Динамика ферментативной активности лимфоцитов крови под влиянием экстракорпорального фотохромомагнитного излучения

Актуальность. Использование аутобиосред организма (кровь, лимфа, ликвор) для инкубации с цитостатиками и последующей реин- фузией стало альтернативным направлением лекарственной терапии опухолей. Показано, что применение магнитных полей для обработки аутокрови повышает степень связывания цитостатика с альбумином и мембранами эритроцитов и позитивно влияет на функциональное состояние и состав иммунокомпетентных клеток. Дальнейшая разработка подходов к оптимизации состояния клеточных систем аутокрови как важнейшего компонента аутобиохимиотерапии указывает на высокую чувствительность ключевых ферментных систем лимфоцитов к световому излучению, которое может быть использовано в комплексе с магнитами.

Цель исследования. Изучение влияния комбинированного фотохромомагнитного и сверхнизкочастотного магнитного излучения на функциональную активность ферментов энергетического метаболизма лимфоцитов крови на различных этапах после проведения воздействия.

Материал и методы. Работа была выполнена на 30 белых беспородных крысах, у которых осуществлялся забор крови из наружной яремной вены в объеме 2 мл. Для воздействия на кровь использовали комбинированный микропроцессорный физиотерапевтический аппарат электро-магнито-светотерапии «Градиент-3» (НПФ «Пульс» при ВНИИ «Градиент» г. Ростов–на–Дону), обладающий возможностью сочетанного лечебного действия несколькими физическими факторами. Для обработки крови использовали одновременное формирование на рабочей поверхности индуктора аппарата «Градиент-3» светового потока (с длиной волны 670 нм (красный свет) в дозе 1-5 Дж/см²) и магнитного поля (с индукцией 10 мТл, частотой 7,8 Гц, экспозицией 3 мин). Флаконы с образцами крови устанавливали в емкости, не пропускающие свет окружающей среды, а воздействие начинали сразу после закрытия отверстия индуктором аппарата. После фотохромомагнитной обработки быстро изготавливали тонкие мазки крови и фиксировали в ацетон-трилоне, вслед за окрашиванием мазков нитротетразолиевым фиолетовым по Нарциссо-ву производили подсчет гранул формазана в 50 клетках, определяя активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и α-глицерофосфатдегидрогеназы (α-ГФДГ). Аналогичные исследования проводили спустя 40 мин и 24 ч после фотохромомагнитного воздействия.

Результаты. При рассмотрении в качестве основных характеристик поведения фермент- ных систем лимфоцитов в ответ на комбинированное воздействие красного света и магнитного поля таких параметров, как соотношение СДГ/α-ГФДГ, а также определение количества лимфоцитов с высоким содержанием депозитов - Jакт и крайне низким – Jo (опустошенные лимфоциты, «нуллеры»), оказалось, что динамика ферментативной активности имеет нелинейный характер. Сразу после воздействия коэффициент Ja/Jo для СДГ возрастает с уровня 1,38 у.е. до 2,08 у.е. Одновременно с повышением активности ключевого фермента энергодающего цикла Кребса возникал дефицит активности сопряжения с анаэробным процессом гликолиза- α-ГФДГ, о чем свидетельствовало снижение коэффициента Ja/Jo 0,94 у.е. до 0,66 у.е. Разница между показателями К Ja/Jo для СДГ и α-ГФДГ увеличилась в 3 раза. Через 40 мин после проведения фотохромомагнитного сеанса реакция ферментных систем стала менее выраженной для СДГ. Коэффициент соотношения Jакт/Jо снизился до 1,7 у.е., что указывает на гипоэр-гетический сдвиг, который можно объяснить изменением равновесия между транспортом и диффузией субстратов окисления, в том числе ионов кальция, калия, водорода в митохондрии, а главное ^- эндогенной янтарной кислоты. В то же время реципрокно наблюдалось увеличение активности α-ГФДГ до уровня 1,07 у.е., что обеспечивало активацию гликолиза. Исследования, проведенные через 24 ч от момента воздействия, убедительно свидетельствовали о продолжении развития темновой фазы фотохромомагнитного эффекта ферментативной активности лимфоцитов. Так, значения активности СДГ свидетельствовали о возрастании гетерогенности пула, с подавляющим числом лимфоцитов, заполненных гранулами формазана, что отразилось на увеличении коэффициента соотношения Ja/Jo до 2,9 у.е. Это отражало возрастание участка эндогенной янтарной кислоты как активного субстрата сукцинатдегидрогеназной системы и, по выражению М.Н. Кондрашовой (1978), «тягловой» силы анаэробной работы митохондрий. Вместе с возрастанием активности СДГ, превысившей в 1,7 раза уровень в предыдущей временной точке (40 мин) после воздействия, отмечалось поддержание активности α-ГФДГ, соответствующей 1,2 у.е., что незначительно (на 10%) опережает предыдущие данные. При этом разница между показателями К Ja/Jo СДГ ствует модификации крови. Эти воздействия и α-ГФДГ возросла в 2,4 раза.                    способны упредить нарушения энергетического

Выводы. Использование комбинированных метаболизма лимфоцитов.

методов квантовой и магнитотерапии способ-