Фармакологическое и токсикологическое исследование нового сбора для профилактики и лечения заболеваний пародонта и полученного на его основе сухого экстракта

Ю.И. Шабалдина, А.А. Маркарян, О.В. Нестерова

Московская медицинская академия имени И.М.Сеченова Росздрава, г. Москва

PHARMACOLOGICAL AND TOXICOLOGICAL RESEACH TO NEW HERBAL COMPOSITION AND A DRY EXTRACT OBTAINED FROM IT FOR PROPHYLAXIS AND TREATMENT OF INFLAMMATORY DISEASES OF PERIODONTIUM.

Yu.I.Shabaldina, A.A. Markarian, O.V. Nesterova

During the conducting researches pharmacological activity is studied and quiping toxicity of an extract and herbal composition for prophylaxis and treatment of inflammatory diseases of periodontium is determined. On the basis of the received results it is drawn a conclusion of presence counterinflammatory and antibacterial action. Extract and herbal composition are refer to comparatively harmless materials. Marked therapeutic effect and broad spectrum of pharmacological activity serve as prerequisites to their clinical use in complex therapy and prophylaxis of diseases of periodontium.

Заболевания пародонта представляют собой одну из наиболее сложных проблем современной стоматологии [3]. Широкая распространенность и значительное «омоложение» данной патологии, неблагоприятное влияние очагов пародонтальной инфекции на организм, а также высокий уровень осложнений вплоть до полной утраты зубов - все это определяет как медицинскую, так и социальную значимость данной проблемы. В этой связи весьма актуальным является поиск и изучение новых лекарственных средств для профилактики и коррекции заболеваний пародонта [2]. Особый интерес представляют лекарственные средства растительного происхождения, выгодно отличающиеся от синтетических аналогов широким спектром терапевтического действия, малой токсичностью и связанной с этим возможностью длительного применения. Весьма эффективными при терапевтическом и профилактическом использовании являются многокомпонентные препараты, содержащие биологически активные вещества, относящиеся к различным классам химических соединений, оказывающих комплексное воздействие на основные звенья патогенетического процесса [1,4].

Целью настоящей работы является оценка фармакологической активности сухого экстракта для профилактики и лечения заболеваний пародонта, а также растительной композиции, послужившей основой для его создания.

Изучаемый сбор сочетает в себе три вида лекарственного растительного сырья: корневища и корни кровохлебки лекарственной, содержащей до 23% дубильных веществ, крахмал, сапонины, органические кислоты, каротиноиды; корневища имбиря лекарственного, в составе которого эфирное масло, жирные масла, танин, микроэлементы; и корни солодки голой, содержащей глицирризин, флавоноиды, пектиновые вещества, моно- и дисахара, смолистые вещества, липиды, крахмал, растительные белки. Сухие экстракты обладают рядом преимуществ перед традиционными лекарственными формами, такими как отвары и настои. Прежде всего, при получении экстракта сводятся к минимуму потери биологически активных веществ, кроме того, появляется возможность точного дозирования и контроля качества лекарственного средства [6].

Экспериментальная часть

На начальном этапе исследований было проведено изучение противовоспалительной активности экстракта и отвара сбора. Результаты свидетельствуют о том, что испытуемые объекты обладают антифлогистической активностью (Таб. 1,2,3).

Из таблицы 1 следует, что при развитии каррагенинового воспалительного процесса испытуемый экстракт оказывает наиболее выраженное антиэкссудативное действие в дозах 600 и 400 мг/кг. Процент угнетения отека лапки крыс составлял 36-34 %. Испытуемый экстракт не имел значимых преимуществ при его использовании в дозе 600 мг/кг, и дальнейшие исследования проведены в дозе 400 мг/кг.

Влияние экстракта и отвара сбора на стадию экссудации при каррагениновом отеке лапки у белых крыс

Влияние экстракта и отвара сбора «Фитостом» на процессы экссудации и степень дегрануляции тучных клеток у белых крыс при остром перитоните

Таблица 2

Группы животных	Объем внутрибрюшинной жидкости, мл	Количество дегранулированных тучных клеток
Интактная	0	3,05± 0,13
Контрольная	0,71 ±0,04	92,16±3,16
Экстракт	0,51 ±0,04*	70,12±3,18*
Отвар сбора	0,56± 0,03*	75,14± 5,17*

Таблица 1

Группы животных	Прирост массы лапок, мг	Угнетение отека, %
Контрольная (Н2О)	43,88± 1,81	-
Опытная 1 (экстракт, 600 мг/кг)	28,15± 2,27*	36
Опытная 2 (экстракт, 400 мг/кг)	29,18± 4,95*	34
Опытная 3 (экстракт, 300 мг/кг)	35,64±2,07*	19
Опытная 4 (отвар сбора 10 мл/кг)	38,12± 1,12	14

Примечание: * - здесь и далее разница достоверна по сравнению с показателями у животных контрольной группы при Р < 0,05

Согласно результатам в приведенной таблице, испытуемое средство обладает выраженным антиэкссудативным действием. На фоне введения экстракта объем внутрибрюшинной жидкости уменьшается по сравнению с контролем на 29%, количество дегранулированных тучных клеток - на 24% . Отвар сбора уступал экстракту по эффективности.

Влияние экстракта и отвара сбора на фазу альтерации воспалительного процесса у белых крыс

Таблица 3

Группы животных	Площадь некротизированной ткани (см2)
	9 сутки	29 сутки
Контрольная (Н2О)	4,83±0,37	2.80±0,23
Экстракт •	3,26±0,24 *	1,20±0,14*
Отвар сбора	4,00± 0,33	1,90± 0.11*

Как следует из таблицы 3, курсовое введение экстракта в указанной дозе снижало степень деструкции и стимулировало регенерацию тканей. В частности, на 9-е сутки опыта площадь некротизированной ткани уменьшалась на 33% по сравнению с контролем, через 29-е суток -на 57%. При введении отвара сбора антиальтеративное действие проявлялось в менее выраженной степени.

Таким образом, экстракт в дозе 400 мг/кг ограничивает повреждение ткани и оказывает стимулирующее влияние на процессы регенерации в очаге воспаления, о чем свидетельствует уменьшение площади поврежденной ткани.

Полученные данные позволяют сделать вывод, что исследуемый экстракт обладает противовоспалительным эффектом, необходимым при лечении указанных патологий. Экспериментально установлена антибактериальная активность экстракта «Фитостом» в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, вызывающих заболевания пародонта. Результаты свидетельствуют, что в объемах от 0,10 до 1,00 мл экстракт угнетает рост Staphylococcus aureus 209, и Streptococcus faecalis, в объемах от 0,30 до 1,00 мл - Escherichia coli. Исследуемое средство не оказало выраженного бактериостатического действия по отношению к Proteus vulgaris H5D и Pseudomonas aeruginosa. Изучение острой токсичности экстракта и отвара сбора «Фитостом» проводили в соответствии с методическими указаниями по определению безопасности и эффективности биологически активных добавок к пище [5]. Опыты проводили на белых крысах обоего пола линии Wistar с исходной массой 160-180 г при внутрижелудочном введении. Каждую дозу экстракта (от 5 00 до 6000 мг/кг) испытывали на 10-12 лабораторных животных. Наблюдение за общим состоянием животных и их поведением осуществляли в течение 14 дней. Одновременно регистрировали наблюдаемые признаки интоксикации: общее состояние животных, особенности их поведения, интенсивность и характер двигательной активности, наличие судорог, нарушение координации движений, изменение тонуса скелетных мышц, реакцию на тактильные, звуковые и световые раздражители, частоту и глубину дыхательных движений, ритм сердечных сокращений, состояние шерстного покрова, окраску слизистых оболочек, размер зрачка, потребление корма, частоту мочеиспускания и окраску мочи, изменение массы тела. Также регистрировали сроки развития интоксикации и гибели животных. Погибших в эксперименте животных вскрывали и проводили макроскопический осмотр внутренних органов, осуществляли патоморфологическое исследование жизненно важных органов (степень кровенаполнения органов, наличие изъязвлений слизистых оболочек и др.).

Результаты проведенных исследований показали, что при однократном внутрижелудочном введении (в форме водного раствора) крысам в больших дозах 4000-6000 мг/кг наблюдали в течение 1 суток признаки отравления: учащение дыхания, цианотичность видимых слизистых оболочек, отмечались подергивания отдельных групп мышц, подпрыгивание при дотрагивании пинцетом, а также судороги клонико-тонического характера; гибель животных наступала при остановке дыхания. При вскрытии тушек погибших крыс отмечали гемодинамические нарушения в виде полнокровия сосудов с мелкоточечными кровоизлияниями под плевру легких, а также под эпикард. В легких встречались достаточно крупные геморрагические участки, а по краям легких - явления очаговой эмфиземы, а также разрывы межальвеолярных перегородок. DL50 при внутрижелудочном введении экстракта соответствовала 6000±23 мг/кг. У животных в контроле, которым вводили дистиллированную вод}- в аналогичном объеме, практически не нарушалась координация движений, сохранялись рефлексы, не отмечались нарушения двигательной активности, хотя в первые сутки наблюдалось снижение аппетита и учащение дыхания. При введении отвара сбора в максимально возможном объеме гибели крыс не отмечено, как и явных признаков интоксикации, за исключением ограничения подвижности животных в первые часы опыта, которое к концу 1 суток не наблюда- лось, а в дальнейшем их поведение не отличалось от поведения интактных животных. Полученные данные позволяют отнести экстракт и отвар сбора к группе малотоксичных веществ.

Выводы:

• 1.    В ходе проведенного исследования антифлогистической активности подтверждено наличие противовоспалительного действия экстракта и сбора.

• 2.    Установлена антибактериальная активность экстракта по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам. Причем экстракт проявил данные свойства в более выраженной степени.

• 3.    Определена острая токсичность сбора и экстракта, по результатам которой исследуемые экстракт и сбор отнесены к относительно безвредным фармакологическим веществам.

Также проведено всестороннее изучение иммуномодулирующей активности экстракта и сбора, результаты которого готовятся к публикации.