Действие микроэлементов на рост Laricifomes officinalis (Vill.) Kotl. et Pouzar

Культуру хранили при 40С на сусло-агаре, с содержанием сахара 40 по Баллингу, выращивали в данных условиях в течение 7–10 суток при комнатной температуре и далее помещали в холодильник. Пересевали на свежеприготовленную среду один раз в год.

В опытах использовали агаризованное пивное сусло, содержащее 4% сахара, 2% агара, в которое вносили различные количества микроэлементов из расчета 0,5; 0,1; 0,05; 0,01 г на 100 мл среды. Затем среду разливалали в чашки Петри (по 20 мл в каждую) и иннокулировали мицелием лиственничной губки. В качестве иннокулята использовали десятисуточную культуру L.officinalis, выращенную на сусло-агаре. На чашки Петри помещали по одному стандартному блоку посевного материала ( L.officinalis ) диаметром 5 мм, вырезанным из зоны роста колонии штамма на сусло-агаре. Чашки Петри помещали в термостат, где поддерживали температуру 26–28⁰С. Повторность опытов трехкратная.

На 4-, 7-, 11- и 14-е сутки измеряли диаметр колонии (в мм) в двух направлениях, высоту колонии (в мм), а также плотность колонии по трехбалльной системе (1 – редкая, 2 – средняя, 3 – плотная). В дальнейшем по полученным данным вычисляли ростовой коэффициент (РК) по формуле

РК= dhg/t, где d – диаметр колонии, мм;

• h – высота колонии, мм;

• g – плотность колонии, балл;

• t – возраст колонии, сутки.

В качестве источников микроэлементов использовали следующие соли: CoCl 2 (источник кобальта), CuSO 4 (источник меди), ZnSO 4 (источник цинка), Na 2 B 4 O 7 (источник бора), (NH 4 ) 6 Mo 7 O 24 (источник молибдена), KJ (источник йода), MnCl 2 (источник марганца).

Для описания колоний использовали критерии Сталперса [4,15].

Результаты и их обсуждение. В результате проведенных исследований было установлено, что воздействие микроэлементов на мицелий лиственничной губки зависит от количества их в питательной среде. Так, во всех вариантах опытов, независимо от вида микроэлемента, на средах с концентрацией 0,5г/100 мл ростовые процессы полностью отсутствовали.

Как видно из данных, представленных на рисунках 1–2, при содержании в питательной среде даже 0,01 г/100 мл солей кобальта или марганца рост гриба резко замедлялся и задерживался во времени. При концентрации их, равной 0,05 г/100 мл, ростовой коэффициент значительно снижался и достигался максимум 35 единиц, тогда как в контроле наблюдали максимальное значение ростового коэффициента, равное 69. На средах, где содержание солей кобальта, марганца или меди равно 0,5 г/100 мл, рост грибницы отсутствовал совсем.

Сутки

• □ 0.5 г CoCl2/100мл

• □ 0.1 г CoCl2/100мл

• □ 0.05 г CoCl2/100мл

• □ 0.01 г CoCl2/100мл

• □    контроль

Рис. 1. Рост мицелия лиственничной губки на питательной среде с различным количеством кобальта

• □ 0,5 г MnCl2 /100мл

• □ 0,1 г MnCl2 /100мл

• □ 0,05 г MnCl2 /100мл

• □ 0,01 г MnCl2 /100мл

• □ контроль

Рис. 2. Рост мицелия лиственничной губки на питательной среде с различным количеством марганца

Мицелий, выросший на средах с добавлением солей кобальта и марганца, имеет длинные тонкие гифы, которые прижаты и переплетаются между собой. Воздушный мицелий невысокий. Колония относится к типу № 7 (шерстистая) по Дж. Сталперсу [15], что значительно отличалось от контроля, который воздушный высокий, отдельные мицелиальные гифы переплетались во всех направлениях. Колония ватная № 6 по Сталперсу [15] (рис. 3,а).

Рис. 3. Рост мицелия лиственничной губки на питательной среде без добавок (контроль) (а), при добавлении меди (б), молибдена (в), йода (г)

Грибница лиственничной губки своеобразно вела себя на питательных средах, в которые вносилось различное количество меди. Диаграмма, представленная на рисунке 4, показывает, что содержание меди в среде в концентрациях 0,1– 0,01 г влияло на рост мицелия сравнительно слабо. Однако выросший мицелий резко отличался от контрольного – он был менее пышным и не столь мощным по плотности.

Рис. 4. Рост мицелия лиственничной губки на питательной среде с различным количеством меди

Колония, выросшая на среде с добавлением разных концентраций меди, относится к типу №10 по Дж. Сталперсу [15]. Колония кожистая, пленчатая, образована тонким низким сцепленным мицелием (см. рис. 3, б).

Из рисунков 5 и 6 видно, что значительное торможение роста мицелия наблюдается при наличии в среде 0,01 г/100 мл и особенно 0,1 г/100 мл соли цинка и молибдена. На средах, содержащих 0,5 г/100мл соли цинка, рост мицелия не наблюдается. Однако концентрация соли цинка, равная 0,05 г/100 мл, давала лишь небольшой ингибирующий эффект и на 14 сутки культивирования рост мицелия практически достигал контроля (ростовой коэффициент равен 59 и 61 соответственно).

Сутки

• □ 0,5 г ZnSO4/100мл

• □ 0,1 г ZnSO4/100мл

• □ 0,05 г ZnSO4/100мл

• □ 0.01 г ZnSO4/100мл

• □    контроль

  

  Рис. 6. Рост мицелия лиственничной губки на питательной среде с различным количеством молибдена

  
  

Мицелий, выросший на средах с добавлением солей цинка и молибдена, имел длинные тонкие гифы, которые прижаты и переплетаются между собой. Воздушный мицелий невысокий. Колония относится к типу №7 (шерстистая) по Дж. Сталперсу [15] (см. рис. 3,в).

Очень незначительный рост отмечен так же на средах, в которые были внесены соли бора и йода (рис. 7, 8) в количестве 0,01 и 0,05 г/100 мл. Ростовой коэффициент в данных вариантах опыта достигал максимальных значений.

Сутки

• □ 0,5 г Na2B4O7/100мл

• □ 0,1 г Na2B4O7/100мл

• □ 0,05 г Na2B4O7/100мл

• □ 0,01 г Na2B4O7/100мл

• □    контроль

Рис. 7. Рост мицелия лиственничной губки на питательной среде с различным количеством бора

Сутки

• □ 0,5 г KJ /100мл

• □ 0,1 г KJ /100мл

• □ 0,05 г KJ /100мл

• □ 0,01 г KJ /100мл

• □ контроль

Рис. 8. Рост мицелия лиственничной губки на питательной среде с различным количеством йода

Воздушный мицелий, выросший на средах с добавлением солей йода и бора, ватообразный, свалявшийся, отсутствуют поднимающиеся гифы. Колония №11 (войлочная) (см. рис. 3,г).

Наши опыты показывают, что исследованные микроэлементы в определенных концентрациях оказывают довольно сильное угнетающее действие на рост мицелия лиственничной губки. Установлено, что наиболее сильно действуют йод и бор. В питательных средах, в которых содержание солей указанных элементов составляло 0,01 и 0,05 г, ростовые процессы резко замедлялись, а при концентрации 0,1–0,5 г рост мицелия совсем отсутствовал. На средах с таким же количеством марганца и кобальта рост лиственничной губки угнетался несколько слабее. Значительно слабее рост мицелия подавлялся на средах с медью, цинком и молибденом. Полное подавление роста наблюдалось лишь при наличии в среде 0,5 г/100 мл этих элементов.

Таким образом, микроэлементы в определенных концентрациях оказывают сильное угнетающее действие на рост мицелия лиственничной губки. При этом наиболее активно такое влияние оказывают соли йода и бора. Добавление солей металлов ведет к выраженным изменениям морфологических свойств мицелия лиственничной губки. Он становится менее плотным, низким и разреженным.