Динамика изменения микрофлоры кишечника белых мышей в условиях эксперимента по алиментарно-токсической пароксизмальной миоглобинурии

Динамика изменения микрофлоры кишечника белых мышей в условиях эксперимента по алиментарно-токсической пароксизмальной миоглобинурии

Автор: Дансарунова О.С., Дугаржапова Е.Д., Ковалева Н.В., Зверева О.А., Цыдыпов В.Ц.

Журнал: Вестник Красноярского государственного аграрного университета @vestnik-kgau

Рубрика: Ветеринария

Статья в выпуске: 6, 2014 года.

Бесплатный доступ

В статье представлены результаты по изменению кишечной микрофлоры белых мышей в условиях эксперимента по алиментарно-токсической пароксизмальной миоглобинурии (АТПМ).

Микрофлора, дисбактериоз, лактобактерии, бифидобактерии, энтерококки, кишечная палочка

Короткий адрес: https://sciup.org/14083748

IDR: 14083748

Текст научной статьи Динамика изменения микрофлоры кишечника белых мышей в условиях эксперимента по алиментарно-токсической пароксизмальной миоглобинурии

Методы и результаты исследования. Для постановки опыта были отобраны белые мыши – самцы, массой не менее 20–25 г, из которых сформировали две группы по 5 животных в каждой – опытная и контрольная. Во время проведения эксперимента рацион опытных животных состоял из сырых внутренних органов брюшной полости рыбы-леща с подозрением на АТПМ – алиментарно-токсическую пароксизмальную миоглобинурию (оз.Котокельское). Каждой группе мышей ежедневно давали утром по 20 г, а вечером по 40 г внутренних органов брюшной полости. Контрольные мыши получали в таком же количестве сырые внутренние органы от здоровой рыбы. Перед кормлением рыбой был определен количественный и качественный состав кишечной микрофлоры белых мышей опытной и контрольной группы. Кроме того, на 2-, 5-, 7-е сутки экспериментов определили общее количество фекальной микрофлоры, содержание лактобактерий, бифидобактерий, энтерококков и эшерихий. Результаты экспериментов представлены в таблицах 1–4.

Количество микроорганизмов в перерасчете на 1 г фекалий (КОЕ/г) определяли высевом соответствующих десятикратных разведений суспензий кала на плотные питательные среды в чашках Петри и подсчетом выросших колоний бактерий по истечении времени инкубирования в термостате при температуре 37° 18–24 часа по формуле

M = N×10n+1, где M – число микробов в одном грамме кала;

N – число выросших на чашке колоний; n – степень разведения материала.

Таблица 1

Количественный и видовой состав микрофлоры кишечника белых мышей до кормления рыбой

Номер белой мыши

Общее микробное число КОЕ х г-1

Лактобактерии КОЕ х г-1

Бифидобактерии КОЕ х г-1

Энтерококки КОЕ х г-1

Эшерихии КОЕ х г-1

Контрольная группа

1

5,0 x 1010

2,8x 107

7,0 x 107

1,9 x 105

0,9 x 106

2

4,5x 1010

2,3 x 106

5,4 x 107

1,1 x 105

0,3 x 106

3

5,1x 1010

4,1x 106

4,0x 108

1,7x 104

1,3x 107

4

3,8x 1010

2,5x 107

3,8x 107

0,6x 105

0,6x 106

5

4,6x 1010

3,1x 107

4,3x 107

1,2 x 104

0,5 x 107

Сред. число

(4,6+0,22)х 1010

(2,9+0,36)х 107

(4,9+0,6)х 108

(1,3+0,2)х 105

(0,7+0,13)х 106

Опытная группа

6

5,3 x 1010

3,0x 108

6,10 x 108

1,8 x 104

1,6 x 106

7

4,7 x 1010

4,9 x 108

3,6 x 107

1,5 x 105

1,9 x 106

8

5,2 x 1010

2,5 x 106

1,9 x108

2,1 x 104

0,3 x 106

9

5,7 x 1010

3,1 x106

5,9 x 106

1,3 x 105

0,8 x 106

10

4,9 x 1010

4,6 x106

5,0x 108

2,0x 104

1,8x 107

Сред. число

(5,1 + 0,18)х 1010

(3,6 + 0,45)х 106

(4,5 + 0,77)х 108

(1,7 + 0,3)х 104

(1,2 + 0,31)х 106

Из таблицы 1 мы видим, что общее микробное число у контрольных мышей составляет (4,6 + 0,22) х 1010, в том числе полезной микрофлоры желудочно-кишечного тракта мышей: лактобактерии (2,9 + 0,36) х 107, бифидобактерии (4,9 + 0,6) х 108. Условно-патогенная микрофлора состоит из энтерококков (1,3 + 0,22)х105, кишечной палочки (0,7 + 0,13) х 106.

У опытной группы мышей общее микробное число составляет (5,1 + 0,18) х 1010.Полезная микрофлора желудочно-кишечного тракта мышей состоит из лактобактерий (3,6 + 0,45) х 106, бифидобактерий (4,5 + 0,77) х 108. Условно-патогенная микрофлора состоит из энтерококков (1,7 + 0,13) х 104, кишечной палочки (1,2 + 0,31)х106 .

Динамика концентрации микроорганизмов в кишечном содержимом белых мышей на 2-е сутки эксперимента

Таблица 2

Номер белой мыши

Общее микробное число КОЕ х г-1

Лактобактерии КОЕ х г-1

Бифидобактерии КОЕ х г-1

Энтерококки КОЕ х г-1

Эшерихии КОЕ х г-1

Контрольная группа

1

4,0 x 1010

2,9x 107

4,0 x 107

2,9 x 105

0,5 x 106

2

3,5x 1010

3,1 x 106

5,4 x 106

2,1 x 105

1,3 x 105

3

4,1x 1010

3,8x 106

3,0x 108

2,0x 104

5,3x 106

4

2,9x 1010

3,2x 106

3,7x 107

5,4x 104

1,7x 106

5

4,6x 1010

4,1x 106

5,0x 108

1,0 x 104

1,5 x 106

Сред. число

(3,8 + 0,29 ) х 1010

(3,4 + 0,22 ) х 107

(4,2 + 0,44 ) х 108

(2,6 + 0,75 ) х 105

(2,0 + 0,85 ) х 106

Опытная группа

6

0,3 x 1010

2,0x 106

6,1 x 107

1,5 x 106

2,6 x 106

7

0,7 x 1010

3,0 x 105

2,6 x 107

0,5 x 105

1,91 x 105

8

4,2 x 1010

2,3 x 106

1,90 x107

1,9 x 106

0,9 x 106

9

6,7 x 109

2,8 x106

0,9 x 106

3,7 x 105

1,0 x 106

10

4,0 x 1010

3,0 x106

4,8x 108

1,8x 106

1,7x 108

Сред. число

(3,1 + 1,21 ) х 1010

(2,6 + 0,20 ) х 106

(3,2 + 0,95 ) х 107

(1,8 + 0,52 ) х 106

(1,6 + 0,31 ) х 106

Из таблицы 2 определяем количественный и видовой состав белых мышей на 2-е сутки после заражения: у контрольной группы мышей общее микробное число составляет (3,8 + 0,29) х 1010, лактобактерий (3,4 + 0,22)х107, бифидобактерий(4,2 + 0,44)х108, энтерококков (2,6 + 0,75) х 105, эшерихий (2,6 + 0,75) х 105.

У опытной группы мышей общее микробное число составило (3,1 + 1,21) х 1010, отмечается снижение представителей полезной микрофлоры: лактобактерий (2,6 + 0,20) х 106, бифидобактерий (3,2 + 0,95) х 107, одновременно отметился рост энтерококков (1,8 + 0,52) х 106, число эшерихий и лактобактерий не изменилось (1,6 + 0,31 ) х 106 и (2,6 + 0,20) х 106 соответственно.

Динамика концентрации микроорганизмов в кишечном содержимом белых мышей на 5-е сутки эксперимента

Таблица 3

Номер белой мыши

Общее микробное число КОЕ х г-1

Лактобактерии КОЕ х г-1

Бифидобактерии КОЕ х г-1

Энтерококки КОЕ х г-1

Эшерихии КОЕ х г-1

Контрольная группа

1

8,0 x 109

4,3x 107

5,6 x 107

3,0 x 105

1,0 x 106

2

4,0x 109

2,5 x 107

6,2 x 107

5,4 x 105

0,9 x 107

3

5,1x 1010

5,8x 106

2,7x 108

6,2x 104

2,7x 106

4

7,0x 109

3,7x 107

5,1x 107

2,7x 105

1,6x 106

5

2,7x 1010

9,1x 107

4,5x 107

7,0 x 103

1,3 x 107

Сред. число

(5,3 + 0,98 ) х 109

(5,0 + 1,15 ) х 107

(4,8 + 0,60 ) х 107

(4,8 + 0,90 ) х 105

(1,5 + 0,31 ) х 106

Опытная группа

6

2,8 x 109

2,5x 106

5,0 x 106

1,6 x 104

0,8 x 108

7

2,7 x 1010

1,97 x 105

3,1 x 107

1,0 x 105

1,2 x 107

8

4,7 x 1010

2,4 x 106

2,0 x106

2,1 x 104

0,6 x 108

9

6,2 x 109

2,9 x106

3,4 x 106

3,3 x 104

1,8 x 107

10

4,45 x 109

3,8 x105

4,9x 107

1,9x 105

1,7x 107

Сред. число

(4,1 + 0,63 ) х 109

(2,7 + 0,31 ) х 106

(3,6 + 0,54 ) х 106

(1,9 + 0,38 ) х 106

(1,2 + 0,24 ) х 107

Из таблицы 3 мы видим, что на 5-е сутки эксперимента отмечается снижение общего количества фекальной микрофлоры; так, у контрольных мышей оно составило (5,3 + 0,98) х 109, у опытной группы мышей соответственно (4,1 + 0,63) х 109. У контрольной группы мышей также отмечается небольшое снижение бифидобактерий (4,8 + 0,60) х 107, число лактобактерий не изменилось (5,0 + 1,15) х 106. Количество представителей условно-патогенной микрофлоры не изменилось: энтерококки (4,8 + 0,90) х 105 , эшерихии (1,5 + 0,31) х 106.

У опытной группы мышей снизилось число бифидобактерий (3,6 + 0,54) х 106, одновременно увеличилось количество кишечной палочки (1,2 + 0,24) х 107. Количество лактобактерий, энтерококков не изменилось: (2,7 + 0,31) х 106, (1,4 + 0,55) х 107, (1,9 + 0,38) х 106соответственно.

Таблица 4

Динамика концентрации микроорганизмов в кишечном содержимом белых мышей на 7-е сутки эксперимента

Номер белой мыши

Общее микробное число КОЕ х г-1

Лактобактерии КОЕ х г-1

Бифидобактерии КОЕ х г-

Энтерококки КОЕ х г-1

Эшерихии КОЕ х г-1

1

2

3

4

56

Контрольная группа

1

6,0 x 1010

3,6x 106

4,9 x 107

3,9 x 105

0,75 x 106

2

3,7x 109

2,8 x 106

5,2 x 107

3,75 x 105

1,1 x 106

3

4,6x 109

2,0x 106

2,8x 108

4,1x 104

4,0x 107

4

4,9x 1010

3,4x 106

4,4x 107

4,05x 104

1,65x 106

5

3,6x 109

6,6x 105

4,7x 106

4,0 x 105

1,4 x 107

Сред. число

(4,5 + 0,40 ) х 109

(3,6 + 0,77 ) х 106

(4,4 + 0,53 ) х 107

(3,9 + 0,06 ) х 105

(1,7 + 0,58 ) х 107

Окончание табл. 4

1

2

3

4

5

6

Опытная группа

6

1,55 x 106

2,25x 105

5,5 x 103

1,55 x 106

1,7 x 107

7

1,7 x 106

2,4 x 104

2,85 x 103

0,75 x 106

1,5 x 107

8

4,45 x 109

2,3 x 104

1,95 x103

2,0 x 106

0,75 x 106

9

6,45 x106

2,85 x103

2,15 x 105

3,5 x 105

1,4 x 107

10

4,2 x 109

3,4 x104

4,8x 105

1,85x 105

1,0x 108

Сред. число

(3,6 + 0,93 ) х 106

(2,6 + 0,21 ) х 104

(3,4 + 0,7 ) х 103

(1,9 + 0,45 ) х 106

(1,2 + 0,17 ) х 107

Из таблицы 4 мы видим, что на 7-е сутки эксперимента у контрольной группы мышей отмечается небольшое снижение общего количества микробов (4,5 + 0,40) х 109, лактобактерий (3,6 + 0,77) х 106, бифидобактерий (4,4 + 0,53) х 107, число энтерококков не изменилось (3,9 + 0,06) х 105 , отмечается незначительнее увеличение кишечной палочки (1,7 + 0,58) х 107.

У опытной группы значительно снизилось общее микробное число (3,6 + 0,93) х 106, лактобактерий (2,6 + 0,21) х 104, бифидобактерий (3,4 + 0,7) х 103, энтерококков (1,9 + 0,45) х 106, эшерихий (1,2 + 0,17) х 107 .

Таким образом, полученные результаты динамики кишечной микрофлоры опытной группы мышей показали, что кормление сырыми внутренними органами брюшной полости рыб привело к значительному сдвигу в микробиоценозе кишечника в сторону увеличения численности условно-патогенных микроорганизмов и уменьшения числа полезной микрофлоры у мышей.

Выводы. Анализ полученных результатов показал, что кишечная микрофлора белых мышей подверглась изменениям, которые характеризуются увеличением в кишечном содержимом условно-патогенных бактерий. Наиболее выраженные изменения отмечаются на 7-е сутки наблюдения. Это свидетельствует, что введение в корм рыбы, подозрительной на АТПМ, сопровождается заметным уменьшением колонизационной резистентности кишечника, следствием чего явилось увеличение потенциально-патогенных микроорганизмов.

Статья научная
QR-код для установки приложения SciUp Наведите камеру и скачайте бесплатное приложение SciUp