Иммуногистохимическое исследование гиперпластических процессов и рака молочной железы

Большинство новообразований молочной железы верифицируется с помощью световой микроскопии, однако существуют диспластические процессы в виде атипической протоковой и дольковой гиперплазии, которые весьма трудны для дифференциальной диагностики с неинвазивными формами соответствующих инфильтративных раков. Для выбора адекватного лечения необходима четкая идентификация этих процессов. Злокачественный рост в отличие от доброкачественного сопровождается различными нарушениями структуры базальных мембран, вплоть до полного их исчезновения в очагах инвазии. С базальной мембраной тесно связан слой миоэпителия, наличие которого при гиперпластических процессах в молочной железе достоверно связано с доброкачественным характером.

Цель работы – сравнительное изучение миоэпителия и компонентов базальных мембран с помощью методов морфологического и иммуногистохимического анализа в морфологически сходных пролифератах доброкачественной и злокачественной природы для определения критериев их дифференциальной диагностики.

Изучены 88 случаев морфологически сходных проли-фератов молочной железы. Все пациентки были обследованы с помощью общеклинических методов, им проводили маммографию, УЗИ молочных желез, пункцию объемных образований с дальнейшим цитологическим исследованием. Для световой микроскопии образцы ткани фиксировали в 10 % нейтральном формалине, парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином, по ван Гизону. Для иммуногистохимического анализа использовали моноклональные антитела к цитокератину-8 (К-8), маркирующему в норме выстилающий эпителий, к цитокератину-17 (К-17) и гладкомышечному " –актину, маркирующим миоэпителиальные клетки, а также антитела к компонентам базальных мембран ламинину и коллагену IV типа.

Гиперпластическая пролиферация эпителия может наблюдаться в протоках, кистах и/или дольках; чаще она выявляется в протоках и кистах, значительно реже в альвеолах долек молочной железы. Наиболее частой гистологической формой внутрипротокового рака молочной железы была комедокарцинома (угревидный рак). Значительно реже выявлялись другие варианты – папиллярный, солидный, стелющийся, криброзный, кистозный, гиперсекреторный. Общим для всех вариантов протоковой карциномы in situ диагностическим признаком было наличие в просвете «обломков» ядер, теней погибших клеток, зернистых и фрагментированных масс.

Трудности возникают при дифференциальной диагностике папиллярного внутрипротокового рака с доброкачественными папиллярными поражениями, к числу которых относятся цистаденопапилломы и пролиферативные варианты фиброзно-кистозной болезни. B паппиллярном раке строма сосочков очень скудная, миоэпителиальные клетки отсутствуют, клетки, выстилающие сосочковые структуры, характеризуются потерей физиологического полиморфизма и выраженной мономорфностью. Однако ни один из этих морфологических признаков не может служить достаточным основанием для окончательного диагноза.

При иммуногистохимическом анализе сомнительных и сложных для диагностики случаев учитывали три параметра – экспрессию цитокератинов в пролиферате, нарушение структуры базальной мембраны и слоя миоэпителия, наличие в строме отдельных групп и комплексов клеток, экспрессирующих антиген К-8 и не имеющих базальной мембраны (как признак инфильтрирующего роста). В большинстве «раковых» структур типа внутрипротоковой и внутридольковой карцином сохранена непрерывная базальная мембрана в сочетании с К-17-положительным слоем миоэпителия. Hа начальных стадиях инфильтратив- ного роста выявлялись очаговые дефекты, вздутия, разрыхления, неравномерность толщины базальной мембраны, прерывистость слоя миоэпителия. Микроинвазии, не выявленные в биоптатах гистологически, обнаружены по реакции с моноклональными антителами к миоэпителию в 15 случаях. В 4 пролифератах сосочкового типа (гистологическая картина цистаденопапилломы) отсутствовал миоэпителий в фибромускулярной ножке эпителиальных сосочков, строма которого была представлена аморфными и волокнистыми отложениями, реагирующими положительно с компонентами базальных мембран и образующими спутанную беспорядочную сеть. Выявленный иммунофенотип позволил диагностировать папиллярный рак молочной железы. При склерозирующем аденозе слой миоэпи- телия и базальные мембраны окаймляли все тубулярные образования и К-17-положительные клетки, лежавшие поодиночке или группами в строме. При тубулярном раке клетки экспрессировали только К-8 (но не К-17), и все «раковые» структуры полностью были лишены базальных мембран и миоэпителиальных клеток.

Таким образом, использование моноклональных и поликлональных антител к компонентам базальных мембран и миоэпителию имеет важное значение для дифференциальной диагностики цистаденопапилломы и папиллярного рака, склерозирующего аденоза и тубулярного рака, а также для раннего выявления микроочагов инфильтрирующего роста рака молочной железы.