Генетический полиморфизм у женщин с нарушениями репродуктивной функции, проживающих в условиях аэрогенного воздействия фенолов

Введение. Рядом авторов проведены исследования по содержанию фенола в плаценте беременных женщин, который оказывал влияние на продолжительность гестационного периода и толщину плаценты. При проникновении в клетку, фенол подвергается активной биотрансформации при помощи оксидаз, что может привести к увеличению токсичности отдельных метаболитов, которые можно связать с повреждением как ферментов, так и ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) [1,2].

Показатели женского здоровья зависят не только от условий внешней среды, но прежде всего, детерминированы генетическим статусом. Особую актуальность представляет изучение влияния на репродукцию регуляторных генов, таких как PPARs (рецепторы активирующие пролиферацию пероксисом), которые могут явиться причиной каскада метаболических и гормональных нарушений, оказывая воздействие на яичники и плаценту [3].

Цель: изучение особенностей генетического полиморфизма у женщин с измененной репродуктивной функцией, проживающих в условиях аэрогенной экспозиции фенолами

Материалы и методы. Проведено обследование двух групп женщин детородного возраста, с нарушенной репродуктивной функцией, проявляющейся в невынашивании беременности. Группу наблюдения составили женщины, средний возраст которых 32,27±0,23 года, проживающие в условиях аэрогенной экспозиции фенолами (56 женщин). Группу сравнения составили женщины, средний возраст которых 30,76±0,24 лет, проживающие вне зоны аэрогенного воздействия фенолов (54 женщины). Содержание фенолов в атмосферном воздухе территории проживания исследуемых групп, а также содержание фенолов в крови исследуемых пациентов определялось методом газовой хроматографии на приборе Кристалл-5000. Оценка генетического полиморфизма была осуществлена с использованием метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) и аллельной дискриминации на приборе BioRAD CFX96 в режиме реального времени. Статистическая обработка результатов проводилась в программах: Statistica 6.0, онлайн программах SNR Stats и ГенЭксперт, Microsoft Excel.

В исследовании оценивались следующие показатели: содержание фенола, о-крезола, п-крезола в атмосферном воздухе; содержание фенола, о-крезола, п-крезола в крови пациенток; генетические полиморфизмы 9 кандидатных генов (ESRI G2014A rs2228480, MTHFR С677Т rsl801133, MTNR1A С/Т rs 34532313, PPARA G2528C rs4253778, PPARD A/G rs2016520, PPARGC1A G1444A rs8192678, SOD C14510A rs2758330, TERT C309G rsl0054203, VEGF G634Crs2010963).

Результаты. В результате оценки качества атмосферного воздуха на территории проживания группы наблюдения было обнаружено превышение гигиенических нормативов по фенолу (до 2,3 ПДКс.с.), о-крезолу (до 2,0 ПДК с.с.), п-крезолу (до 7,4 ПДК с.с.). Территория группы сравнения характеризовалась допустимым содержанием фенолов в атмосферном воздухе.

Результаты химического анализа крови пациентов группы наблюдения позволили установить значения, превышающие фоновый уровень. Установлены достоверные (р<0,05) межгрупповые различия содержания фенола и крезолов по отношению к группе сравнения (превышения в 1,3 раза по о-крезолу; в 2,1 раза по п-крезолу; в 1,5 раза по фенолу).

По результатам генетического типирования установлено достоверное различие по частоте гетерозиготного генотипа А/G гена PPARD в группе наблюдения, который превышал аналогичный показатель группы сравнения в 2,6 раза, а также превышение частоты минорного аллеля G гена PPARD в группе наблюдения относительно группы сравнения в 3,2 раза. Нами был применен тест Харди-Вайнберга, который подтвердил отсутствие смещения от нормального распределения в исследуемых группах по всем генам, за исключением гена TERT C309G и гена SOD С14510А.

Тест Харди-Вайнберга позволил нам использовать мультипликативную и аддитивную модели наследования, согласно которым, носительство аллеля G гена PPARD rs2016520 (OR=3.86, 95% CI: 1,16-12,87) а также носительство гетерозиготного генотипа A/G (OR=3.93, 95% CI: 1.04-14.89) и G/G (OR=3.00, 95% CI:0.12-77.32) гена PPARD, у женщин с нарушением репродуктивной функции, проживающих в условиях аэрогенного воздействия фенолами, характеризует их достоверные различия с показателями группы сравнения.

Таблица 1

Системы «химический агент- генотип»

Проведенная сравнительная оценка генотипов   фенолов в крови с использованием программы исследуемых генов, ассоциированных с содержанием   «SNPstats»   позволила получить достоверные различия (р<0,05) между группами в системах «фенол - генотип гена MTHFR С677Т», «о-крезол - генотип гена PPARD A/G (rs2016520)», «п-крезол - генотип гена ESRI G2014A» (таб.1).

Выводы. Таким образом, анализ качества атмосферного воздуха на территории проживания группы наблюдения показал превышение гигиенических нормативов содержания фенола (до 2,3 ПДК с.с.), о-крезола (до 2,0 ПДК с.с.), п-крезола (до 7,4 ПДК с.с.). Одновременно выявлены достоверные (р<0,05) межгрупповые различия содержания фенолов в крови по отношению к группе сравнения, превышения над которой составили: в 1,3 раза по о-крезолу; в 2,1 раз по п-крезолу; 1,5 раз по фенолу.

Генетический статус женщин с самопроизвольным прерыванием беременности в анамнезе, проживающих в условиях аэрогенной экспозиции фенолами, характеризуется достоверно большей частотой гетерозиготного, вариантного гомозиготного генотипа и вариантного аллеля гена PPARD (A/G rs2016520) по отношению к группе сравнения, что позволяет отнести этот ген к кандидатным, отражающим особенности развития репродуктивных нарушений у женщин в условиях аэрогенной экспозиции фенолами.