Факторы роста в ткани рака пищевода различного гистогенеза

Материалы и методы. Дизайн исследования был одобрен этическим комитетом ФГБУ «РНИОИ». Обязательным условием включения в обследование было добровольное информированное согласие всех больных. Исследовали образцы тканей, полученных от 36 больных, поступивших на оперативное лечение в РНИОИ.: 27 – плоскоклеточный рак пищевода, 9 – аденокарцинома. Все больные имели II стадию процесса, (G2, рTNM). Гистологический контроль осуществлялся во всех случаях. Возраст больных с от 58 до 74 лет.

В 10% цитозольных фракциях ткани, приготовленных на калий-фосфатном буфере рН 7.4, содержащим 0,1%

ОНКОГЕНЕТИКА И ПАТАНАТОМИЯ

Твин-20 и 1% БСА методом ИФА с использование стандартных тест-систем определяли уровень ростовых факторов – VEGF-А и его рецептора VEGF-R1 (BenderMedSystem, Австрия), VEGF-С и его рецептора VEGF-R3 (BenderMedSystem, Австрия), EGF (Biosource, США), IFR-1 и IFR-2 (Mediagnost, США), TGF- β 1 (BenderMedSystem, Австрия). Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью пакета программ MicrosoftExcel (Windows XP).

Результаты. Учитывая различные этиопатогенетические факторы развития двух гистотипов рака пищевода, интерес представляло сравнительное изучение уровня факторов роста в условно интактной ткани пищевода, полученной по линии резекции при оперативном лечении больных плоскоклеточным раком пищевода и аденокарциномой.

Установлено, что уровень VEGF-С и IFR-1 и VEGF-R3 в образцах ткани по линии резекции при плоскоклеточном раке и аденокарциноме не имели достоверных отличий. Вместе с тем, уровни VEGF-А, VEGF-R1, EGF, TGF- β 1 и IFR-2 имели выраженные отличия. Так уровень VEGF-А в ткани плоскоклеточного рака превосходил аналогичный показатель в условно интактной ткани при аденокарциноме в 3,2 раза, VEGF-R1 был выше в 1,8 раза (Р<0,05) в условно интактной ткани при плоскоклеточном раке пищевода относительно соответствующей ткани при аденокарциноме. Вместе с тем, соотношение VEGF-А/ VEGF-R1, характеризующее уровень свободного VEGF-А было в 1,7 раза (Р<0,05)ниже в условно интактной ткани при аденокарциноме. Содержание EGF, TGF- β 1 и IFR-2 в условно интактной ткани при плоскоклеточном раке превосходило показатели в соответствующих образцах при аденокарциноме в 1,7 раза(Р<0,05), 2,5 раза и 1,9 раза (Р<0,05)соответственно. В образцах ткани плоскоклеточного рака пищевода найдено, что уровень VEGF-А и его рецептора VEGF-R1 превышал показатель в соответствующей ткани линии резекции в 5,6 раза и 6,4 раза соответственно, а в аденокарциноме – в 6,1 раза и 3,3 раза соответственно. При этом коэффициент VEGF-А/ VEGF-R в ткани плоскоклеточного рака, определяющий уровень свободного VEGF-А, не имел достоверных отличий от показателя в условно интактной ткани, а в ткани адено-кациномы превосходил нормативный показатель в 5,9 раза. Содержание VEGF-С в ткани плоскоклеточного рака было в 2,7 раза ниже, чем в ткани аденокарциномы, а уровень VEGF-R3 не имел достоверных отличий. Естественно соотношение VEGF-С/ VEGF-R3 в ткани плоскоклеточного рака было ниже, чем в аденокарциноме в 2,9 раза.

Уровень EGF в ткани плоскоклеточного рака не имел достоверных различий от показателя линии резекции, а в ткани аденокарциномы был выше в 1,8 раза (Р<0,05). Содержание TGF β 1 в ткани плоскоклеточного рака было выше, чем в соответствующей линии резекции в 1,4 раза, в ткани аденокарциноме – в 2,2 раза. Содержание IGF-I и IGF-II в ткани плоскоклеточного рака было снижено относительно соответствующей линии резекции в 1,7 раза (Р<0,05) и 1,9 раза (Р<0,05) соответственно. В ткани аденокарциномы уровень инсулиноподобных факторов роста имел принципиальные отличия. Так содержание IGF-I было повышено относительно ткани пол соответствующей линии резекции и превосходило показатель в ткани плоскоклеточного рака в 3,1 раза, содержание IGF-II не имело достоверных отличий от значений соответствующей интактной и ткани и показателя в ткани плоскоклеточного рака.

Достаточно неожиданным оказалось, что все показатели изученных ростовых факторов в перифокальной зоне плоскоклеточного рака пищевода не имели достоверных отличий от значений в условно интактной ткани по линии резекции. Несколько иная ситуация отмечена в ткани перифокаль- ной зоны аденокарциномы. Не имели достоверных отличий от показателей в условно интактной ткани только уровень EGF и TGFβ1. Содержание VEGF-А и VEGF-R в перифокальной зоне аденокарциномы были повышены относительно соответствующей интактной ткани в 3,3 раза и 1,3 раза (Р<0,05) соответственно, а VEGF-А/VEGF-R1 – в 2,6 раза. Относительно ткани аденокарциномы эти показатели были снижены: VEGF-А – в 5,9 раза, VEGF-R – в 2,6 раза и VEGF-А/VEGF-R1 – в 2,3 раза. Уровень VEGF-С в перифокальной зоне аденокарциномы был в 2,2 раза выше, чем в условно интактной ткани, но в 3,7 раза ниже, чем в ткани аденокарциномы, а VEGF-R3 был в 1,2 раза (Р<0,05) выше, чем в условно интактной ткани по линии резекции и не имел достоверных отличий от показателя в ткани аденокарциномы. Соотношение VEGF-С/ VEGF-R3 в исследуемой ткани в 1,5 раза (Р<0,05) превосходил показатель в условно интактной ткани, но был снижен в 3,8 раза относительно ткани опухоли. Содержание IGF-I и IGF-II в ткани перифокальной зоны аденокарциномы повышались относительно интактной ткани в 1,3 раза (Р<0,05) и 2,1 раза соответственно, однако относительно ткани опухоли IGF-I был снижен в 1,3 раза (Р<0,05), а IGF-II, напротив, повышен в 2,4 раза.

Таким образом, показано, что развитие патогенного механизма создания сосудистой сети в ткани плоскоклеточного рака и аденокарциномы пищевода имеет как общие, так и отличительные черты, связанные с эспрессией различных факторов роста. К общим механизмам относится активация VEGF-А, VEGF-С, VEGF-R1, VEGF-R3, TGF- β 1 и EGF в ткани злокачественной опухоли вне зависимости от ее гистогенеза. А различия касаются содержания IGF-I и IGF-II. Считается, что IGF наряду с EGF являются индукторами VEGF как в норме, так и патологии (Ferrara N., 2003). Однако сильная положительная корреляционная связь уровней VEGF-А и IGF-1(r=76; р<0,01), но не IGF-II, прослеживалась только в ткани аденокарциномы, тогда как в ткани плоскоклеточного рака эта связь носила отрицательный характер VEGF-А и IGF-1(r= – 81; р<0,01) и VEGF-А и IGF-2 (r= –79; р<0,01). То же самое касается и в отношение VEGF-С: сильная положительная корреляционная связь с IGF-1(r=79; р<0,01), но не IGF-II в аденокарциноме и сильная отрицательная связь с IGF-1(r= – 83; р<0,01) и с IGF-2 (r= –87; р<0,01). Вероятно, в плоскоклеточном раке индуктором VEGF-А и VEGF-С является только EGF, с которым прослеживается сильная корреляционная связь: r=75 (р<0,01) и r=77 (р<0,01) соответственно, а в аденокарциноме активаторами факторов ангио- и лимфангиогенеза выступают IGF-1 и EGF (r=76 при р<0,01 и r=79 при р<0,01 соответственно с VEGF-А и VEGF-С).

Анализируя в целом полученные результаты, необходимо отметить, что плоскоклеточный рак и аденокарцинома имеют не только различную этиологию, но и различный уровень ростовых факторов в ткани, на которой развиваются.

Выводы. 1. Ткань плоскоклеточного рака имеет более высокий, чем в аденокарциноме уровень VEGF-R3, EGF и TGF- β 1, тогда как в ткани аденокарциномы выше содержание VEGF-С и IFR-1. 2. Перифокальная зона плоскоклеточного рака не имеет достоверных отличий от показателей ростовых факторов в соответствующей условно интактной ткани, тогда как в аденокарциноме уровень большинства изученных факторов (кроме EGF и TGF- β 1) занимает промежуточное положение между показателями в ткани опухоли и условно интактной ткани. 3. В условно интактной ткани при плоскоклеточном раке большинство изученных показателей (кроме VEGF-С и IFR-1) превосходят таковые в соответствующей ткани при аденокарциноме.