Гистологическая характеристика селезенки байкальской нерпы в постнатальном онтогенезе

Введение. Байкальская нерпа относится к числу интереснейших представителей уникальной фауны озера Байкал. Эволюционное преобразование растительного и животного мира Байкала обеспечило длительное, непрерывное и обособленное развитие организмов, что способствовало сохранению их морфологических особенностей, в том числе и нерпы [5].

В связи с распространением нерпинариев изучение морфологии нерпы носит актуальный характер для своевременной диагностики, профилактики и лечения заболеваний, недостаточно изученных у данных животных.

Селезенка выполняет важные функции в организме, к которым относят иммунную, фильтрационную, обменную, кроветворную, депонирующую функции. Она относится к периферическим органам иммунной системы [2].

В паспорте и библиографии байкальской нерпы, составленными И.А. Кутыревым и другими авторами (2006), информация о гистологическом строении селезенки байкальской нерпы отсутствует. Однако в том же 2006 г. были опубликованы результаты исследования С.В. Прониной, описавшей впервые гистологическое строение селезенки у щенков нерпы.

Также изучением морфологии селезенки у байкальской нерпы занимались Г.П. Ламажапо-ва, С.Д. Жамсаранова, Д.Е. Григоренко [3], в которых имеются отрывочные данные о гистологических особенностях органа.

Цель исследования: изучить гистологическое строение селезенки байкальской нерпы в онтогенезе.

Задачи исследования: уточнить микроструктуру селезенки у байкальской нерпы в постнатальном онтогенезе и выявить морфометрические показатели внутренних структур селезенки байкальской нерпы.

Материал и методы исследования. Исследования проводились на базе кафедры анатомии, физиологии и микробиологии ФГБОУ ВО Иркутского ГАУ имени А.А. Ежевского. Объектом исследования явилась байкальская нерпа, добытая в Кабанском районе Республики Бурятия в рамках Программы НИР, утвержденной в Росрыболовстве РФ на 2015 год. Материалом для изучения послужила селезенка от особей в возрасте от 5 месяцев до 12 лет (n = 12). Возраст животных определяли по кольцам дентина основания клыка и роговым кольцам когтя [1].

Для гистологических исследований кусочки селезенки размером 1,5×1,5 см фиксировали в 10 %-м нейтральном формалине. Материал заключали в парафин с предварительной пропиткой в изопропиловом спирте в течение 12 ч шестикратно. Срезы толщиной 5–7–10 мкм окрашивали гематоксилином с эозином, заключали в канадский бальзам.

Для морфометрии структурных компонентов (капсула, трабекулы, красная и белая пульпы) использовали бинокулярный микроскоп марки Levenbuk 625 Biological, цифровую камеру S510 NG5MPIXEL и программу ScopePhoto, дополнительно для определения площади красной пульпы использовали окулярную сетку, вставленную в окуляр.

Изучение морфологических препаратов проводилось с использованием микроскопа MoticBA 400, фотографирование – фотоаппаратом Ni-konS 6150. Статистические показатели получены с помощью компьютерной программы «Статистика», цифровой материал приведен в виде средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (m), критерия степени достоверности результатов по Стъюденту, коэффициента корреляции.

Систематику названия анатомических структур и образований селезенки проводили по Международной гистологической номенклатуре [4].

Результаты исследования и их обсуждение . Опорно-сократительный аппарат селезенки у байкальской нерпы представлен капсулой, системой соединительнотканных трабекул и ретикулярной тканью. Капсула селезенки имеет два слоя – наружный из соединительной ткани и внутренний – из мышечной ткани.

У исследованных животных капсула достаточно плотная, на дорсальном крае она имеет неровный контур, указывающий на наличие V-образных вырезок. С возрастом толщина капсулы незначительно увеличивается: у кумутканов она составляет 155,0±8,16 мкм; неполовозрелых особей – 184,5±5,67, половозрелых животных – 215,4±10,74 мкм (табл.). Для всех половозрастных групп в местах отхождения трабекул характерно сужение капсулы.

От капсулы внутрь органа отходит сеть крупных, многочисленных трабекул, формирующих «своеобразный каркас» селезенки. В них расположены трабекулярные артерии и трабекулярные вены. Трабекулы проходят как прямолинейно, так и зигзагообразно, вариабельны по форме: могут встречаться в виде сформированного овала, рогатки, «бублика» и даже неправильного прямоугольника.

Нами установлена наиболее тесная взаимосвязь у неполовозрелых животных между возрастом и толщиной капсулы (r = 0,955), возрастом и шириной трабекул (r = 0,942), длиной селезенки и шириной трабекул (r = 0,913), шириной селезенки и шириной трабекул (r = 0,948); у кумутканов – между длиной селезенки и толщиной капсулы (r = 0,960) и между шириной селезенки и толщиной капсулы (r = 0,961).

У кумутканов трабекулы состоят из тонких волокон соединительной ткани, направляющихся продольно и поперечно, у неполовозрелых и половозрастных животных в их строении выявлены плотные пучки соединительной ткани.

Трабекулы имеют разную протяженность и ширину, которая, как правило, увеличивается с возрастом: у кумутканов она равна 250,7±6,58 мкм; неполовозрелых животных – 347,2±8,12; половозрелых животных – 380,4±14,66 мкм (рис. 1, табл.).

Паренхима селезенки, расположенная между трабекулами, представлена белой и красной пульпой (см. рис. 1). Белую пульпу образуют многочисленные лимфоидные узелки округлой формы, состоящие из лимфоидной ткани и расположенные вокруг адвентиции.

В белой пульпе расположены центральные артерии, граничащие с красной пульпой. Центры белой пульпы более светлые, периферия – более темная.

Рис. 1. Трабекулы и паренхима селезенки. Байкальская нерпа. 4 года. Гематоксилин и эозин.

Об. 10, Ок. 10: 1 – белая пульпа; 2 – красная пульпа; 3 – трабекулы; 4 – трабекулярные артерии

Диаметр белой пульпы с возрастом увеличивается: у кумутканов он составляет 433,5±11,97 мкм; неполовозрелых животных – 515,0±19,39; половозрелых животных – 677,1±31,34 мкм (см. табл.).

Площадь белой пульпы также расширяется, и у кумутканов она равна 594,7±10,57 мкм2, неполовозрелых – 759,1±7,84; половозрелых – 815,5±6,09 мкм2.

Нами определен корреляционный анализ, который определил взаимосвязь у кумутканов между возрастом и диаметром белой пульпы (r = 0,967) и между возрастом и площадью белой пульпы (r = 0,926).

Отчетливо заметна маргинальная зона – место перехода белой пульпы в красную (рис. 2). Мантийная зона представляет собой своеобразные муфты, которые слабо дифференцируются и выявляются вокруг трабекулярных артерий III порядка.

Морфометрические показатели основных структур селезенки, М±m

Показатель	Половозрастная группа
	Кумутканы (от 1 мес. до 1 года)	Неполовозрелые животные (от 1 года до 4 лет)	Половозрелые животные (от 4 лет и старше)
Толщина капсулы, мкм	155,0±8,16	184,5±5,67*	215,4±10,74*
Ширина трабекул, мкм	250,7±6,58	347,2±8,12*	380,4±14,66*
Диаметр белой пульпы, мкм	433,5±11,97	515,0±19,39*	677,1±31,34*
Площадь белой пульпы, мкм2	594,7±10,57	759,1±7,84*	815,5±6,09*
Площадь красной пульпы, мкм2	11880,0±567,8	13748,5±492,6	15180,3±613,2

*Р < 0,05 – разница статистически достоверна.

Основная часть селезенки байкальской нерпы образована красной пульпой, состоящей из ретикулярной ткани. Она заполнена кровяными клетками, придающими пульпе характерный цвет. Пульпа располагается между капсу- лой, трабекулами и узелками белой пульпы. В ней хорошо просматриваются многочисленные артерии различного диаметра, гемокапилляры и венозные синусы.

Рис. 2. Белая пульпа селезенки. Байкальская нерпа. 3 года. Гематоксилин и эозин. Об. 40. Ок. 10: 1 – лимфоидные узелки белой пульпы; 2 – маргинальная зона

Площадь красной пульпы значительно преобладает над белой пульпой во всех возрастных группах и составляет: у кумутканов – 11880,0±567,8 мкм2,   неполовозрелых –

13748,5±492,6и половозрелых – 15180,3±613,2 мкм2 (см. табл.).

Выводы

• 1.    Отличительной особенностью гистологического строения селезенки у байкальской нерпы является наличие плотной соединительнотканной капсулы, у неполовозрелых животных она увеличивается в 1,19 раза и половозрелых животных – в 1,38 раза по отношению к кумутканам. Трабекулы имеют разную протяженность и ширину, увеличивающуюся у неполовозрелых животных на 27,8 % и половозрелых животных – на 34 % по сравнению с ку-мутканами, что подтверждено коэффициентом корреляции между возрастом и шириной трабекул, между длиной селезенки и шириной трабекул.

• 2.    В белой пульпе отчетливо выражена граница маргинальной зоны. В красной пульпе имеется большое количество эритроцитов, придающих селезенке специфический цвет, такое строение характерно для всех исследуемых возрастных групп. Площадь белой пульпы с возрастом увеличивается в 1,3 раза у неполовозрелых особей и в 1,4 раза – по сравнению с кумутканами. Площадь красной пульпы значительно преобладает над белой пульпой во всех возрастных группах и составляет: у кумутканов – 11880,0±567,8 мкм², неполовозрелых –  13748,5±492,6 и половозрелых –

  15180±613,2 мкм².