Динамика свободнорадикальных процессов в ротовой жидкости больных с хроническим рецидивирующим афтозным стоматитом на первом этапе терапии

Неуклонно увеличивающееся влияние негативных факторов внешней среды приводит к депрессивному состоянию иммунной системы человека и соответственно к увеличению уровня хронических заболеваний, а неоправданное применение антибиотиков только осложняет положение с хроническими заболеваниями в человеческой популяции [1, 2].

Слизистая оболочка полости рта – это постоянно увлажнённая среда, создающая оптимальные условия для иммунокомпетентных клеток, биологически активных веществ и микроорганизмов [3, 4].

Заболевания слизистой полости рта являются острейшей проблемой в стоматологии, имеющей комплексную природу, опирающуюся на триаду – организм–микро-биом–среда. По оценкам Глобального исследования бремени болезней (2018), по меньшей мере 3,58 миллиарда людей в мире страдают от заболеваний полости рта [5].

Одной из самых часто встречающихся патологий является хронический рецидивирующий афтозный стоматит (ХРАС), который приводит к нарушению целостности эпителия, местным воспалениям и сильным болям. ХРАС характеризуется появлением специфических афт округлой формы с гиперемированным венчиком, покрытых серовато-желтым налётом, на фоне воспалённой слизистой оболочки [6–8]. Все вышеуказанные процессы приводят к нарушению окислительного гомеостаза ротовой жидкости и возникновению оксидативного стресса, дополнительно интенсифицирующего воспалительные процессы.

Цель и задачи

Целью нашего исследования явилось определение динамики свободнорадикальных процессов в ротовой жидкости пациентов с хроническим рецидивирующим афтозным стоматитом на фоне первого этапа терапии антисептиками с анальгетиком для определения оптимальной тактики лечения данного состояния.

Для реализации поставленной цели нам необходимо было решить следующие задачи: оценить функциональную активность свободнорадикальных процессов в ротовой жидкости пациентов с ХРАС на фоне применения антисептиков (хлоргексидин, октенидин, фурацилин, бензилдиме-тил-миристоиламино-пропиламмония хлорида моногидрат) и анастетика (стоматологический гель с лидокаином 2% и экстрактом цветков ромашки) в течение 7-ми суток.

Материалы и методы

В ходе исследования была изучена ротовая жидкость 120 человек с диагнозом ХРАС (73 женщины и 47 мужчин) в возрасте от 26 до 60 лет, разделённых на четыре группы поровну: 1 группа – контрольная, пациенты использовали для полоскания антисептик хлоргексидин; 2 группа – пациенты с терапией ХРАС октенидином; 3 группа – пациенты с терапией ХРАС фурацилином; 4 группа – пациенты с терапией ХРАС бензилдиметил-миристоиламино-пропи-ламмония хлорида моногидратом. Для обезболивания пациенты всех групп применяли стоматологический гель с лидокаином 2% и экстрактом цветков ромашки.

В нашем исследовании на первом этапе терапия ХРАС включала применение антисептика и анестетика. На втором этапе (через 7 суток) терапию продолжали репа-рантами.

Оценку свободнорадикальных процессов в ротовой жидкости пациентов с хроническим рецидивирующим афтозным стоматитом проводили до начала исследования и на 7-е сутки терапии путем определения продуктов окислительной модификации биомолекул на основании количественной оценки окрашенного комплекса с тиобарбиту-ровой кислотой (ТБК), максимума вспышки (МВХЛ) и площади (ПХЛ) Н 2 О 2 -индуцируемой люминол-зависимой хемилюминесценции с помощью хемилюминотестера LT-01 («Horos» «Joint Venture Soviet-Swedish Company»). Для оценки ферментного звена окислительного гомеостаза также определяли концентрацию диеновых конъюгатов и малонового диальдегида [9].

Показатели здоровых людей были взяты из литературных источников [10].

Забор ротовой жидкости осуществлялся натощак методом сплевывания до начала исследования и на 7-е сутки после начала терапии. Ротовую жидкость подвергали центрифугированию в течение 15 минут при 2000 g, и для дальнейших исследований использовали прозрачный су-пернатан.

Цифровой материал всех экспериментов подвергали статистической обработке с помощью пакета программ STATISTICA Application 10.0.1011.0. В работе использовались непараметрические методы анализа.

Результаты исследования

В ходе проведённых исследований была выявлена интенсификация свободнорадикальных процессов в ротовой жидкости пациентов с афтозным стоматитом (табл. 1).

У пациентов с афтозным стоматитом установлены высокие концентрации ТБК-РП значительно превышающие физиологическую норму. При терапии различными антисептическими препаратами в комплексе с стоматологическим гелем с лидокаином 2% и экстрактом цветков ромашки установлено разной степени интенсивности снижение концентрация ТБК-РП в ротовой жидкости всех пациентов. Так, у пациентов контрольной группы, терапию которым проводили хлоргексидином, на 7-е сутки исследования концентрация ТБК-РП снизилась на 8,5 % (Т = 68,0000, Z = 2,218971, при р = 0,023321) от первоначального значения; у пациентов 1-й группы, терапию которым проводили октенидином, концентрация ТБК-РП снизилась на 15,0 % (Т = 101,0000, Z = 2,347771, при р = 0,031114), у пациентов 2-й группы, терапию которым проводили фурацилином – концентрация ТБК-РП осталась практически на исходном уровне, а у пациентов 3-й группы, терапию которым проводили бензилдиметил-ми-ристоиламино-пропиламмония хлорида моногидратом, – снизилась на 9,2 % (Т = 125,0000, Z = 2,947711, при р = 0,032111) от первоначального значения.

Таблица 1. Динамика интенсивности свободнорадикальных процессов в ротовой жидкости пациентов с афтозным стоматитом на фоне терапии антисептиками с анальгетиком

Table 1. Dynamics of the intensity of free radical processes in the oral fluid of patients with aphthous stomatitis on the background of therapy with antiseptics with analgesic

Показатель	Здоровые пациенты	Сутки исследования	Контроль (хлоргексидин)	1-я группа (октенидин)	2-я группа (фурацилин)	3-я группа (бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония хлорида моногидрат)
ТБК-РП, мкмоль/л	4,21 ± 0,147	0	11,09 ± 0,36	11,13 ± 0,35	11,12 ± 0,34	11,10 ± 0,33
		7	10,15 ± 0,321	9,46 ± 0,291	11,01 ± 0,372	10,08 ± 0,321
МВХЛ, усл. ед.	0,7558 ± 0,026	0	1,6230 ± 0,053	1,6219 ± 0,052	1,6208 ± 0,055	1,6225 ± 0,057
		7	1,4219 ± 0,0501	1,3245 ± 0,0491	1,5843 ± 0,0512	1,3846 ± 0,0481
ПХЛ, усл. ед.	1,0171 ± 0,037	0	1,8248 ± 0,058	1,8253 ± 0,063	1,8255 ± 0,062	1,8261 ± 0,059
		7	1,6674 ± 0,0531	1,5421 ± 0,0591,2	1,8145 ± 0,0552	1,6895 ± 0,0561
МДА, мкат/л	2,15 ± 0,07	0	6,28 ± 0,19	6,29 ± 0,21	6,26 ± 0,22	6,27 ± 0,20
		7	5,62 ± 0,181	5,78 ± 0,171	6,01 ± 0,19	5,58 ± 0,201
ДК, усл. ед.	0,266 ± 0,006	0	0,298 ± 0,009	0,300 ± 0,011	0,293 ± 0,010	0,301 ± 0,010
		7	0,273 ± 0,0081	0,280 ± 0,009	0,283 ± 0,008	0,281 ± 0,009

Примечание. В этой таблице различия достоверны при P < 0,05: 1 – по сравнению со значением нулевого дня в группе; 2 – по сравнению с показателями контрольной группы.

Безусловно, на 7-е сутки исследования концентрация ТБК-РП в ротовой жидкости у пациентов всех групп оставалась крайне высокой и существенно превышала показатели здоровых людей, но в целом у пациентов 1-й группы она была ниже, чем в контроле, на 6,8 %, у пациентов 2-й группы – была выше, чем в контроле, на 8,5 % (Т = 122,0000, Z = 3,345552, при р = 0,0), а у пациентов 3-й группы – соответствовала контролю.

В отношении оценки максимума вспышки хемилюминесценции установлено, что до начала исследования у пациентов с афтозным стоматитом наблюдалось увеличение этого показателя в среднем в 2,2 раза по сравнению с таковым у здоровых людей. На фоне терапии антисептическими препаратами в комплексе с стоматологическим гелем с лидокаином 2% и экстрактом цветков ромашки наблюдалось снижение максимума вспышки хемилюминесценции ротовой жидкости. У пациентов контрольной группы, терапию которым проводили хлоргексидином,на 7-е сутки исследования максимум вспышки хемилюминесценции ротовой жидкости уменьшился на 12,4 % (Т = 0,0000, Z = 2,271141, при р = 0,0) от первоначального значения; у пациентов 1-й группы, терапию котором проводили октенидином, максимум вспышки хемилюминесценции ротовой жидкости уменьшился на 18,3 % (Т = 115,0000, Z = 3,247714, при р = 0,021111), у пациентов 2-й группы, терапию котором проводили фурацили-ном, – уменьшился незначительно, а у пациентов 3-й группы, терапию которым проводили бензилдиметил-миристои-ламино-пропиламмония хлорида моногидратом, – уменьшился на 14,7 % (Т = 0,0000, Z = 2,396111, при р = 0,0) от первоначального значения.

В целом, на 7-е сутки исследования максимум вспышки хемилюминесценции ротовой жидкости у пациентов всех групп превышал физиологическую норму, но у пациентов 1-й группы он был меньше, чем в контроле на 6,8 %, у пациентов 2-й группы – был больше, чем в контроле на 11,4 % (Т = 106,9000, Z = 3,295554, при р = 0,001211), а у пациентов 3-й группы – почти равнялся контролю (различия не превышал 3 %).

Оценка площади хемилюминесценции ротовой жидкости позволила установить, что у пациентов с афтозным стоматитом наблюдается существенное возрастание данного параметра на фоне воспалительных процессов, стимулирующих выработку свободных радикалов. Однако терапия исследуемыми субстанциями в комплексе с стоматологическим гелем с лидокаином 2% и экстрактом цветков ромашки способствует нормализации нарушенного окислительно-восстановительного равновесия в ротовой жидкости и позволяет снизить этот параметр. У пациентов контрольной группы, терапию которым проводили хлор-гексидином, на 7-е сутки исследования площадь хемилюминесценции ротовой жидкости уменьшилась на 8,6 % (Т = 116,0000, Z = 2,395558, при р = 0,0) от первоначального значения; у пациентов 1-й группы, терапию котором проводили октенидином, площадь хемилюминесценции ротовой жидкости уменьшилась на 15,5 % (Т = 115,0000, Z = 3,247714, при р = 0,021111), у пациентов 2-й группы, терапию котором проводили фурацилином, – осталась практически на первоначальном уровне, а у пациентов

3-й группы, терапию которым проводили бензилдиметил-ми-ристоиламино-пропиламмония хлорида моногидратом, – уменьшилась на 7,4 % (Т = 0,0000, Z = 2,396111, при р = 0,0) от первоначального значения.

На 7-е сутки исследования площадь хемилюминесценции ротовой жидкости у пациентов всех групп оставалась большой и существенно превышала показатели здоровых людей, но в целом у пациентов 1-й группы она была меньше, чем в контроле на 7,5 % (Т = 91,0000, Z = 2,393152, при р = 0,032100), у пациентов 2-й группы – была больше, чем в контроле на 8,8 % (Т = 91,0000, Z = 2,393152, при р = 0,032100), а у пациентов 3-й группы – соответствовала контролю.

В ротовой жидкости концентрация малонового диальдегида у пациентов на фоне афтозного стоматита была в среднем в 3 раза выше по сравнению с показателями здоровых людей. На фоне терапии различными антисептиками в комплексе с стоматологическим гелем с лидокаином 2% и экстрактом цветков ромашки установлено снижение концентрации МДА в ротовой жидкости пациентов. У пациентов контрольной группы, терапию которым проводили хлоргексидином, на 7-е сутки исследования концентрация МДА в ротовой жидкости снизилась на 10,5 % (Т = 0,0000, Z = 2,923331, при р = 0,0) от первоначального значения; у пациентов 1-й группы, терапию котором проводили октенидином, концентрация МДА в ротовой жидкости снизилась на 8,1 % (Т = 118,0000, Z = 2,927711, при р = 0,032111), у пациентов 2-й группы, терапию котором проводили фурацилином, – снизилась на 4 %, а у пациентов 3-й группы, терапию которым проводили бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония хлорида моногидратом, – снизилась на 11,0 % (Т = 148,1000, Z = 2,631174, при р = 0,0) от первоначального значения.

На 7-е сутки исследования концентрация МДА в ротовой жидкости у пациентов всех групп оставалась высокой по сравнению с показателями здоровых людей, и у пациентов 1-й и 3-й групп она соответствовала контролю, а у пациентов 2-й группы была выше, чем в контроле, на 6,9 %.

Концентрация диеновых конъюгатов в ротовой жидкости пациентов с афтозным стоматитом также была существенно выше до терапии антисептическими препаратами в комплексе с стоматологическим гелем с лидокаином 2% и экстрактом цветков ромашки. У пациентов контрольной группы, терапию которым проводили хлоргекси-дином, на 7-е сутки исследования концентрация ДК в ротовой жидкости снизилась на 8,4 % (Т = 59,0000, Z = 2,722511, при р = 0,0) от первоначального значения; у пациентов 1-й группы, терапию котором проводили окте-нидином, концентрация ДК в ротовой жидкости снизилась на 6,7 %, у пациентов 2-й группы, терапию котором проводили фурацилином, – снизилась на 3,4 %, а у пациентов 3-й группы, терапию которым проводили бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония хлорида моногидратом, – снизилась на 6,6 % от первоначального значения.

На 7-е сутки исследования концентрация ДК в ротовой жидкости у пациентов всех групп оставалась высокой по сравнению с показателями здоровых людей и во всех группах была примерно на одном уровне (отклонения от контроля не превышали 3,5 %).

Обсуждение результатов

Результаты исследований позволяют заключить, что при хроническом рецидивирующем афтозном стоматите изменяется ферментативная активность ротовой жидкости. Согласно представленным данным, исходные значения концентрации ТБК-РП, максимума вспышки хемилю-минисценции ротовой жидкости, площади хемилюминесценции ротовой жидкости и концентрации МДА и ДК в контрольной группе и трёх экспериментальных группах достоверно отличаются от данных, полученных на 7-е сутки исследования. Достоверное снижение изучаемых показателей ротовой жидкости свидетельствует об эффективности 1-го этапа терапии афтозного стоматита антисептическими препаратами и снижении интенсивности 1 2 3 4

окислительных процессов в ротовой жидкости. Из всех предложенных антисептиков наилучшую эффективность демонстрируется октенидин, достоверно хуже работают хлоргексидин и бензилдиметил-миристоиламино-пропи-ламмония хлорида моногидрат и наименее эффективен в терапии ХРАС фурацилин.

Выводы

Терапия ХРАС октенидином в комплексе с стоматологическим гелем с лидокаином 2% и экстрактом цветков ромашки наиболее эффективно способствует восстановлению нарушенного оксилительного гомеостаза ротовой жидкости.