Гепатопротекторная активность некоторых фитопрепаратов, содержащих фенилпропаноиды

Использование лекарственных растений, содержащих биологически активные соединения (БАС), обладающие антиоксидантной активностью, позволяет расширить арсенал лекарственных препаратов для лечения и профилактики поражений печени. Изучение механизмов действия гепатопротекторных соединений растительного происхождения дает возможность влиять на различные звенья антиоксидантной защиты печени в комплексной терапии гепатитов. Лимонник китайский - Schi-zandra chinensis Baill. — долгое время применяется в медицине в качестве тонизирующего и адаптогенного лекарственного средства [3]. Также существуют данные о высокой антиоксидантной активности препаратов, изготовленных из лимонника [8-9].

Цель настоящей работы - определение антиоксидантной активности фитопрепаратов на основе плодов лимонника китайского, а также исследование их влияния на ферментативные звенья антиоксидантной защиты печени.

В качестве объектов исследования выбрали фармакопейные препараты из семян лимонника китайского «Лимонника настойка», фитопрепараты: СО₂-экстракт («Схизатон») из семян лимонника китайского Schizandra chinensis Baill., сок лимонника, настойка лимонника на 70%-ном спирте [6]. Исследование антиоксидантной активности фитопрепаратов осуществляли на белых лабораторных крысах обоего пола массой 200-260 г., которые были разделены на группы по 10 штук в каждой. Крысы находились на обычном рационе вивария, были размещены в стандартных пластиковых

клетках в помещении с температурой воздуха 18-25 ^о С. Животные были вовлечены в эксперимент одновременно, что исключает влияние внешних температурных, климатических и иных факторов на разницу активности ферментов у опытных и контрольных групп животных. Во время эксперимента доступ крыс к воде и корму был свободным. Все эксперименты выполнялись в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных». Для воспроизведения токсического повреждения печени нами был выбран четыреххлористый углерод, который наиболее часто применяется в эксперименте с целью моделирования токсического гепатита [5]. В результате токсического повреждения печени в крови увеличивается уровень перекисного окисления липидов (ПОЛ). В этой связи нами было применено многократное введение четыреххлористого углерода крысам в дозе 2,0 г/кг веса животного. Крысы забивались в соответствии с этическими нормами под эфирным наркозом методом декапитации. Печень крыс извлекалась, промывалась физиологическим раствором и сразу замораживалась в сосуде с твердой углекислотой («сухим льдом») при температуре - 70-80 ^о С. Затем из ткани печени готовился гомогенат для проведения анализа на содержание малонового альдегида (МДА), а также определения активности супероксиддисмутазы (СОД), глутатионпероксидазы (ГП) и каталазы. Гомогенат готовился механическим измельчением ткани печени массой 1 г. с 5 мл фосфатного буфера (рН=7,4) со скоростью 5000 об/мин в сосуде с двойными стенками постоянно охлаждаемого проточной водой. Определение конечного продукта ПОЛ — МДА осуществляли на основе принципа [7], в соответствии с которым при высокой температуре в кислой среде МДА реагирует с тиобарбитуровой кислотой (ТБК), образуя окрашенный триметиновый комплекс с максимумом поглощения при длине волны 532 нм, который и регистрируется фотометрически.

Определение активности каталазы основано на способности перекиси водорода образовывать с солями молибдена стойкий окрашенный комплекс [2]. В гомогенате печени определяли также активность СОД - фермента, инактивирующего супероксидные радикалы и уменьшающего интенсивность ПОЛ. Суперок-сиддисмутаза относится к числу ферментов, входящих в состав антиоксидантной защитной системы организма. Активность СОД определялась по методу, описанному в [1]. Определение активности глутатионпероксидазы (ГП)

осуществляют в соответствии со следующей методикой [4], основанной на определении скорости окисления глутатиона в присутствии гидроперекиси третичного бутила. Данные активности ферментов рассчитывались на содержание белка. Полученные данные являлись выборками из генеральных совокупностей с нормальным распределением. Для статистической обработки данных нами был применен однофакторный дисперсионный анализ. Для статистического анализа средних выборок был использован t-критерий с поправкой Бонферони.

Таблица 1. Влияние фитопрепаратов на активность ферментов и уровень ПОЛ

Примечание: * - p<0,05; ** - p<0,01

Результаты и их обсуждение. Результаты исследования антиоксидантной активности фитопрепаратов на основе лимонника китайского указывают на то, что именно 70% настойка лимонника обладает наиболее выраженной фармакологической активностью. Несколько слабее действует препарат сока лимонника. Оба препарата достоверно снижают уровень малонового диальдегида и повышают активность супероксиддисмутазы. Но в отличие от сока, настойка лимонника повышает активность каталазы, что, безусловно, свидетельствует о лучшей способности этого препарата защищать ткани от окислительного стресса. Разность в фармакологической активности 70% настойки и сока лимонника можно объяснить различием в составе исходного сырья, взятого для их получения, а именно: 70% настойка готовится из семян, где уровень а-токоферола изначально высок, а в соке, приготовленном из плодов лимонника, очевидно, преобладают кверцетин и ретинол. Наличие фенилпропаноидов и в семенах, и в плодах лимонника доказано. Видимо имеет значение различия в концентрации и эффективности реализации гепатопротекторных механизмов различных компонентов, обеспечивающих различные виды синергизма. Нами не отмечалось достоверного влияния на фермент глутатионпероксидазу, тем не менее, можно говорить о тенденции к повышению активности этого фермента.

Выводы: полученные нами данные позволяют говорить об эффективности фитопрепаратов, изготовленных на основе лимонника китайского, в качестве гепатопротекторов и могут служить основанием для расширения показаний к их применению. При сравнении исследуемых нами фитопрепаратов с карсилом было установлено, что все они в меньшей степени снижают уровень малонового диальдегида. Повышение активности важнейшего фермента противоперекисной защиты - супероксиддисмутазы хотя и достаточно выражено, но несколько ниже, чем на фоне применения карсила.