%. Пределы колебаний аберрантных метафаз в тестируемых группах варьировали в широких пределах, максимальная частота хромосомных аберраций выявлена в группе жителей Северной Осетии с нарушением репродуктивной функции (табл. 2). В результате проведенного цитогенетического анализа было выявлено значимое превышение числа клеток содержащих более 1 хромосомной аберрации в группе жителей РСО-А с нарушением репродуктивной системы по сравнению с группой здоровых доноров, мультиаберрантных клеток не обнаружено (табл. 2). На основании экспериментальных данных полученных у доноров с нарушением репродуктивной системы после 14-дневного приема антимутагенов было отмечено снижение частоты хромосомных аберраций (табл.1, 2). При анализе частот отдельных типов аберраций установлено, что после проведения антимутагенной терапии частота аберраций хроматидного типа существенно не изменилась, но значительно снизилось количество метафаз содержащих аберрации хромосомного типа до 35,7%, что достоверно не отличается от результатов здоровых доноров (табл. 1). После 14-дневного приема антимутагенов у доноров наблюдалось снижение метафаз содержащих более 1 аберрации, что также свидетельствует о снижении мутагенной нагрузки у обследованных.

Таблица 2. Цитогенетическое обследование жителей РСО-А с нарушением репродуктивной функции

Примечание: * - р<0,001 по сравнению со здоровыми жителями без нарушений репродуктивной функции

Выводы: результаты проведенного цито-   4.

генетического исследования в группе жителей с нарушением репродуктивной функции свидетельствуют об увеличение уровней хромосомного мутирования. Полученные эксперименталь-   _5.

ные данные показывают необходимость антиму-тагенной профилактики у категории граждан входящих в эту группу и перспективы использования с этой целью препаратов с антимутаген-ными свойствами – афобазола и проростков ^6. пшеницы.

Авторы благодарят заведующую поликлиническим отделением Республиканского Центра Планирова-   ₇

ния Семьи и Репродукции Золоеву Л.О. за помощь при    ^.

сборе материала.