Цитостатический эффект комплекса липопротеинов очень низкой плотности с кортизолом на рост и развитие опухолевых клеток в культуре

НИИ биохимии СО РАМН, г. Новосибирск

Актуальность. Анализ литературных данных свидетельствует о том, что интерес исследователей к участию липопротеинов (ЛП) и их белкового компонента апоЛП в регуляции митотической активности клеток, экспрессии генов, механизмов иммунного ответа существует давно. Показано, что липопротеины высокой плотности проявляют пролиферативный эффект, обусловленный действием биологически активного комплекса тетрогидрокортизол-апоА-I, который образуется в макрофагах. Выяснен молекулярный механизм его действия, обусловленный усилением экспрессии многих генов в соматических клетках (гепатоцитах). Показано также, что апоЕ и апоЕ-содержащие липопротеины очень низкой плотности (ЛПОНП) пода- вляют биосинтез ДНК и белка, как в нормальных, так и в опухолевых гепатоцитах. Интерес к изучению регуляторной роли липопротеинов и их белкового компонента в механизмах противоопухолевой защиты с каждым годом возрастает. Известно, что глюкокортикоиды относятся к индукторам апоптоза. В данном исследовании предполагалось усилить антипролиферативный эффект ЛПОНП добавлением глюкокортикоидного гормона кортизола.

Цель исследования. Изучение влияния липопротеинов очень низкой плотности при их совместном добавлении с кортизолом на процессы пролиферации в культуре опухолевых клеток.

Материал и методы. В работе использовались мыши линии A/Sn с асцитной HA-1 гепатомой (Институт цитологии и генетики СО РАН). Клетки перитонеального экссудата получали после вскрытия брюшной полости для последующего культивирования. Эксперимент проводился на 4 группах: чистый контроль (физиологический раствор), ЛПОНП, кортизол и ЛПОНП+кортизол. Липопротеины очень низкой плотности добавляли в объеме 0,2мл (концентрация белка 00 мкг/мл) на 1мл питательной среды. В контрольную группу добавляли 0,2 мл физиологического раствора.

Концентрация кортизола в 1 мл инкубационной среды была 10-6М. Биосинтез ДНК измеряли по включению 3Н-тимидина. Время инкубации составляло 1,5 ч.

Результаты. Выявлено, что добавление ЛПОНП совместно с кортизолом оказывает цитостатическое действие на рост и развитие HA-1 гепатомы, определяемое по включению ³Н-тимидина. Показано, что в группах ЛПОНП+кортизол происходит снижение скорости биосинтеза ДНК на 52 % по сравнению с контролем. В группах с инкубацией в присутствии одного гормона снижение составило 25 – 30 %. Аналогичный эффект наблюдался в группах с добавлением ЛПОНП без кортизола.

Выводы. Несмотря на то, что антипроли-феративный эффект наблюдался во всех трех опытных группах, наиболее выраженным он был в группе ЛПОНП+кортизол. Вероятно, это связано с образованием активной транспортной формы липопротеин-гормон. Возможно, данный комплекс проявляет свое действие по иному биохимическому пути, через рецептор-опосредованный механизм проникновения гормона в клетку, который, в свою очередь, является более эффективным.