Цитокиновый профиль мочи при различных этиопатогенетических вариантах хронического пиелонефрита у детей

Цель: изучить показатели цитокинового профиля мочи у детей с различными этиопатогенетическими вариантами хронического пиелонефрита.

Методы. Обследовано 132 ребенка (92 девочки и 40 мальчиков) в возрасте в возрасте от 1 года до 17 лет с ХП, из них 18 больных первичным ХП (1-я группа) и 114 вторичным ХП (2-я группа). Во вторую группу вошло 46 больных с обструктивным вариантом ХП, 33 ребенка с дисметаболическим и 35 детей с обструктивно-дисметаболическим. У всех пациентов изучено количественное содержание провоспа-лительных интерлейкинов ИЛ-1b, ИЛ-6 и ИЛ-8 мочи. Исследование у детей проводились в различные фазы и сроки воспалительного процесса.

При микробиологическом исследовании у 46 больных ХП выявлялась E.coli, у 22-Stafilococcus, у 18 — Proteus, у 13 — Ps.aeruginosa, у 11 — микробные ассоциации, а у 22 детей регистрировался недиагностический титр бактериурии.

Контрольную группу составили 30 детей, не имеющих заболевания почек.

Концентрацию ИЛ-1b, ИЛ-6 и ИЛ-8 в моче у детей определяли методом ИФА (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск). Полученные результаты обрабатывались при помощи прикладных программ Statistika 6.0. В процессе исследования анализировалось среднее значение признака (М), медиана выборки (Ме), 25-й и 75-й процентили. Статистическую значимость результатов оценивали при помощи t-критерия Стьюдента, критерием достоверности считали р<0,05. Корреляционный анализ проводили по методу Пирсона.

Результаты. Самые высокие уровни ЦК мочи были зарегестрированы на фоне вторичного обструктивного ХП: ИЛ-1b повышался в 1,8 раза (р=0,04), ИЛ-6 в 2 раза (р=0,03), ИЛ-8 в 33 раза (р=0,001). При обструктивно-дисметаболическом ХП ИЛ-1b увеличивался в 1,3 раза (р=0,03), ИЛ-8 в 26 раз (р=0,0001), а средние значения ИЛ-6 повышались недостоверно (р=0,3). Дисметаболический вариант ХП сопровождался увеличением уровня ИЛ-8 в 6,5 раз (р=0,001) при неизменяющихся ИЛ-1b и ИЛ-6 (р>0,05).

Цитокиновый профиль мочи при первичном ХП не выявил изменений ИЛ1b и ИЛ-6 (р>0,05), а концентрация хемокина ИЛ-8 была выше нормы в 7,6 раза (р=0,002).

Адрес: 410076, г. Саратов, ул. 4 проезд им. Чернышевского Н. Г., 3а, кв. 61.

Тел.: 8-919-82-68-464, (8452) 22-89-61.

У больных вторичным обструктивным ХП была выявлена прямая корреляционная связь между концентрацией ИЛ-8 в моче и нарушением функции канальцев (по данным нефросцинтиграфии (НСГ)).

Рис. 1. Уровень интерлейкинов при различных вариантах ХП

У больных в активную фазу первичного и вторичного ХП достоверно повышались концентрации всех провоспалительных ЦК (р<0,05); максимально ИЛ-8 (р=0,0002) (увеличивался в 8 раз при первичном и в 33 раза при вторичном ХП).

У всех пациентов в фазу клинико-лабораторной ремиссии нормализовались уровни ИЛ-1b (р=0,3) и ИЛ-6 (р=0,1), концентрации ИЛ-8 у больных в 1-й группе превышали контроль (р=0,003) в 4,5 раза, а во 2-й группе — в 7,2 раза (р=0,001).

Рис. 2. Средний уровень интерлейкинов мочи у больных ХП в различные фазы воспалительного процесса

С увеличением длительности болезни при различных вариантах ХП обнаруживалось значимое повышение концентрации ИЛ-6 (р=0,02) и, особенно, ИЛ-8 (р=0,0001) в моче. Средние значения ИЛ-1b изменялись недостоверно у всех больных (р=0,2). Мочевые концентрации ИЛ-6 нарастали по мере увеличения длительности болезни только при вторичном ХП (р=0,01), не изменяясь при первичном ХП (р=0,3). Повышенная экскреция с мочой ИЛ-8 отмечалась во все периоды ХП у всех пациентов и имела тенденцию к повышению по мере увеличения длительности болезни (р=0,002).

У пациентов 2-й группы через 10 лет от начала заболевания уровни ИЛ-8 мочи прямо коррелировали с изменениями по данным НСГ.

Рис. 3. Цитокины мочи у больных ХП с различной длительностью болезни

В структуре возбудителей вторичного ХП выявлено 23 различных микроорганизма, а первичного ХП — только E.coli. Концентрации провоспалитель-ных ЦК мочи изменялись в зависимости от этиологического фактора заболевания и достигали своего максимума у больных 2-й группы при mixt-инфекции. При выявлении микробных ассоциаций достоверно увеличивались все медиаторы воспаления (р<0,05), а ИЛ-8 в 31 раз превышал контроль (р=0,0001).

При обнаружении Ps.aeruginosa в моче ИЛ-1b изменялся недостоверно (р=0,2), ИЛ-6 повышался в 3 раза (р=0,004), ИЛ-8 в 27 раз (р=0,0002).

У всех больных при выявлении E.coli мочевые концентрации провоспалительных ИЛ-1b (р=0,5) и ИЛ-6 (р=0,3) не превышали контроль, а уровень ИЛ-8 повышался в 25 раз при вторичном ХП (р=0,004) и в 6,8 раза при первичном ХП (р=0,01).

Обнаружение стафилококков в моче больных ХП повлекло увеличение уровня ИЛ-8 в 17 раз (р=0,003) на фоне нормальных значений ИЛ-1b и ИЛ-6.

Концентрации провоспалительных ЦК мочи при выявлении Proteus изменялись следующим образом: ИЛ-6 увеличивался в 1,7 раза (р=0,03) и ИЛ-8 в 19 раз (р=0,001), а ИЛ-1b был в пределах нормы (р=0,4).

У пациентов с недиагностическим титром бакте-риурии значения ИЛ-1b и ИЛ-6 не отличались от контрольных (р>0,05), а значения ИЛ-8 увеличивались в 8 раз (р=0,02).

Пациенты со вторичным ХП с mixt-, синегнойной и эшерихиозной инфекцией имели максимальную зависимость концентраций ИЛ-8 от функциональных нарушений канальцев (по данным НСГ).

Рис. 4. Цитокины мочи у больных ХП в зависимости от этиологического фактора

Обсуждение. Исследование ЦК мочи больных с различными патогенетическими вариантами ХП показало максимальное увеличение уровня всех медиаторов воспаления, а особенно ИЛ-8, на фоне вторичного обструктивного ХП. Повышение внутрипочечного давления, вероятно, способствует инфильтрации интерстиция почки иммунокомпетентными клетками, которые в избытке продуцируют ЦК [1, 2]. Увеличение концентрации ИЛ-8 является компенсаторным ответом на повреждение почечной ткани при обструкции мочевого тракта [2, 3]. Одним из пусковых моментов развития обструктивных уропатий является активация ангиотензина-II, что приводит к экспрессии в почке ЦК [4, 5]. Длительная гиперпродукция ЦК ведет к развитию профибротических эффектов [6], что доказано в нашем исследовании наличием прямой корреляционной связи между концентрацией ИЛ-8 в моче и нарушением функций канальцевого аппарата (по данным НСГ).

Выявлена зависимость уровней ЦК от стадии заболевания: концентрации всех интерлейкинов достоверно увеличивались в активную фазу первичного и вторичного ХП. В уротелии человека экспрессия ЦК возрастает через несколько часов после инфицирования уропатогенными штаммами, что соответствует аккумуляции нейтрофилов в моче на ранних стадиях инфекции [7]. При санации мочи реакция обрывается, а персистенция возбудителя в мочевой системе поддерживает процесс [7, 8], что в нашем исследовании было подтверждено нормализацией уровней ИЛ-1b и ИЛ-6 и значительным уменьшением ИЛ-8 в фазу ремиссии.

С увеличением длительности болезни усугубляются профибротические эффекты в почке, что доказано тенденцией к росту ИЛ-8 при всех вариантах ХП и его прямой корреляционной связью со склеротическими изменениями по НСГ [6, 9].

Изучение биоагрессивного потенциала возбудителей ХП показало максимальную агрессию mixt-, синегнойной и эшерихиозной инфекции, что подтверждалось высокими уровнями всех ЦК, а в особенности ИЛ-8. Высокие значения ИЛ-8 при выявлении данных возбудителей соответствовали выраженным изменениям по НСГ [10].

Следовательно, обнаруженные изменения продукции и экскреции ИЛ-8 можно считать маркером склеротических изменений в почках у детей, страдающих ХП.

Заключение. Повышение продукции ИЛ-8 в моче больных ХП является показателем активности процессов фиброгенеза. Высокие концентрации ИЛ-8 в моче больных с первичным ХП свидетельствуют о латентном хроническом воспалении и угрозе не-фросклероза. Высокие уровни ИЛ-8 в фазу ремиссии свидетельствуют о наличии скрытого воспаления в почке, не выявляемого с помощью традиционных методов диагностики. Нарастание уровня ИЛ-8 с увеличением продолжительности ХП доказывает прогрессирование нефросклероза. Наиболее агрессивной средой для развития хронического воспаления в почке является mixt-, синегнойная и эшерихиозная инфекции.