Функциональная активность эндотелия роговицы свиньи
Автор: Батурина Г.С., Каткова Л.Е., Соленов Е.И., Пальчикова И.Г., Искаков И.А.
Журнал: Саратовский научно-медицинский журнал @ssmj
Рубрика: Глазные болезни
Статья в выпуске: 2 т.16, 2020 года.
Бесплатный доступ
Цель: исследовать возможность диагностики функциональной сохранности трансплантатов роговицы человека на основе оценки транспорта воды и ионов натрия клетками эндотелия роговицы свиньи. Материал и методы. Исследование проводилось на дисках роговицы свиньи. Оценка динамики объема клеток выполнялась методом, основанным на эффекте гашения флуоресценции красителя Calcein белками цитоплазмы. Содержание внутриклеточного натрия исследовалось методом флуоресцентной микроскопии с использованием специфического для натрия красителя Sodium Green. Для исследования динамики десвеллинга матрикса роговицы применяли микрофлуидную проточную камеру. Результаты. Повышение температуры с 20 до 37°С активирует Na/K-АТФазу, что запускает снижение объема клеток эндотелия роговицы. Экспоненциальная аппроксимация профиля флуоресценции дает траекторию, отражающую снижение клеточного объема с характерным временем 73,5±12,6 секунды (п=6). Экспоненциальная аппроксимация профиля флуоресценции красителя Sodium Green, отражающая изменение относительной концентрации внутриклеточного натрия, соответствовала снижению концентрации этого иона с характерным временем 130,0±26,3 секунды (п=5). Эксперименты с температурной активацией насосной активности клеток эндотелия позволили определить начальную скорость снижения объема матрикса: 0,36±0,006 um/s (п=5). Заключение. Оценка динамики изменения объема клеток эндотелия и содержания в них натрия, динамика десвеллинга после прекращения холодовой консервации
Внутриклеточный натрий, десвеллинг, объем клетки, холодовая консервация, эндотелий роговицы
Короткий адрес: https://sciup.org/149135442
IDR: 149135442
Список литературы Функциональная активность эндотелия роговицы свиньи
- Maurice DM. The location of the fluid pump in the cornea. J Physiol 1972; 221 (1): 43-54.
- Bonanno JA. Molecular Mechanisms Underlying the Corneal Endothelial Pump. Exp Eye Res 2012; 95 (1): 2-7.
- Zarogiannis SG, et al. Regulatory volume decrease of rat kidney principal cells after successive hypo-osmotic shocks. Math Biosci 2013; 244 (2): 176-87.
- Solenov E, et al. Sevenfold-reduced osmotic water permeability in primary astrocyte cultures from AQP-4-deficient mice, measured by a fluorescence quenching method. Am J Physiol Cell Physiol 2004; 286 (2): 426-32.
- Hoffmann EK, Lambert IH, Pedersen SF. Physiology of cell volume regulation in vertebrates. Physiol Rev 2009; 89 (1): 193-277.
- Wehner F, et al. Hypertonic activation of a non-selective cation conductance in HeLa cells and its contribution to cell volume regulation. FEBS Lett 2003; 551 (11): 20-4.
- Батурина Г.С., Пальчикова И.Г., Конев А.А. и др. Исследование влияния гипотермической консервации на уровень натрия в клетках эндотелия трансплантата роговицы. Вавиловский журнал генетики и селекции 2018; 22 (4): 433-7.
- Батурина Г.С., Каткова Л.Е., Пальчикова И.Г., Соленов Е.И., Искаков И.А. Новые подходы к исследованию функциональной активности клеток эндотелия препаратов роговицы глаза. Современные технологии в офтальмологии 2019; 5 (30): 262-5.
