Гематологические показатели осетровых рыб, выращенных в условиях аквакультуры

Введение. В настоящее время количество работ, посвященных изучению физиологического состояния осетровых, выращенных в искусственных условиях значительно возросло [1, 2]. Ученые отмечают, что в период выращивания рыбы необходимо проведение систематических морфологических, физиологических и биохимических исследований [3], которые позволят контролировать показатели крови в пределах нормы [4]; изучают особенности роста различных гибридных форм осетровых видов рыб [5]; рассматривают перспективы искусственного выращивания гибридных форм [6], а также определяют гематологические показатели осетровых рыб с нормальной и пониженной массой тел [7] и отмечают, что определение интегральных лейкоцитарных индексов может быть альтернативой сложным иммунологическим и биохимическим исследованиям [8].

Цель исследований – изучить гематологические показатели представителей осетровых – стерляди и бестера, выращенных в установках замкнутого водоснабжения.

Условия, материалы и методы. Исследования проведены на осетровых рыбах в возрасте 1,5 лет, выращенных в установках замкнутого водоснабжения на базе лаборатории кафедры экологии и безопасности жизнедеятельности ФГБОУ ВО ДонГТУ (г. Алчевск). Отбор образцов крови проводили прижизненно. Провели морфологический анализ крови, в ходе которого определили содержание гемоглобина, а также количество эритроцитов и их специфические показатели (MCV, MCHC), лейкоцитов и их разновидностей в процентном соотношении, а также и количество тромбоцитов, и величину гематокрита. Биохимический анализ крови включал следующие показатели: количество общего белка, альбуминов, глобулинов, мочевины, креатинина, AST, ALT, глюкозы, кальция и фосфора. Был определен Индекс Кребса, который рассчитывали по формуле: Индекс Кребса = нейтрофилы /лимфоциты. Гематологические исследования были проведены на базе ветеринарной клиники «Поливет» (клинический анализатор Mindray BС-2800vet и биохимический – Mindray BA-88A). Статистическая обработка полученных результатов осуществлялась с применением лицензионной программы StatSoft Statistica v. 6.0. Достоверность различий оценивали при помощи t-критерия Стьюдента с вероятностью ошибки р≤0,05.

Результаты и обсуждение. Общее количество крови у рыб варьирует от 1,1 до 7,3 %. Она имеет ярко-красный цвет, специфический запах рыбьего жира, маслянистую консистенцию, солоноватый вкус. Основная функция крови – транспортная, которая включает доставку кислорода, питательных веществ и отработанных шлаков, а также гормонов [9]. Кровь рыб делится на циркулирующую, протекающую по сосудам, и депонируемую, исключенную из кругооборота [10].

Морфологические показатели крови рыбы, семейства осетровых (стерлядь, бестер) представлены в таблице 1.

Таблица 1 – Морфологические показатели крови рыбы семейства осетровых

Вид	Гемоглобин, г/л	Эритроциты 10 12 /л	Лейкоциты, 10 9 /л	Гематокрит, %
Стерлядь	58,67±9,43	0,36±0,02*	55,53±6,86	3,5±0,67
Бестер	39,33±2,69	0,26 ± 0,08	76,83±10,80	4,8± 0,55

Анализ данных, приведенных в таблице 1 показал, что достоверные различия установлены только по количеству эритроцитов. Так у стерляди их было на 39 % больше в сравнении с бестером. Как отмечает Е.В. Сухаренко, у разных видов рыб имеются сильно выраженные различия в морфологии клеток крови и содержится много молодых форм клеток. У взрослых рыб форма эритроцитов эллиптическая, у молоди – округлая и присутствует полиморфизм (рис.1) [10].

Рисунок 1 – Кровь осетровых рыб: 1 – эритроциты, 2 – гранулярный лейкоцит (нейтрофил), 3 – агранулярный лейкоцит (лимфоцит), 4 – гранулярный лейкоцит (нейтрофил)

Лейкоциты крови рыб представляют собой группу клеток с большим разнообразием линейных размеров и различной структурой ядра. Лимфоциты являются самой большой группой лейкоцитов рыб (до 95%) и обеспечивают реакции гуморального и клеточного иммунитета. Также наблюдается большое морфологическое разнообразие и высокая изменчивость тромбоцитов [10].

Одной из особенностей крови рыб является то, что лейкоцитарная формула у них в зависимости от физиологического состояния может меняться, поэтому не всегда в крови обнаруживаются все свойственные данному виду гранулоциты [11].

Лейкоцитарная формула крови рыбы семейства осетровых показана в таблице 2.

Таблица 2 – Лейкоцитарная формула крови рыбы семейства осетровых, %

Вид	Нейтрофилы	Эозинофилы	Моноциты	Лимфоциты	Тромбоциты
Стерлядь	29,27±4,97	2,23±0,05*	7,60±0,72	60,9±5,41	121,33±21,4
Бестер	21,83± 4,21	0,63± 0,05	8,60±0,38	68,93±4,61	116,0 ±6,02

Анализ данных, приведенных в таблице 2 показал, что достоверных отличий по количеству в крови осетровых лейкоцитов не установлено, кроме эозинофилов. Представители самой малочисленной их группы – базофилы, в мазке крови не определялись. Из всех лейкоцитов самыми многочисленными были лимфоциты, что свидетельствует о лимфоцитарном профиле крови у осетровых. По количеству тромбоцитов разница составила 4 %.

Эритроцитарные индексы, такие как средний объем эритроцита (MCV), средняя концентрация гемоглобина в эритроците (МСНС), предложенные в 1929 году М Wintrobe и которые качественно характеризуют клетки, а не их количество, показаны на рисунке 2:

(MCV,Fl)               гемоглобина в эритроците

(MCHC, 10g/l)

Стерлядь Бестер

Рисунок 2 – Эритроцитарные индексы рыбы семейства осетровых (MCV, Fl; MCHC, 10 g /I)

Следуют отметить, что достоверных отличий по такому показателю как средний объем эритроцита у представителей осетровых не установлено. При этом средняя концентрация гемоглобина в одном эритроците была большей у стерляди почти в 2 раза. Снижение данного показателя у бестера, возможно указывает на ответную реакцию рыбы на низкие гидрохимические показатели воды в установке замкнутого водоснабжения.

Индекс Кребса отражает дисбаланс между различными звеньями иммунитета. У представителей стерляди (0,5) данный показатель был в 1,5 раза выше в сравнении со сверстниками бестера (0,3).

Морфологические показатели крови у стерляди и бестера были в пределах физиологической нормы, что согласуется с литературными данными [12, 13].

Биохимический анализ крови семейства осетровых представлен в таблице 3.

Анализ данных, приведенных в таблице 3 показал, что большинство показателей были в границах физиологической нормы. При этом достоверные различия регистрировались по содержанию альбуминов и следует отметить, что их количество было небольшим, в сравнении с литературными данными [4, 14].

Коэффициент де Ритиса был также у нижней границы нормы [15].

Таблица 3 – Биохимический анализ крови рыб семейства осетровых

№	Показатель	Стерлядь	Бестер
1	Общий белок, г/л	25,73±1,45	22,7±1,84
2	Альбумин, г/л	11±0,45*	8,67±0,26
3	Глобулин, г/л	14,73±1,9	14,03±1,78
4	A/G	0,77±0,14	0,60±0,08
5	АЛТ, U/l	97,2±1,83	94,8±2,97
6	АСТ, U/l	268,8±20,68	326,57±28,28
7	Мочевина, Ммоль/л	2,9±0,08*	2,63±0,03
8	Креатинин, Мкмоль/л	32,6±2,47	37,95±7,62
9	Глюкоза, Ммоль/л	3,37±1,01	2,45±0,62
10	Кальций, ммоль/л	1,64±0,05	2,1±0,11
11	Фосфор, ммоль/л	3,44±0,33	3,39±0,13

Выводы. Морфологические и биохимические показатели у представителей осетровых находились в границах референтных значений, что указывает на хорошие адаптационные способности рыбы, выращенной в условиях аквакультуры. Следует отметить, что у представителей стерляди количество эритроцитов, средняя концентрация гемоглобина в одном эритроците были более высокими в сравнении с бестером, что на наш взгляд свидетельствует о разной адаптивной способности рыбы к условиям содержания в воде с низким насыщением кислорода.