Цитоморфологические изменения содержимого пародонтальных карманов больных хроническим генерализованным пародонтитом при переломах нижней челюсти под влиянием двучелюстных назубных шин

Из методов лечения переломов нижней челюсти наиболее широко применяется иммобилизация нижней челюсти с помощью назубных шин и межчелюстной резиновой тяги. При наложении двучелюстных шин проведение профессиональной и индивидуальной гигиены полости рта затруднено. При длительной иммобилизации нижней челюсти страдает функция слюнных желез, что также ухудшает гигиеническое состояние полости рта [2, 4]. Микроорганизмы зубного налета являются прямой причиной воспалительных процессов в пародонте. В норме механизмы резистентности противодействуют микроорганизмам, но как только они в каком-либо месте преодолевают эту защиту, развивается инфекционный процесс с повреждением тканей [5, 7, 8]. Длительное присутствие бронзо-алюминиевых лигатур в области шеек зубов также приводит к развитию воспалительного процесса в тканях пародонта, возникновению пародонтита — для получения одной из экспериментальных моделей пародонтита предусматривается наложение на шейку зуба лигатуры [3, 6]. При заболеваниях пародонта наложение назубных шин приводит к обострению пародонтита, что утяжеляет течение заболевания [1].

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Изучение цитокинового профиля и цитомор-фологических изменений тканей пародонта у больных пародонтитом при переломах нижней челюсти под влиянием двучелюстных назубных шин.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Нами обследовано 65 больных с хроническим генерализованным пародонтитом (ХГП) при переломах нижней челюсти, которым проводилась иммобилизация отломков путем наложения двучелюстных назубных шин. Обследовались мужчины в возрасте 28—47 лет без сопутствующей патологии. Сравнение проводилось с группой здоровых лиц, не имеющих заболеваний пародонта (20 человек).

Цитологическое исследование десневой жидкости и содержимого пародонтальных карманов осуществляли путем взятия цитологического материала с помощью мишени из десневой борозды или пародонтального кармана, переноса на стерильное обезжиренное стекло и высушивания. Для окрашивания мазков применяли набор Leukodif 200 (PLIVA-Lachema a. s. Чеш. Рес.). В цитограммах под микроскопом с объективом PZO 10/0,24 и окуляром PZO 10х9 изучались популяции эпителиальных и соединительно-тканных клеток. В нескольких полях зрения подсчитывали, из расчета на 100 клеток, относительное процентное содержание эпителиальных и соединительнотканных клеток. В одном поле зрения цитограммы подсчитывали процентное количество нейтрофильных лейкоцитов (палочкоядерных и сегментоядерных гранулоцитов), моноцитов, лимфоцитов, а также их форм с признаками лизиса. В популяции эпителиальных клеток определяли процентное соотношение эпителиоцитов I—V стадий дифференцировки, количество агрегированных эпителиоцитов в пластах, относительное содержание эпителиоцитов с признаками дистрофии, относительное содержание эпителиоцитов с признаками деструкции.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

У больных ХГП при переломах нижней челюсти до лечения отмечалось изменение состава содержимого пародонтальных карманов. При изучении клеточного состава основную массу клеточных элементов (43,67 ± 1,27) % составляли полиморфноядерные лейкоциты. Их количество в 1,5 раза превышало ( р < 0,05) данный показатель здоровых людей (табл. 1, рис. 1, 2).

ТАБЛИЦА 1

Цитоморфологические особенности содержимого пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти ( M ± m , %)

Группа	Нейтрофильные лейко-			Моноциты		Лимфоциты
	всего	из них с признаками лизиса	в состоянии фагоцитоза	всего	из них с признаками лизиса	всего	из них с признаками лизиса
Здоровые	28,42	5,83 ±	1,41 ±	4,24 ±	1,61 ±	3,67 ±	1,42 ±
( n = 20)	± 0,73	0,05	0,02	0,11	0,09	0,06	0,03
Больные	43,67	6,17 ±	1,28 ±	5,97 ±	2,34 ±	5,46 ±	1,96 ±
( n = 65)	± 1,27	0,07	0,04	0,18	0,21	0,14	0,07
р	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05

Примечание: р — по сравнению с группой здоровых.

Преобладали нейтрофилы с вакуолизирова-ной цитоплазмой, токсической зернистостью и дегенеративными изменениями ядер (рис. 3) в виде их значительной фрагментации. Часть клеток была полностью разрушена, остатки ядерной субстанции были представлены клеточным детритом. В препаратах встречались моноциты, лимфоциты, их число увеличено (р < 0,05) относительно груп- пы практически здоровых людей (табл. 1, рис. 4). Во всех цитограммах встречалась микробная флора (кокки, мицелий грибка, нити типа лептотрикса, палочки, реже — простейшие), которая располагалась, как правило, внеклеточно (рис. 5, 6).

У больных хроническим генерализованным пародонтитом при переломах нижней челюсти отмечено снижение ( р < 0,05) количества нейтрофилов в состоянии фагоцитоза относительно группы здоровых людей, явления фагоцитоза чаще носили характер незавершенного. При этом обнаружено, что пародонтит легкой степени сопровождался снижением фагоцитарной функции нейтрофильных гранулоцитов в зоне поражения, а при среднетяжелой степени пародонтита эта функция полиморфноядерных лейкоцитов повышена. Это подтверждают имеющиеся литературные данные (Sigusch В., et al., 2001). Снижение количества нейтрофилов в состоянии фагоцитоза отмечено и при тяжелой степени пародонтита (табл. 2).

Рис. 1. Световая микроскопия, увеличение х1000, окраска гематоксилин-эозином. Дегенеративно измененные нейтрофильные гранулоциты в большом количестве в поле зрения в содержимом пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти

Рис. 2. Световая микроскопия, увеличение х1000, окраска гематоксилин-эозином. Дегенеративно измененные нейтрофилы, эпителиоциты в содержимом пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти

Рис. 3. Световая микроскопия, увеличение х1000, окраска гематоксилин-эозином. Нейтрофильные гранулоциты с дегенеративными изменениями ядер в содержимом пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти

Рис. 6. Световая микроскопия, увеличение х1000, окраска гематоксилин-эозином. Обильная коккобациллярная флора, нити типа лептотрикса в содержимом пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти

ТАБЛИЦА 2

Рис. 4. Световая микроскопия, увеличение х1000, окраска гематоксилин-эозином. Нейтрофилы, встречаются моноциты с признаками лизиса в содержимом пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти

Цитоморфологические особенности содержимого пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти в зависимости от тяжести воспалительно-деструктивного процесса в тканях пародонта ( M ± m , %)

Рис. 5. Световая микроскопия, увеличение х1000, окраска гематоксилин-эозином. Нити типа лептотрикс, коккобациллярная флора, нейтрофил и эпителиоцит в содержимом пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти

Группа	Нейтрофильные лейко-			Моноциты		Лимфоциты
	всего	из них с признаками лизиса	в состоянии фагоцитоза	всего	из них с признаками лизиса	всего	из них с признаками лизиса
здоровые ( n = 20)	28,42 ± 0,73	5,83 ± 0,05	1,41 ± 0,02	4,24 ± 0,11	1,61 ± 0,09	3,67 ± 0,06	1,42 ± 0,03
Пародонтит легкой степени ( n = 33)	40,11 ± 1,25	6,12 ± 0,12	1,29 ± 0,03	5,61 ± 0,23	2,08 ± 0,07	4,91 ± 0,31	1,84 ± 0,06
р 1	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05
Пародонтит средней степени ( n = 20)	42,17 ± 2,07	6,17 ± 0,16	1,46 ± 0,01	6,02 ± 0,79	2,25 ± 0,01	5,45 ± 0,28	1,93 ± 0,08
р 1	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05
р 2	>0,05	>0,05	<0,05	>0,05	>0,05	>0,05	>0,05
Пародонтит тяжелой степени ( n = 12)	44,26 ± 1,04	6,92 ± 0,39	1,21 ± 0,03	6,11 ± 0,46	2,58 ± 0,14	5,51 ± 0,21	1,98 ± 0,04
р 1	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05
р 2	<0,05	>0,05	>0,05	>0,05	<0,05	>0,05	>0,05
р 3	>0,05	>0,05	<0,05	>0,05	>0,05	>0,05	>0,05

Примечание: р ₁ — по сравнению с группой здоровых;

р ₂ — по сравнению с группой больных пародонтитом легкой степени;

р ₃ — по сравнению с группой больных пародонтитом средней степени.

Количество нейтрофильных лейкоцитов и мононуклеаров существенно не отличалось у больных с разной степенью тяжести воспалительного процесса в тканях пародонта.

Количество эпителиальных клеток и соотношение эпителиоцитов разных стадий дифференцировки в цитограммах обследованных нами больных ХГП при переломах нижней челюсти до начала лечения отличалось ( р < 0,05) от группы здоровых людей (табл. 3).

ТАБЛИЦА 3

Эпителиоциты содержимого пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти ( M ± m , %)

Группа	Всего эпи-телиоци-тов	Агрегированные клетки в пластах	Эпителиоциты с признаками дистрофии	Эпителиоциты с признаками деструкции
Здоровые ( n = 20)	19,17 ± 1,06	4,17 ± 0,02	6,83 ± 0,41	4,83 ± 0,09
Больные ( n = 65)	30,41 ± 2,47	7,33 ± 0,11	10,8 ± 0,82	8,21 ± 0,31
p	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05

Примечание: р — по сравнению с группой здоровых.

Патологический сдвиг эпителиальной популяции клеток содержимого пародонтальных карманов характеризовался увеличением ( р < 0,05) в мазках эпителиоцитов, агрегированных в пластах (рис. 7), а также клеток с признаками дистрофии, деструкции (рис. 8, 9).

Рис. 7. Световая микроскопия, увеличение х1000, окраска гематоксилин-эозином. Эпителиоциты в пластах и коккобациллярная флора в содержимом пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти

В цитограммах нарастало ( р < 0,05) количество эпителиальных клеток с признаками дистрофии, характеризующихся базофильной цитоплазмой. В содержимом пародонтальных карманов появлялись клетки с явлениями дегенерации, которая характеризуется вакуолизацией цитоплазмы и ядер, увеличивалось количество разрушенных клеток. В популяции эпителиальных клеток количество клеток с деструкцией достигало (8,21 ± 0,31) %, что выше ( р < 0,05) значений группы здоровых людей (4,83 ± 0,09), табл. 3. Базофилия цитоплазмы эпителиоцитов была выражена в меньшей степени.

Рис. 8. Световая микроскопия, увеличение х 1000, окраска гематоксилин-эозином. Эпителиоцит с признаками деструкции, нейтрофилы с признаками лизиса в содержимом пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти

Рис. 9. Световая микроскопия, увеличение х 1000, окраска гематоксилин-эозином. Эпителиоцит с признаками дистрофии и деструкции, нити типа лептотрикса, коккобациллярная флора в содержимом пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти

Изменения в исследованной популяции эпителиоцитов десневой жидкости связаны с воспалительным процессом в тканях пародонта, ослаблением процесса ороговения эпителиоцитов и увеличением митотической активности эпителия десны.

Таким образом, препараты содержимого па-родонтальных карманов больных ХГП в сочетании с переломами нижней челюсти при поступлении на стационарное лечение имели воспалительнодегенеративный тип цитограммы. То есть в результате перелома развивается опосредованное воспаление на уровне зубодесневого соединения — запускается провоспалительный каскад, приводящий к изменению функциональной активности клеточных структур. Такая активация местного иммунного ответа способствует развитию деструктивных процессов на уровне зубодесневого соединения и альвеолярной кости.

После завершения ортопедического лечения переломов нижней челюсти отмечено нарастание количества нейтрофильных лейкоцитов в содержимом пародонтальных карманов, основная масса которых была разрушена. Присутствие в полости рта у больных с переломами нижней челюсти в сочетании с ХГП назубных шин сопровождалось увеличением ( р < 0,05) числа нейтрофилов в паро-донтальных карманах относительно данного показателя до лечения (табл. 4; рис. 10).

ТАБЛИЦА 4

Цитоморфологические особенности содержимого пародонтальных карманов больных хроническим генерализованным пародонтитом при переломах нижней челюсти в динамике традиционного лечения ( M ± m , %)

Группа	Нейтрофильные лейкоциты			Моноциты		Лимфоциты
	всего	из них с признаками лизиса	в состоянии фагоцитоза	всего	из них с при-знаками лизиса	всего	из них с при-знаками лизиса
Здоровые ( n = 20)	28,42 ± 0,73	5,83 ± 0,05	1,41 ± 0,02	4,24 ± 0,11	1,61 ± 0,09	3,67 ± 0,03	1,42 ± 0,03
больные до лечения ( n = 65)	43,67 ± 1,27	6,17 ± 0,07	1,28 ± 0,04	5,97 ± 0,18	2,34 ± 0,21	5,46 ± 0,05	1,96 ± 0,07
р 1	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05
Больные после лечения ( n = 65)	56,43 ± 3,89	8,67 ± 0,72	0,47 ± 0,01	4,57 ± 0,09	2,98 ± 0,07	4,52 ± 0,08	2,12 ± 0,02
р 1	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05
р 2	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05

Примечание: р ₁ — по сравнению с группой здоровых;

р ₂ — по сравнению с группой больных до лечения.

Рис. 10. Световая микроскопия, увеличение х1000, окраска гематоксилин-эозином. Нейтрофилы и лимфоциты в стадии лизиса, кокковая флора в содержимом пародонтальных карманов больных ХГП в сочетании с переломом нижней челюсти при снятии шин

Рост числа нейтрофилов в цитограммах в динамике отражает развитие воспалительно-ин- фильтративных реакций в тканях пародонта. В единичных клетках обнаружено внутриклеточное расположение микробов, но явления фагоцитоза носили характер незавершенного.

Недостаточная эффективность фагоцитоза по отношению к бактериям зубной бляшки вызывает метаболическую гиперактивацию нейтрофилов и, как следствие, дальнейшее разрушение соединительной ткани связочного аппарата зубов и резорбцию костной ткани альвеолярных отростков.

В содержимом пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти, в динамике традиционного лечения, отмечалось снижение ( р < 0,05) количества моноцитов до (4,57 ± 0,09) % клеток в поле зрения, количество моноцитов с признаками лизиса нарастало ( р < 0,05) до (2,98 ± 0,07) %. Количество лимфоцитов в цитограммах снижалось ( р < 0,05) и достигало (4,52 ± 0,08) % клеток в поле зрения, увеличивалось количество лимфоцитов с признаками лизиса ( р < 0,05), табл. 4.

Вследствие накопления свободных радикалов на уровне пародонтальных карманов усиливались явления дегенерации и дистрофии эпителиальной выстилки с дальнейшим разрушением тканей пародонта (табл. 5).

ТАБЛИЦА 5

Эпителиоциты содержимого пародонтальных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти в динамике традиционного лечения ( M ± m , %)

Группа	Всего эпи-телиоци-тов	Агрегированные клетки в пластах	Эпителиоциты с признаками дистрофии	Эпителиоциты с признаками деструкции
Здоровые ( n = 20)	19,17 ± 1,06	4,17 ± 0,02	6,83 ± 0,41	4,83 ± 0,09
До лечения ( n = 65)	30,40 ± 2,47	7,33 ± 0,11	10,8 ± 0,82	8,21 ± 0,31
р 1	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05
После лечения ( n = 65)	43,63 ± 5,07	12,76 ± 0,81	17,68 ± 1,06	14,35 ± 1,04
р 1	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05
р 2	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05

Примечание: р ₁ — по сравнению с группой здоровых;

р ₂ — по сравнению с группой больных до лечения.

Отмечалось появление голоядерных клеток. Их наличие в цитограммах в больших количествах — признак превалирования в очагах поражения пародонта воспалительно-деструктивных изменений, выраженного альтеративного воспаления. Эпителий отторгался пластами — отмечено увеличение (р < 0,05) агрегированных в пластах эпителиоцитов (12,76 ± 0,81) % по сравнению с данным показателем до лечения (7,33 ± 0,38) %. Увеличилось число эпителиоцитов с признаками деструкции (р < 0,05). Содержимое пародонталь- ных карманов больных ХГП при переломах нижней челюсти после традиционного лечения напоминало воспалительный экссудат. При этом нарушались репаративные процессы в тканях пародонта, реакция организма сдвигалась в сторону воспалительно-деструктивных процессов. Образовавшийся неполноценный эпителиальный слой поддерживал обострение хронического воспалительного процесса.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, изменения состава содержимого пародонтальных карманов у больных ХГП при переломах нижней челюсти, возникающие под действием двучелюстных назубных шин, являются отражением перехода хронического воспалительного процесса в стадию обострения с преобладанием дегенеративных изменений в области пародонтальных карманов. Препараты содержимого пародонтальных карманов больных с пародонтитом на момент снятия шин также имели воспалительно-дегенеративный тип цитограммы, при этом отмечалось значительное прогрессирование воспалительно-деструктивных явлений по сравнению с данными до начала лечения.