Реорганизация межклеточных адгезионных контактов и появление миграционной активности у клеток MCF-7-SNAI1 при индукции эпителиально-мезенхимального перехода

С помощью DIC-микроскопии и конфокальной микроскопии были проанализированы изменения морфологии, миграционных характеристик и межклеточных адгезионных контактов в культуре клеток рака молочной железы MCF-7-SNAI1 при активации экспрессии транскрипционного фактора ЭМП - SNAI1. Как показал Вестерн-блот анализ, экспрессия SNAI1 достигала максимальных значений через 24 часа после переноса клеток в среду без тетрациклина и поддерживалась на этом уровне в течение семи дней. В клетках в течение семи дней сохранялась экспрессия Е-кадхерина, при этом тангенциальные межклеточные адгезионные контакты, характерные для клеток со стабильной межклеточной адгезией, замещались радиальными контактами. В радиальных контактах в течение 24-72 часов отмывки от тетрациклина продолжалась аккумуляция Е-кадхерина. В результате активации SNAI1 клетки вступали в ЭМП и приобретали миграционную активность. На двумерном субстрате клетки мигрировали как индивидуально, так и коллективно. С увеличением продолжительности отмывки от тетрациклина повышался процент клеток, мигрировавших через поры в миграционных камерах, способность клеток инвазировать эпителиальный монослой, напротив, снижалась. Полученные данные свидетельствуют о том, что сохранение гибридного эпителиально-мезенхимального фенотипа и аккумуляция Е-кадхерина в межклеточных адгезионных контактах на ранних этапах ЭМП не препятствуют разрушению стабильной межклеточной адгезии и приобретению клетками миграционной активности.