Гиполипидемическое действие комплексного средства при адреналиновой дислипопротеидемии

Патология сердечно-сосудистой системы преобладает в структуре общей заболеваемости населения нашей страны. В настоящее время смертность населения трудоспособного возраста в структуре болезней системы кровообращения составляет 78 %, из них 51 и 27 % приходится на долю коронарной болезни сердца (КБС) и мозгового инсульта соответственно [11; 8]. Известно, что среди причин и основных патогенетических механизмов, приводящих к развитию указанных нозологических форм, ведущее место занимает атеросклероз.

Дислипидемия – наиболее неблагоприятный прогностический фактор в развитии сердечнососудистых заболеваний [1]. Ее характерные признаки: гипертриацилглицеридемия, снижение уровня липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) и пограничные уровни липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) со сдвигом их состава в сторону высокоатерогенных мелких плотных ЛПНП. Структурные изменения липопротеидов даже без их количественных изменений также могут приводить к атеросклерозу [4]. Сочетанность нарушений липидного и углеводного обменов у больных атеросклерозом отмечена многими исследованиями. Между углеводным и липидным обменом существует тесная связь, и, возможно, их сочетанное нарушение и исследование толерантности к глюкозе могут быть использованы для выявления нарушения липидного обмена. В частности известно, что у больных коронарным атеросклерозом однократная нагрузка глюкозой приводит к увеличению содержания холестерина и триацилглицеридов. Известно, что липолиз и липогенез в жировой ткани играют важнейшую роль в липидном обмене. Жировая ткань обильно иннервируется симпатической нервной системой, и ее возбуждение сопровождается гиперкатехоламинемией, в частности секрецией адреналина.

Гиперкатехоламинемия отчасти может быть связана с влиянием известных риск-факторов атеросклероза – курение, стресс, хирургические операции и др. [13; 14]. Висцеральная жировая ткань, обусловленная высокой плотностью β-адренорецепторов, определяет выраженную чувствительность ее к липолитическому действию катехоламинов. Физиологические эффекты адреналина начинаются с взаимодействия со специфическими β-адренорецепторами клеток-«мишеней»: в печени усиливаются процессы гликогенолиза и глюконеогенеза, тормозится утилизация глюкозы периферическими тканями, обусловливая гипергликемию, вызывающую нарушение липидного метаболизма; в жировой ткани в результате липолиза увеличивается скорость мобилизации и выхода свободных жирных кислот и глицерина из жировых депо и доставки жирных кислот в печени, что активирует синтез триа-цилглицеридов и поступление в кровоток ЛПНОП и ЛПНП, способствующих развитию атеросклероза. Механизм адреналиновой гиперлипидемии связан с активацией через аденилатциклазу синтеза ц-АМФ, который, в свою очередь, активирует соответствующую протеинкиназу. В результате в кровь высвобождаются свободные неэстерифицированные жирные кислоты, которые оказывают токсическое действие на мембраны клеток сосудистой стенки и инициируют перекисное окисление липидов [5].

В современных условиях проблема антиатеросклеротической эффективности различных средств и методов лечения оказалась более сложной, чем первоначальные представления о роли нормализации уровня атерогенных липидных и липопротеиновых фракций. Вышеуказанное обосновывает необходимость дальнейшего поиска, разработки, внедрения и совершенствования мер по предупреждению и лечению атеросклероза и его осложнений. Одним из главных звеньев данного комплекса мероприятий является изучение новых лекарственных средств, влияющих на этиопатогенетические механизмы развития атеросклероза. Исходя из этого, препараты, применяемые для профилактики и лечения атеросклероза, должны отвечать следующим требованиям: нормализовать уровень атерогенных фракций липопротеидов, повышать уровень антиатерогенного холестерина липопротеидов высокой плотности (ХС ЛПВП), снижать интенсивность свободнорадикального окисления липидов, активизировать антиоксидантный потенциал, оказывать корригирующее влияние на иммуногенез и воспалительные реакции, препятствовать развитию атеротромбоза [6].

Несмотря на широкий выбор антиатеросклеротических и гиполипидемических препаратов, про-тивоатеросклеротические средства не всегда оказывают желаемый эффект и довольно часто вызывают тяжелые побочные реакции. В связи с этим весьма важной проблемой является поиск новых, активных и малотоксичных лекарственных средств, предотвращающих развитие дислипопротеидемий различного генеза и предназначенных для ранней адекватной терапии и замедления прогрессирования атеросклеротического процесса. В этом плане перспективными являются средства растительного происхождения. В настоящее время лекарственные растения продолжают оставаться одними из перспективных источников получения новых биологически активных соединений. Препараты растительного происхождения менее токсичны, обладают более мягким действием, что обусловлено родством метаболизма растительной и животной клетки.

Эти обстоятельства обосновывают актуальность поиска новых эффективных нетоксичных анти-атеросклеротических средств растительного происхождения. Объектом наших исследований явилось 25-компонентное растительное средство, составленное по рецептурным прописям тибетской медицины [12].

Целью работы явилась оценка фармакотерапевтической эффективности комплексного растительного средства при экспериментальной адреналиновой дислипопротеидемии.

Материалы и методы

В состав изучаемого комплексного сбора входят: камфора х.ч. синтетическая, левовращающая ГФ (ХI); цветки календулы лекарственной; бутоны гвоздики ароматной; древесина лиственницы сибирской; стебли луносемянника даурского; трава донника лекарственного; плоды боярышника кровавокрасного; плоды миробалана хебул; корни шлемника байкальского; корни пиона уклоняющегося; семена ореха мускатного; цветки скабиозы венечной; плоды яблони ягодной; трава плауна баранца; кора жостера даурского; корни валерианы лекарственной; семена элеттарии кардамон; семена салата посевного; корни вздутоплодника сибирского; корневища солодки уральской; кальция глюконат ГФ (Х1); плоды шиповника; цветки шиповника; слоевище цетрарии исландской; сахароза.

Эксперименты выполнены на 48 белых крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой 160– 170 г. Животных содержали в стандартных условиях вивария при одинаковом уходе и питании, световом и температурном режиме, со свободным доступом к воде. Экспериментальные исследования проводились в соответствии с правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей (Страсбург, 1986). Экспериментальную гиперлипидемию индуцировали в соответствии с Методическими указаниями [7] однократным внутрибрюшинным введением адреналина гидрохлорида в дозе 1,5 мг/кг. Указанное растительное средство вводили лабораторным животным превентивно до введения адреналина гидрохлорида в течение 7 дней в форме отвара в объеме 10 мл/кг массы. Последнее его введение осуществляли одновременно с индуцированием дислипопротеидемии. Животным контрольной группы вводили эквиобъемное количество воды очищенной по аналогичной схеме. Исследования осуществляли через 30 минут после введения адреналина гидрохлорида.

При исследовании специфической гиполипидемической активности растительного средства в сыворотке крови определяли содержание общего холестерина (ОХС), триацилглицеридов (ТГ), фракции β-липопротеидов (β-ЛП), липопротеидов высокой плотности (ХСЛПВП), липопротеидов низкой плотности (ХСЛПНП), липопротеидов очень низкой плотности (ХСЛПОНП), индекса атерогенности (ИА) и отношение ХСЛПНП к ХСЛПВП, используя унифицированные лабораторные методы исследования с помощью диагностических биохимических наборов фирм «Human», «Olvex Diagnosticum», «Roche», «Вектор Бест». Антиоксидантные свойства указанного растительного средства оценивали по степени ингибирования образования продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ): диеновых конъюгатов (ДК) и ТБК-активных продуктов (ТБКАП), антиокислительную активность (АОА) – по активности каталазы. Содержание диеновых конъюгатов в плазме крови определяли спектрофотометрическим методом [2]. Концентрацию малонового диальдегида (МДА) определяли по методу [10]. Активность каталазы в сыворотке крови определяли спектрофотометрическим методом [3].

Полученные в ходе экспериментов данные статистически обработаны общепринятыми методами для малой выборки с определением средней величины (М) и средней арифметической ошибки (m). Достоверность результатов оценивали с применением критерия Стьюдента [9]. Различия считали значимыми при вероятности 95 % (Р<0,05).

Результаты исследований

Окисление и модификация частиц ЛПНП резко усиливается под действием активных форм кислорода, генерируемых при аутоокислении глюкозы и последующем образовании из нее альдегидов. Повышенная пероксидация ЛПНП способствует образованию конечных продуктов гликозилирования, что усугубляет нарушение нормальной регуляции и способствует усугублению патологических изменений [4]. Следует отметить, что не только окисленные ЛПНП, но и конечные продукты гликозилирования усиленно захватываются макрофагами стенки сосудов, а усиление образования конечных продуктов гликозилирования способствует дальнейшему увеличению атерогенной модификации ЛПНП. Одним из путей разрыва этого порочного круга является компенсация углеводного обмена. Как известно, при введении адреналина в печени усиливаются процессы гликогенолиза и глюконеогенеза, тормозится утилизация глюкозы периферическими тканями, обусловливая гипергликемию, вызывающую нарушение липидного метаболизма; в жировой ткани в результате липолиза увеличивается скорость мобилизации и выхода свободных жирных кислот и глицерина из жировых депо и доставка жирных кислот в печень, что вызывает повышенный синтез триацилглицеридов и поступление в кровоток ЛПНОП и ЛПНП, способствующих развитию атеросклероза.

Результаты проведенных исследований представлены в таблице 1.

Как следует из приведенной таблицы, при однократном введении адреналина лабораторным животным развивалась резко выраженная дислипопротеидемия. В частности, на 35 % в крови возрастало содержание общего холестерина, на 66 % – триацилглицеридов, в 2,8 раза – ХСЛПНП, на 69 % – ХСЛПОНП, индекс атерогенности увеличивался в 6,7 раза, отношение ХСЛПНП/ХСЛПВП – в 4,5 раза. Наряду с этим содержание антиатерогенных липопротеидов (ХСЛПВП) снижалось на 36 % по сравнению с данными у животных интактной группы.

При превентивном введении указанного средства содержание холестерина снижалось на 29 %, триацилглицеридов – на 20 %, ХСЛПНП – на 49 %, ХСЛПОНП – 23 %, β-липопротеидов – на 22 %, в значительной степени снижался индекс атерогенности и отношение ХСЛПНП/ХСЛПВП по сравнению с показателями у животных контрольной группы. Вместе с тем содержание ХСЛПВП повышалось на 33 % по сравнению с данными у животных, которым вводили только адреналин. Наряду с этим установлено, что при введении крысам адреналина гидрохлорида в крови в 2,1 раза возрастало содержание глюкозы. При назначении лабораторным животным указанного растительного средства концентрация сахара в крови снижалась на 33 % по сравнению с показателями у крыс контрольной группы.

Таблица 1

Влияние комплексного растительного средства на показатели липидного обмена и содержание глюкозы в крови у белых крыс при адреналиновой гиперлипидемии

Показатели	Группы животных
	Интактная	Контрольная (адрена-лин+ Н2О)	Опытная (адреналин + растительное средство)
ОХС, ммоль/л	2.79± 0.14	3.78± 0.10	2.71± 0.11*
ТГ, ммоль/л	0.65± 0.04	1.08± 0.10	0.87± 0.03*
ХСЛПВП, ммоль/л	2.16± 0.10	1.39± 0.12	1.85± 0.11*
ХСЛПНП, ммоль/л	0.70± 0.01	2.00± 0.15	1.03± 0.11*
ХСЛПОНП, ммоль/л	0,13± 0.01	0.22± 0.02	0.17± 0.01*
β-липопротеиды, ед.	2.91± 0.1	3.15± 0.20	2.47± 0.33
Индекс атерогенности (ИА)	0.23± 0.01	1.56± 0.10	0.37± 0.04*
Отношение ХСЛПНП/ХСЛПВП	0.32± 0.001	1.43± 0.012	0.55± 0.03*
Глюкоза, мМ/л	7.61± 0.22	15.83± 1.01	10.67± 1.10*

Примечание: * – здесь и далее разница значима по сравнению с показателями у животных контрольной группы при Р < 0,05

При введении животным адреналина гидрохлорида повышался уровень радикалообразующих процессов в организме. В этих условиях мощность собственных систем антирадикальной защиты и обеспеченность организма антиоксидантами зачастую становятся залогом повышения неспецифической резистентности организма. Утрата контроля со стороны антиоксидантных систем приводит к окислительному стрессу – атаке активных форм кислорода клеточных структур и биомакромолекул, приводящей к локальным или системным повреждениям [5].

Таблица 2

Влияние комплексного растительного средства на показатели ПОЛ и АОЗ при экспериментальной адреналиновой гиперлипидемии у белых крыс

Группы животных	МДА, мкМ/мл	ДК, ед. ОП	Каталаза, мкат/л
Интактная	3.32± 0.17	5.90± 0.45	0.58± 0.03
Контрольная (адреналин + Н 2 О)	5.83± 0.16	6.91± 0.56	0.27± 0.01
Опытная (адреналин + растительное средство)	3.50± 0.10*	5.00± 0.02*	0.41± 0.01*

При оценке влияния указанного средства на показатели перекисного окисления липидов (ПОЛ) и антиоксидантной защиты организма (АОЗ) при адреналиновой дислипопротеидемии установлено, что под влиянием испытуемого растительного средства содержание малонового диальдегида (МДА) и диеновых конъюгатов (ДК) в сыворотке крови крыс снижалось по сравнению с контролем на 40 и 28 % соответственно, а активность каталазы повышалась по сравнению с соответствующими данными у животных контрольной группы на 52 % (табл. 2).

Заключение

Таким образом, комплексное растительное средство снижает в крови уровень триацилглицеридов, общего холестерина и ЛПНП, в то время как уровень ЛПВП повышается. Указанное средство уменьшает степень окисления биомакромолекул на фоне снижения уровня глюкозы в крови.

По всей видимости, указанное средство, обладая выраженным положительным влиянием на изменение спектра липопротеидов и гипогликемическим действием при адреналиновой гиперлипидемии, может способствовать как снижению образования альдегидов при аутоокислении повышенного уровня глюкозы в организме и тем самым препятствовать окислительной модификации ЛПНП, так и путем снижения пероксидации ЛПНП уменьшению уровня конечных продуктов гликозилирования.

Фармакологическая активность и фармакотерапевтическая эффективность растительного средства обусловлена наличием широкого спектра биологически активных веществ, таких как дубильные вещества (таниды); флавоноиды (кверцетин, гиперин, витексин, гиперозид, байкалин, ликопин и др.); эфирные масла, содержащие эвгенол, ацетилэвгенол, кариофиллен; терпены (α- и β-пинены, камфен); лимонен, терпинеол, борнеол, цинеол; кумарины (кумаровая кислота, дикумарол, пиранокумарины); каротиноиды (каротин, рубиксантин, ликопин, флавохром и флавоновые гликозиды); алкалоиды (даурицин, ликоподин, никотин, акрифолин); стероидные и тритерпеновые сапонины (β-ситостериноглицирризин); органические кислоты; микроэлементы; витамины (аскорбиновая кислота, В12, В1, В2, Е, РР, К); пектины, смолы, жирные масла и жироподобные вещества, слизистые и горькие вещества, азотсодержащие соединения (включая аминокислоты), крахмал, сахар, белок и др.

Широкий спектр фармакологической активности и фармакотерапевтической эффективности указанного средства аргументирует целесообразность ее включения в комплексную профилактику и терапию дислипопротеидемий и атеросклероза.