Гистоморфологические изменения в стенке тонкого кишечника мелких домашних животных при эозинофильном энтерите

Введение. Под пищеварительной системой понимают пищеварительный тракт (рот, глотка, пищевод, желудок, тонкий и толстый кишечник) с железистыми образованиями (большие слюнные железы, печень, желчный пузырь, поджелудочная железа) [1, 2].

Тонкий отдел кишечника является главным всасывающим отделом желудочно-кишечного тракта. Тонкая кишка обеспечивает постепенное окончательное переваривание компонентов пищи до низкомолекулярных веществ с после- дующим всасыванием. Также кишечник поддерживает динамическую, но сбалансированную микрофлору в просвете, периодически подвергаясь воздействию патогенов [3].

Эозинофилы – это многофункциональные тканевые лейкоциты, известные среди резидентных клеток слизистой оболочки желудочнокишечного тракта, которые способствуют местному иммунитету. Недавние исследования с генетически измененными мышами показали не только, что эозинофилы участвуют в поддержа- нии гомеостаза кишечника, но и что отсутствие эозинофилов может оказать значительное влияние на природу эндогенной микрофлоры и реакцию на патогены кишечника [4–6].

Эозинофильные желудочно-кишечные заболевания описывают группу заболеваний, происходящих у плотоядных животных и характеризующихся симптомами, связанными с желудочнокишечной дисфункцией и воспалением, соответствующую эозинофилии кишечника [7, 8].

В нормальных физиологических условиях наиболее важными функциями эозинофилов, локализующихся в кишечнике, по-видимому, являются их участие в поддержании защитного слизистого барьера и взаимодействие с другими иммунными клетками, особенно в обеспечении иммунитета к микробиоте, населяющей просвет кишечника [9].

Эозинофильный энтерит является редким, плохо изученным заболеванием, представляющим спектр необъяснимых симптомов, имитирующих другие острые заболевания кишечника. Следовательно, эозинофильный энтерит является диагностической дилеммой, и клинические презентации с исследованиями только вносят свой вклад [10–13].

У пациентов с эозинофильным энтеритом наблюдаются аллергические заболевания [14], при этом клинические исследования не показали никакой связи между скармливаемым кормом, аллергией и эозинофильным энтеритом [15].

Рядом исследований установлено, что факторами возникновения и развития эозинофильного энтерита являются генетическая предрасположенность, дисбиозы, дисфункция кишечного барьера и дисрегуляция слизистой иммунной системы кишечника [16]. Однако дальнейшие исследования аспектов этиологии и патогенеза эозинофильного энтерита, а также патоморфо-логических изменений в тканях тонкого кишечника при клинически диагностированном эозинофильном энтерите мелких домашних животных особенно важны, в т. ч. для дальнейшего уточнения данных, разработки лекарственных и профилактических средств, а также диетических кормов для больных животных [17, 18].

Цель исследования – изучение патомор-фологических изменений в тканях тонкого кишечника при клинически диагностированном эозинофильном энтерите у мелких домашних животных.

Объекты и методы. Исследование проводилось в 2021 г. на базе ФГБОУ ВО ГАУ Север- ного Зауралья, а также крупной ветеринарной клиники города Екатеринбурга. Объектом исследования являлись мелкие домашние животные (кошки, собаки). Всего исследовано 28 образцов тканей, отобранных методом диагностической лапаротомии с забором биопсии кишечника у 21 собаки и 7 кошек разных пород.

Последующую обработку и изготовление гистологических препаратов осуществляли по общепринятым методикам. Образцы тканей фиксировали в 10 % забуференном формалине в течение 48 ч. Промывку с последующей гистологической проводкой осуществляли при помощи автоматического тканевого процессора Leica TP1020. При этом материал обезвоживали в спиртах возрастающей концентрации, подвергали действию ксилола с последующей пропиткой парафином. Заливку образцов органов в парафин проводили при помощи станции заливки Leica EG1160. Изготовление гистологических срезов толщиной 3– 5 мкм осуществляли на санном микротоме Leica SM2000R. Гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином с использованием станции автоматического окрашивания гистологических препаратов Leica ST5010. Анализ микропрепаратов проводили на микроскопе Leica DM2500, оснащенном видеокамерой Leica DFC420 и персональным компьютером.

Результаты и их обсуждение. При макроскопическом исследовании проб тканей тонкого кишечника было выявлено наличие утолщения мышечной стенки на протяжении около 8–10 см и более вплоть до утолщения стенки всего тонкого отдела кишечника.

При гистологическом исследовании полученных образцов ткани обнаружен ряд морфологических изменений. Выявлены скопления эозинофилов, облитерирующих строму на всем протяжении биоптатов. При этом значительно колеблется количество нейтрофилов (до 5–10 клеток на поле, × 400). Отмечено умеренное расширение млечных сосудов.

В исследованных образцах во фрагментах тонкой кишки дифференцировка слоев сохранена (рис. 1, 2). Ворсинки на значительном протяжении лизированы и замещены аморфными массами и, реже, сгустками из фибрина. Дегенерации эпителия крипт не наблюдается. В собственной пластинке локализуется большое количество эозинофилов (более 50 % популяции круглых клеток собственной пластинки).

При остром течении болезни наблюдается диффузная тотальная дегенерация ворсинок, тяжелый эозинофильный энтерит, наблюдается повышенная плотность скопления эозинофилов в мышечном слое в резектированных образцах тканей. Дегенерация ворсинок может быть частью агонального состояния («шоковый кишечник») и посмертного аутолиза (требуется сопос- тавление с временем и условиями хранения до начала аутопсии). Среди прижизненных причин некроза ворсинок без поражения крипт были диагностированы коронавирусный энтерит и некоторые тяжелые протозоозы (криптоспоридиоз).

Рис. 1. Подслизистая оболочка тонкой кишки, инфильтрированная эозинофилами кошки, 6 лет. Окраска гематоксилин-эозином, ув*100

Рис. 2. Слизистая оболочка тонкой кишки уплотнена и инфильтрирована эозинофилами кошки, 6 лет. Окраска гематоксилин-эозином, ув.×100

При исследовании образцов тканей тонкого кишечника кошек с клиническими признаками эозинофильного энтерита обнаружено со стороны кишечника: в ДПК и ободочной кишке дифференцировка слоев кишки сохранена, экспансивных или инфильтративных образований не выявлено (рис. 3, 4). В двенадцатиперстной кишке (ДПК) длина ворсинок выглядит незначительно измененной, но кончики притуплены. В тощей кишке длина ворсинок умеренно снижена (около 50–75 % от ожидаемой, если образец не находится ближе к подвздошной кишке – в этом случае может быть вариантом нормы). В ДПК также выражено расширение лимфатических сосудов в подслизистом слое. Поверхностный эпителий и эпителий крипт – без значительных морфологических особенностей.

Собственная пластинка содержит значительно повышенное число эозинофилов – они облитерируют строму почти на всем протяжении биоптатов и по количеству приблизительно сравнялись с лимфоидными клетками. Подслизистый и серозный слои – без особенностей.

Рис. 3. Тканевые структуры тонкой кишки, показывающей притупленные кончики ворсинок собаки, 5 месяцев. Окраска гематоксилин-эозином, ув*100

Рис. 4. Утолщение мышечной стенки ДПК собаки, 5 месяцев. Окраска гематоксилин-эозином, ув.^40.

Заключение. Установлено, что основным макроскопическим признаком проявления эозинофильного энтерита является утолщение стенки тонкого отдела кишечника на всем его протяжении, особенно выражено увеличение толщины мышечного слоя.

Основными гистологическими признаками эозинофильного энтерита собак являются: лизис кишечных ворсинок на значительном протяжении и замещение аморфными массами или сгустками из фибрина. У кошек – уменьшение на 50–75 % длины ворсинок кишечника. Изменения ворсинок, на наш взгляд, может быть связано с развитием хронического воспалительного процесса и патологической реакцией иммунной системы, что провоцирует и запускает аутоиммунный процесс, выражающийся в деградации ресничного эпителия.

При диффузной форме эозинофильного энтерита высокой степени активности отмечается диффузная инфильтрация эозинофилами кишечника, в частности большое скопление эозинофилов (более 50 % популяции круглых клеток собственной пластинки) обнаруживается в собственной пластинке.