Функциональная активность нейтрофилов крови больных почечноклеточным раком в нагрузочных тестах in vitro

Актуальность. Иммунная система играет важную роль в задержке роста и регрессии опухолевых новообразований. Нейтрофильные гранулоциты участвуют в генерации активных форм кислорода (АФК), оказывающих токсичное воздействие на клеточные структуры, и являются важнейшими клеточными факторами системы неспецифической резистентности организма.

Цель исследования. Изучение фагоцитарной и хемилюминесцентной (ХЛ) активности нейтрофильных гранулоцитов крови у больных почечноклеточным раком (ПКР).

Материал и методы. На базе Краевого онкологического диспансера проведены наблюдения за больными с местно-распространенным ПКР до и через 14 дней после хирургического лечения (n=60 и n=26 соответственно) в возрасте от 50–65 лет. В качестве контрольной группы были обследованы здоровые доноры (n=56). Кислородный метаболизм нейтрофилов исследовали с помощью люминолзависимой ХЛ в течение 45 мин. Затем измеряли стимулированную ХЛ, в качестве индукторов «респираторного взрыва» использовали опсонизированный зимозан и взвесь St.epidermidis. ХЛ активность оценивали по параметрам: время выхода на максимум интенсивности, максимальное значение интенсивности и площадь ХЛ кривой. Индекс активации определяли по соотношению площади спонтанной к площади индуцированной ХЛ. Для оценки фагоцитоза определяли фагоцитарный индекс и фагоцитарное число. По результатам исследования была сформирована база данных, на основе которой с помощью пакета прикладных программ Statistica 6.0 производился статистический анализ. Описание выборки проводили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С₂₅ и С₇₅). Проверку гипотезы о статистической достоверности выборок проводили с помощью критерия Манна–Уитни.

Результаты. В ходе проведенных исследований выявлено, что уровень фагоцитарной активности нейтрофилов крови больных ПКР до хирургического вмешательства соответствует таковому у здоровых доноров, статистически значимых различий не выявлено. Изучение ХЛ ответа нейтрофилов крови у больных ПКР после операции показало увеличение времени выхода на максимум спонтанного свечения клеток по сравнению с контрольной группой (р<0,001).

У больных ПКР после хирургического лечения выявлена тенденция к снижению количества нейтрофилов, вступающих в реакцию фагоцитоза с культурой St.epidermidis, по сравнению с соответствующими параметрами групп здоровых доноров и больных ПКР до операции (0,05<р<0,1). Кроме того, что у больных ПКР после хирургического лечения обнаружена тенден- ция к снижению поглотительной способности нейтрофилов в тесте с культурой St.epidermidis относительно показателя группы больных ПКР до операции (0,05<р<0,01). Выявлена тенденция к снижению активности нейтрофильных гранулоцитов крови в тесте с латексом у пациентов ПКР после лечения, относительно соответствующего показателя крови у больных ПКР до операции (0,05<р<0,1). Среднее количество поглощенных нейтрофилами частиц латекса у обследованных пациентов с ПКР соответствует контрольному диапазону. У больных ПКР после хирургического лечения остается увеличенным время выхода на максимум спонтанного свечения нейтрофилов по сравнению с контрольной группой (р<0,001). После индукции ХЛ ответа клеток опсонизированым зимозаном у больных ПКР после хирургического вмешательства зарегистрировано увеличение времени выхода на максимум интенсивности ХЛ по сравнению с величинами контрольной группы (р<0,01). При стимуляции нейтрофилов взвесью St. epi-dermidis наблюдается тенденция к снижению площади ХЛ ответа относительно показателей у больных ПКР до операции (0,05<р<0,1). При исследовании уровня фагоцитарной активности в зависимости от вида объекта фагоцитоза установлено, что у больных ПКР как до, так и после хирургического лечения количество активно фагоцитирующих St. epidermidis нейтрофильных гранулоцитов периферической крови превышает количество фагоцитирующих нейтрофилов в тесте с латексом (р<0,001). Кроме того, обнаружено, что изменение кислородзависимого метаболизма нейтрофильных гранулоцитов больных ПКР в ответ на стимуляцию как до, так и после хирургического лечения одной направленности: уровень продукции АФК в ответ на индукцию опсонизированным зимозаном выше, чем при активации клеток St.epidermidis (р<0,05).

Выводы. У больных ПКР до хирургического лечения не выявлено выраженных функционально-метаболических изменений в нейтрофильных гранулоцитах. Через 14 дней после операции у больных ПКР снижаются показатели фагоцитарной активности клеток, что может отражать количественные и функциональные нарушения рецепторного аппарата нейтрофилов. Кроме того, в нейтрофильных гранулоцитах периферической крови прооперированных пациентов снижена скорость и стимулированный уровень продукции АФК, без нарушения компенсаторных возможностей данной клеточной популяции.