Иммуногистохимическое исследование межклеточных и клеточно-матриксных взаимодействий в аденокарциномах толстой кишки

Hарушение нормальной экспрессии и функционирования молекул межклеточной адгезии и компонентов внеклеточного матрикса является одним из важнейших механизмов, лежащих в основе прогрессии и метастазирования злокачественных опухолей человека.

Цель исследования – выявление особенностей экспрессии молекул межклеточной адгезии Е-кадхерина, в -ка-тенина, CD44v6 и матриксных металлопротеиназ 2 и 9 (ММР 2 и 9) в опухолевых клетках при развитии отдаленных метастазов рака толстой кишки.

Материал и методы . В исследование были включены клинические наблюдения и материал биопсий от 129 больных раком толстой кишки, у которых в 84 случаях в различные сроки после радикальной операции развились метастазы в печени и в 45 случаях, составивших контрольную группу, отдаленные метастазы не определялись. Иммуногистохимическое окрашивание выполнено с помощью биотин-стрептавидинового иммунопероксидазного метода на парафиновых срезах ткани первичных опухолей (n=129) и метастазов в лимфатических узлах (n=35) и печени (n=92) с использованием антител к Е-кадхерину (Clone 36B5), в -катенину (Clone 17C2) CD44v6 (Clone VFF-7), ММР 2 (Clone15W2) и ММР 9 (Clone 17В11) (“Novocastra”, Великобритания).

Результаты . Экспрессию Е-кадхерина демонстрировали раковые клетки первичных АТК (67/129, 52 %), части регионарных (8/35, 23 %) и отдаленных (18/92, 20 %) метастазов. Показано, что на поздних этапах развития заболевания наблюдается редукция экспрессии Е-кадхерина и изменение его локализации в клетке, а именно потеря мембранного окрашивания и появление цитоплазматической реакции. Снижение уровня, утрата поверхностной экспрессии или полное отсутствие Е-кадхерина были выявлены у 75 % больных раком толстой кишки с отдаленными метастазами. Подобные изменения обнаруживались как в клетках первичных опухолей, так и метастазов, удаленных в различные сроки после радикальной операции. Положительная реакция на в -катенин выявлялась в большинстве исследованных первичных опухолей толстой кишки (117/

129, 91 %) и их метастазов в лимфатических узлах (32/35, 91 %) и печени (86/92, 93 %). Увеличение цитоплазматической иммунореактивности и ядерная транслокация молекул в -катенина наблюдались в более чем 80 % опухолей, сопровождающихся развитием метастазов, а ядерная локализация белка была выше в инвазивной зоне этих опухолей. Анализ состояния кадхерин-катенинового комплекса в клетках аденокарцином толстой кишки (АТК) показал, что в большинстве неблагоприятных случаев наблюдалось сочетание высокого уровня в -катенина с минимальной экспрессией Е-кадхерина (59/84, 70 % для первичных опухолей, 22/35, 63 % для метастазов в лимфоузлах, 67/92,73 % для метастазов в печени). Кроме того, отмечалось достоверное увеличение частоты выявления и уровня экспрессии ММР 2 и ММР 9 в опухолях, сопровождающихся развитием метастазов (р=0,021 и р=0,012 соответственно). Усиление экспрессии ММР 2 и 9 сочеталось с умеренным или низким уровнем гистологической дифференцировки опухолей. Закономерности экспрессии исследованных ферментов, свойственные первичным опухолям, сохранялись в клетках метастазов в лимфатических узлах и печени. Экспрессия молекул CD44v6 в раковых клетках наблюдалась лишь в части изученных АТК (54/129, 42 %), а также их метастазов в лимфатических узлах (9/35, 26 %) и печени (21/92, 23 %). Hам не удалось подтвердить существование зависимости между экспрессией молекул CD44v6 и метастатическим потенциалом клеток АТК.

Заключение. Полученные результаты позволяют рассматривать Е-кадхерин как маркер прогноза, утрата экспрессии которого имеет тесную взаимосвязь с метастазированием рака толстой кишки в печень. Увеличение количества ядерного в -катенина и повешенную экспрессию ММР 2 и ММР 9 в клетках аденокарцином толстой кишки можно рассматривать как дополнительные признаки, прогнозирующие повышенный метастатический потенциал опухоли. Различные модели экспрессии этих белков в клетках аденокарцином толстой кишки должны учитываться при оценке прогноза заболевания и необходимости назначения адъювантного лечения.

СИБИРСКИЙ ОHКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРHАЛ. 2006. №3 (19)