Гематологические характеристики котят Felis catus при экспериментальном заражении Diphillobothrium dendriticum (Nitzsch, 1824) (Pseudophyllidea: Diphyllobothri1dae)

• I.    Бакеев Н.Н. Растите льноядность соболя и ее возможное влияние на воспроизводсгво и численность популяций / Н.Н. Бакеев, Н.М. Кирис // Тр. ВНИИОЗ- Киров, 1975.- Вып. 25,- С. 46-58.

• 2.    Бакеев Н.Н. Соболиные угодья СССР и перспективы повышения их продуктивности / Н.Н. Бакеев, Б.А. Михайловский И Охрана и рациональное использование ресурсов соболя (мат-лы произвол, совещ.).- Красноярск, 1981.-С. 32-50.

• 3.    Войлочников А.Т. Об освоении отдаленных угодий в Ленском промхозе / А.Т. Войлочников // Охота-Пушнина-Дичь,- Киров, 1965,- Вып. 13,- С. 3-9.

• 4.    Ипполитов М.Д. Анализ точности расчета лимитов добычи соболя (на примере северных районов Иркутской области) / М.Д. Ипполитов // Тр, госзаповедника “Байкало-Ленский”.- Иркутск, 2001.- Вып.2,- С. 149-152.

• 5.    Ипполитов М.Д. Соболь Байкало-Ленского заповедника / М.Д. Ипполитов // Тр. госзаповедника “Байкало-Ленский”.- Иркутск, 2003,- Вып. 3,- С. 129-131.

• 6.    Кузякин В. А. Охотничья таксация / В.А.Кузякин,- М.; Лесная промышленность, 1979.-189 с.

• 7.    Малышев Л.И. Вертикальное распределение растительности на побережье Северного Байкала / Л.И. Малышев //Изв. Вост.-Сиб. фил. АН СССР, 1957-Вып. 10,-С. 113-121.

• 8.    Мельников Ю.И. Байкало-Ленский заповедник и его роль в оптимизации использования ресурсов соболя Прибайкалья / Ю.И. Мельников, В.Н. Степаненко, М.Д. Ипполитов, С.Л. Шабуров // Итоги и перспективы развития териологии Сибири,- Иркутск, 2001,- С. 204-206.

• 9.    Михеев В.С, Ландшафты юга Восточной Сибири (ред. В.А. Сочава) / В.С. Михеев, В.А. Ряшин,- М.: ГУГиК, 1977, 4 листа,

• 10.    Моложников В.Н, Растительные сообщества Прибайкалья / В.Н, Моложников.- Новосибирск, 1986.- 271 с.

• II.    Монахов Г.И. Прогнозирование и планирование добычи соболя / Г.И. Монахов // Мат-лы Всесоюзн. научн.-пронзвод. совещ. по соболю.- Киров, 1971,- С. 18-26.

• 12.    Монахов Г.И. Итоги первых опытов по мечению соболей радиоактивными изотопами / Г.И. Монахов, В.В. Тимофеев//Охота-пушнина-дичь.- Киров, 1965,- Вып. 13.-С. 15-21.

• 13.    НадеевВ.Н. Соболь. / В.Н. Надсев, В.В. Тимофеев,-М, 1955.-388 с,

• 14.    Наумов П.П. Охотничье-промысловые животные бассейна реки Киренго / П.П. Наумов,- Иркутск, 2003,- 315с.

• 15.    Павлов Б.К. Управление популяциями охотничьих животных/Б.КЛашюв.-М.: ВО Агропромиздаг, 1989,- 144 с,

• 16.    Соколов Г.А. Охотничье хозяйство в кедровых лесах / Г.А. Соколов,- М.: Наука, 1966.-108 с.

• 17.    Тимофеев В.В. Соболь Предбайкалья и Забайкалья / В.В. Тимофеев // Мат-лы Всесоюзн. научи.-произвол, совещ. по соболю.- Киров, 1971,- С. 50-65.

• 18.    Хомколова Е.В. К биологии мышевидных грызунов Байкало-Ленского заповедника / Е В, Хомколова, С.Ю. Артемьева, Н.С. Горбунова //Тр. Госзаповедника ’’Байкало-Ленский",- Иркутск, 2001,- Вып.2,- С. 153-159.

• 19,    Черникин Е.М. Экология соболя Martes zibellina L. 1758 в Баргузинском заповеднике / Е.М, Черникин.- Улан-Удэ: Изд. ГБУ, 2006,- 265 с.

• 20.    Швецов Ю,Г. Млекопитающие бассейна оз.Байкал / Ю.Г, Швецов, В.Н. Смирнов, Г.Н. Монахов,- Новося-■ бирск: Наука, 1984,- 357 с.

О.Е. Мазур, Л.В. Толочко, СВ. Пронина г. Улан-Удэ

Гематологические характеристики котят FELIS CATUS при экспериментальном заражении DIPHILLOBOTHRIUM DENDRITICUM* (NITZSCH, 1824) (PSEUDOPHYLLIDEA: DIPHYLLOBOTHR1IDAE)

The results of the investigation experimental infected with Diphyllobothrium dendrilicum, testify about arisen already al an early stage of the parasitic process changes in hemopoiesis. The activity of the protective - compensatory reactions depend

Работа выполнена при финансовой поддержке БГУ (грант «Научные и инновационные исследования» - 2006 г.).

on intensity of the invasion it is marked. The sign of an anemia and depression of the immunologic reactivity with increase of the invasive dose in the host are revealed.

В бассейне оз. Байкал в настоящее время выявлено три вида ленточных червей сем. Diphyl 1о-bothriidae (Luhe, 1910): лентец широкий Diphyllobothrium latum (Linnaeus, 1758), лентец чаечный D. dendriticum (Nitsch, 1824) и D. ditremum (Creplin, 1825) (Пронин, 2000). Лентец чаечный на фазе плероцеркоида является доминантным паразитом рыб подотряда лососевидные (Salman-oidei), а на фазе взрослых червей - рыбоядных птиц. Млекопитающие, в том числе человек, также включаются в жизненный цикл лентецов.

К настоящему времени накоплен обширный материал по таксономии, морфологии, экологии дифиллоботриумов оз. Байкала. Вместе с тем, чтобы оценить весь спектр отношений паразит-хозяин, необходимо получение данных по влиянию лентецов на организм дефинитивного хозяина. Однако основная масса литературных сведений, освещающая эту проблему, относится преимущественно к форме болезни, вызываемой лентецом широким (Делямуре и др., 1985; Гостева и др., 1991; Чебышев и др., 1998; Vuylsteke et al, 2004). В тоже время основной возбудитель ди-филлоботриоза животных и человека в северных районах Байкальской Сибири - лентец чаечный. Это связано с тем, что доминантным дополнительным хозяином лентеца чаечного в водоемах Байкальского бассейна является байкальский омуль - Coregonus autumnalis migratorius (Gregori, 1775), экстенсивность заражения которого в разных районах Бурятии достигает 70-100% (Пронин и др., 1988).

Влияние D. dendriticum на организм дефинитивных хозяев мало изучено. В немногочисленных исследованиях воздействия лентеца на дефинитивного хозяина было установлено, что паразит может вызывать развитие анемии у человека (Плотников,1955; Майборода и др., 1987), атрофию в органах пищеварительной системы у хомяков (в эксперименте) при высокой интенсивности инвазии (Пронина, Тимошенко, 1991), воспалительные и дегенеративные процессы в пищеварительном тракте у чайки (Герасимова и др., 1969). Полностью отсутствуют сведения о функционировании защитно-адаптационных механизмов при данной инвазии.

В связи с этим целью работы явилось определение особенностей гематологических параметров и общих закономерностей индуцирования адаптационных реакций организма на примере котята Felis catus (дефинитивные хозяева) - лентец чаечный D. dendriticum.

Материал и методика

Для моделирования инвазионного процесса использованы беспородные котята, в возрасте к началу эксперимента 18 дней. Животных распределили на 3 группы (и=3): 1 - контрольная; 2 и 3 - подопытные. Контрольную группу, составили клинически здоровые животные. Подопытных котят заразили однократно, перорально плероцеркоидами D. dendriticum в дозе на одно животное 8 экз. плероцеркоидов (2 группа), 16 экз. плероцеркоидов (3 группа). Живые плероцеркоиды получены от байкальского омуля - облигатного дополнительного хозяина D. dendriticum в оз. Байкал.

Гематологический статус оценивали до и на 3-й, 7-ой дни после заражения подсчетом числа эритроцитов, лейкоцитов, определением содержания гемоглобина, выведением лейкограммы по общепринятым методикам; уровня общего белка рефрактометрическим методом, количества белковых фракций в сыворотке крови методом осаждения насыщенными растворами фосфатов. В эти же сроки котят взвешивали, определяли температуру тела, частоту сердечных сокращений (ЧСС) и частоту дыхательных движений (ЧДД). Копроовоскопические исследования фекалий проводили по методу Като (Котельников, 1983), начиная с 3-х суток после заражения. Приживаемость плероцеркоидов определяли при вскрытии котят на 7 сутки после заражения.

Результаты и обсуждение .

Исследования по приживаемости плероцеркоидов лентеца показали, что к 7-му дню эксперимента у котят при скармливании по 8 и 16 капсул приживаемость составила 75% во всех подопытных группах. Все экземпляры паразита имели созревающие стробилы.

Анализ полученных результатов позволил установить, что клинико-физиологические и гематологические показатели у контрольных котят имели незначительные колебания в течение 7 дней. У котят обоих подопытных групп в течение всего эксперимента также значительных изменений в клинических показателях не наблюдалось, за исключением невысокого повышения температуры тела в 3-ей группе к 7-му дню после заражения.

В процессе развития лентеца в организме животных характеристики состава красной и белой крови изменялись. В динамике уровня гемоглобина наиболее значительные сдвиги отмечены к 3-му дню инвазии, характеризующиеся снижением данного показателя в 1.1 раз (2 группа) и в 1.2

раза (3 группа) по сравнению с контролем. Однако к 7-му дню эксперимента регистрировалось увеличение насыщенности эритроцитов гемоглобином в обеих группах, но по отношению к контролю его уровень оставался низким. Выявлено снижение числа эритроцитов по сравнению с контролем к 3-му дню после заражения у котят 2-ой группы в 1.3 раза, у котят 3-ей группы в 1.4 раза. К 7-му дню эксперимента уровень этого показателя в опытных группах оставался низким. Такая реакция клеток красной крови могла быть обусловлена опосредованным воздействием паразитарных антигенов на гемопоэтические клетки через изменение выработки цитокинов, имеющее место при цестодозных инвазиях (Rodrigues-Sosa М. et al., 2002). Известно, что такой цитокин, как интерферон - гамма является негативным регулятор гемопоэза, а ингибирование синтеза интерлейкина - 6 приводит к нарушению дифференцировки гемопоэтических клеток. Кроме того, имеются сведения, что развитие анемии при дифиллоботрйозе, является следствием дефицита витамина В12, по причине конкурентного поглощения витамина цестодами (Vuylsteke Р. et al., 2004; King et al., 2005).

Параллельно co снижением уровня эритроцитов в крови котят 3-ей группы уменьшалось количество лейкоцитов в 2.5 раза к 3-му дню эксперимента, в 1.8 раз к 7-му дню после заражения. Напротив, в крови котят 2-ой группы отмечено повышение числа лейкоцитов к 3-му дню в 1.5 раз, к 7-му - в 2раза по сравнению с контролем.

Анализ видового состава лейкоцитов экспериментальных животных выявил следующую закономерность: степень защитных клеточных реакций проявлялась наиболее выражено во 2-ой группе по сравнению с контролем. Об этом свидетельствовал максимальный уровень лимфоцитов, фагоцитов и эозинофилия. Лимфоцитоз сохранялся на протяжении всего эксперимента. Нейтрофильная реакция крови характеризовалась увеличением числа метамиелоцитов в 5.6 раз, палочкоядерных нейтрофилов в 3.8 раз и сегментоядерных гранулоцитов в 1.7 раз к 7-му дню эксперимента. Пик эозинофилии наступал к 7-му дню инвазии. В крови этой группы котят регистрировалось наибольшее количество моноцитов и базофилов.

При инвазии D, dendriticum у котят 3-ей группы характер изменений лейкоцитарного состава периферической крови имел аналогичные тенденции, за исключением лимфоцитарной реакции крови. Абсолютное количество лимфоцитов в крови на протяжении всего периода наблюдений находилось на низком уровне (в 1.6-3 раза меньше чем в контроле). Вместе с тем были выражены слабее нейтрофильная и эозинофильная реакции крови, чем при заражении меньшей дозой плероцеркоидов, но имели отличия от таковых контроля. Так, наблюдалось незначительное повышение абсолютного количества палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов к 7-му дню инвазии, соответственно в 1.5 раза и в 3 раза по сравнению с контролем. Количество эозинофилов у исследуемых особей было увеличено к 3-му дню в 3.2 раза, к 7-му дню инвазии в 2 раза.

У зараженных экспериментальных животных наблюдалось снижение общего белка на 6.5 г/л (3 группа) и на 3.1 г/л (2 группа), в основном за счет альбуминовой фракции (2 и 3 группы) и иммуноглобулинов (2 группа). Напротив, в обеих зараженных группах увеличилась концентрация бета-глобул инов на 2.6 г/л (3 группа) и на 5.7 г/л (2 группа).

Таким образом, выявленная динамика циркулирующих в крови лейкоцитов в ранний период после заражения у котят 2-ой группы свидетельствовала о развитии дестабилизационных процессов в лейкопоэзе. Это выражалось активацией развития лимфоцитарной и моноцитарногранулоцитарной линии клеток, что обеспечивало реактивный уровень защитных реакций организма на данном этапе инвазионного процесса. Так, приживаемость червей в этой группе составила 6 экз. (в 3-ей группе - 12 экз.). Кроме того, повышенная концентрация бета-глобулиновых фракций белка, косвенно указывает на включение неспецифических защитных гуморальных механизмов, что можно расценивать как компенсаторную реакцию на повреждающее токсическое и антигенное воздействие червя. В исследованиях Сергеевой, Петросян (2002) выявлено, что сколекс D.dendriticum. особенно края ботрий, как и сегментированные участки стробилы, является зоной, обладающей выраженной антигенной активностью, хотя и в меньшей степени, чем тегу-мент. Отмечено, что наибольшая концентрация гликогена, РНК и суммарного белка обнаруживается в передних отделах стробилы цестод (Пронина и др., 1985).

У котят, зараженных большей дозой инвазионного материала в ранний период инвазии, отмечаются негативные изменения в количественно-качественном составе гематологических параметров. Так, снижение числа лимфоцитов, слабовыраженная активация нейтрофильного и моноцитарного ряда клеток, по-видимому, обусловлено химическим повреждением в момент фиксации цестод и последующим токсическим и антигенным воздействием, возможно, блокирующим иммунный ответ.

Заключение

Анализ полученных результатов позволил сделать предварительное заключение о том, что организм котят на ранней стадии инвазионного процесса, вызванного D.dendriticum, реагировал изменениями гематологических параметров в зависимости от интенсивности заражения. Характер реагирования изученных показателей при меньшей дозе заражения носит защитнокомпенсаторный характер, который проявлялся активацией клеточных и гуморальных защитных реакций: лейкоцитозом, увеличением числа моноцитов, выраженной лимфоцитарной реакцией крови, эозинофилией, изменением клеточного состава периферической крови с преобладанием и сдвигом влево нейтрофильного звена, увеличением бета-глобулиновой фракции белка.

Инвазирование котят большей дозой заражения сопровождалось явлениями анемии, низким уровнем общего количества лейкоцитов, абсолютной лимфоцитопенией, появлением в крови эозинофилов, гипопротеинемией, в основном за счет альбуминовой и альфа-глобулиновой фракций белка. Динамика выявленных сдвигов свидетельствовала об угнетении эритропоэза и неспецифической резистентности организма котят, зараженных D.dendriticum.

Авторы глубоко признательны д.б.н, Н.М. Пронину за помощь в проведении эксперимента.