Использование клеточного счетчика для анализа морфологических характеристик и количественной оценки крахмальных гранул различных сортов картофеля (Solanum tuberosum L.)

Автор: Волков Дмитрий Игоревич, Собко Ольга Абдулалиевна, Фисенко Петр Викторович, Мацишина Наталия Валериевна, Гисюк Александр Александрович, Ким Ирина Вячеславовна, Ермак Марина Владимировна

Журнал: Овощи России @vegetables

Рубрика: Селекция, семеноводство и биотехнология растений

Статья в выпуске: 4 (66), 2022 года.

Бесплатный доступ

Актуальность. Картофельный крахмал широко используют в пищевой и текстильной промышленностях, парфюмерии, фармацевтике. Содержание крахмала и величина крахмальных гранул в картофеле (Solanum tuberosum L.) является сортовым признаком. Изучение морфологических свойств крахмала важно как для селекции новых сортов технического назначения, так и для перерабатывающей промышленности. Основной целью данной работы - дать сравнительную характеристику морфологической структуры нативного картофельного крахмала методом клеточного счетчика Countess II FL automated cellcounter. Материалы и методы. Исследования выполнены в 2020-2021 гг. на экспериментальной базе ФГБНУ «ФНЦ агрибиотехнологий Дальнего Востока им. А.К. Чайки» (Приморский край). Объектом исследований являлись 11 сортообразцов различного срока созревания. Морфологическую структуру крахмальных гранул оценивали методом анализа изображений на клеточном счетчике Countess II FL automated cell counter. Результаты. Изученные сорта, независимо от срока созревания и генетического происхождения, имели преимущественно гранулы округлой и овальной формы. Были отмечены различия в размере крахмальных гранул в зависимости от величины клубня и группы спелости. Сорта раннего срока созревания имели преимущественно размер гранул менее 20 мкм не зависимо от фракции клубней, исключение составляет сорт Queen Anne, в мелких клубнях данного сорта гранулы крахмала размером более 20 мкм составляет 67,86%. Было отмечено, что доля средних и крупных зерен возрастала в сортах с более продолжительным периодом вегетации, так сорт Августин среднеспелого срока созревания имел долю средних и крупных зерен в крупном и мелком клубне 47,72 и 41,48% соответственно. Максимальное количество гранул размером более 20 мкм отмечено у среднепоздних сортов Казачок (63,77%) и Смак (92,22%). Заключение. Метод с использованием клеточного счетчика и последующей обработкой микрофотографий гранул крахмала представляет собой доступный, экономичный, простой и эффективный подход к фенотипированию сортов и гибридов картофеля Solanum tuberosum L. по физико-химическим параметрам крахмала. Данный метод может применяться для ускоренного анализа большого числа образцов на ограниченном количестве природного материала, в том числе в полевых и хозяйственных лабораториях.

Еще

Solanum tuberosum l, картофель, сорт, крахмал, морфология, гранула, клеточный счетчик

Короткий адрес: https://sciup.org/140295685

IDR: 140295685   |   DOI: 10.18619/2072-9146-2022-4-33-39

Текст научной статьи Использование клеточного счетчика для анализа морфологических характеристик и количественной оценки крахмальных гранул различных сортов картофеля (Solanum tuberosum L.)

Крахмал – биологически важный полимер глюкозы, который синтезируется фотосинтезирующи- ми организмами [1-3]. Крахмал содержит амилозу и амилопектин. Амилопектин является основным компо- нентом крахмала, составляя 65-85% от общей массы, это большие молекулы, содержащие густо разветвленные цепи глюкозы.Молекулы амилозы небольшие по размеру и представляют собой линейные цепи глюкозы. Крахмал нерастворим в воде и осмотически неактивен, что делает его подходящей формой углеводов для длительного хранения у семян и клубней многих видов растений. Полисахарид образуется в мембраносвязанных аминопластах, которые называются крахмальными гранулами или крахмальными зернами. Каждый аминопласт обычно образует одну крахмальную гранулу,состоящую из концентрических, кристаллических и аморфных слоев [4-7]. Хотя крахмал имеет простой полимерный состав глюкозы, крахмальные зерна демонстрируют различную морфологию в зависимости от вида [7-13]. Их классифицируют как сложные и простые [14, 15]. Разница заключается в том,что сложные гранулы собираются из нескольких десятков маленьких гранул крахмала, в то время как простые зёрна представляют собой одиночную частицу из одной гранулы крахмала. Так, например, в эндосперме риса (Oryza sativa) развиваются сложные крахмальные зёрна, диаметр которых обычно составляет 10-20 ϻ. Каждая крахмальная гранула, входящая в состав сложного зерна,представляет собой остроконечный многогранник с типичным диаметром 3-8 ϻ. Крахмальные гранулы собраны в виде сложного зерна, но они не сливаются и легко разделяются с помощью обычных процедур очистки.Простые зёрна наблюдаются в нескольких важных культурах, таких как кукуруза (Z ea mays), сорго (Sorghum bicolor), ячмень (Hordeum vulgare) и пшеница (Triticum aestivum) [16]. Простые крахмальные зёрна далее классифицируются на два подтипа, называемые бимодальными и однородными. Бимодальный тип содержит маленькие и большие простые гранулы,которые сосуществуют в одних и тех же клетках. Однородный тип содержит сходные по размеру шестиугольные, пятиугольные или круглые простые гранулы. Сложные и простые гранулы наблюдаются в клубнях. Картофель (Solanum tuberosum) и китайский батат (D ioscorea batatas) синтезируют простые зёрна, в то время как сложные наблюдаются в сладком картофеле (Ipomoea batatas) и эддоке (Colocasia esculenta) [17].

Картофельный крахмал широко используется в пищевой промышленности, для технических целей в текстильной, бумажной, полиграфической промышленности и в быту [18]. Использование крахмала во многом определяется его свойствами, связанными с морфологической структурой. Структура крахмальных зерен зависит от биохимических механизмов накопления крахмала и в первую очередь определяются сортом сырья и его качеством.Размер крахмальных гранул оказывает существенное влияние на качество крахмала. Мелкие гранулы хуже набухают и, соответственно, медленнее желатинизируются, кроме того, они хуже хранятся [19].

В настоящее время приводится много работ по изучению морфологии крахмальных гранул картофеля различными микроскопическими методами,с использованием флуоресцентной, сканирующей электрон-ной,конфокальной лазерной сканирующей микроскопии и др. [20-22]. Измерение гранул крахмала с помощью светового микроскопа является предпочтительным подходом в большинстве лабораторий, поскольку это традиционный метод, позволяющий исследовать как размер, так и форму. Однако, несмотря на несомненную ценность этого метода, процесс анализа зёрен при помощи световой микроскопии по-прежнему остается трудоёмким и отчасти субъективным [23]. На данный момент селекционная и семеноводческая работа переходит на новый технологический уровень. При этом в оценке множества сортов и гибридов картофеля центральную роль играют высокоэффективные поточные методы фенотипирования с низкой себестоимостью,способные дать надежную информацию о полезных признаках растения,используя ограниченное количество материала и доступное для удаленных и полевых локаций оборудование [24]. Современная визуализирующая техника могла бы упростить методические подходы, сократив время, затрачиваемое на исследование.

Автоматический счетчик клеток Countess II FL – это настольная платформа, оснащенная современной оптикой, полной автофокусировкой и программным обеспечением для быстрого анализа клеток в суспензии. Прибор обеспечивает гибкость анализа, исследователь может выполнять подсчет клеток,контролиро-вать экспрессию флуоресцентного белка, оценивать апоптоз и измерять жизнеспособность любым удобным способом: прибор оснащен двумя каналами флуоресценции (два EVOS куба) и оптикой светлого поля [25]. Однако, для изучения морфологии крахмальных гранул он ранее не применялся, но мог бы ускорить процесс исследования.

В связи с этим целью данной работы было сравнительное изучение морфологической структуры нативного картофельного крахмала методом клеточного счетчика C ountess II F L automated cellcounter (ThermoFisherScientific, CША.).

Материалы и методы

Работа выполнена в 2020-2021 гг. в ФГБНУ «ФНЦ агробиотехнологий Дальнего Востока им. А.К. Чайки». Полевые исследования проводили на экспериментальной площадке отдела картофелеводства и овощеводства с.Пуциловка.Все изучаемые сорта картофеля выращивались в одинаковых условиях. Лабораторные опыты по изучению микроструктуры крахмальных гранул выполнены на базе лаборатории селекционно-генетических исследований полевых культур. В ходе полевого эксперимента были изучены сорта картофеля: мировой коллекции ФИЦ Всероссийский институт генетических ресурсов растений им. Н.И. Вавилова–ВИР, г. Санкт-Петербург; коллекции ФИЦ картофеля им. А.Г. Лорха, Московская обл.; сорта, полученные в ФНЦ агробиотехнологий Дальнего Востока им. А.К. Чайки. По группам спелости и содержанию крахмала (в пределах 9,34-17,2%) в клубнях была сформирована выборка из 11 сортов: Августин, Дачный, Казачок, Смак, Юбиляр (Россия), Belmonda, Labella, Laperla, Lilly, Queen Anne, Red Lady (Германия).

Метод клеточного счетчика. Для извлечения крахмала использовали ткани мякоти клубней. Клубни раз-

Рис. 1. Количественный состав суспензии крахмальных гранул сортов картофеля в электрочувствительной зоне апертуры счетного элемента клеточного счетчика (n=3, коллекционный питомник ФНЦ агробиотехнологий Дальнего Востока им. А.К. Чайки, 2021 год). Диапазон измерений размера клеток, мкм – 5–60; диапазон концентрации, клеток/мл – 1x104–1x107; время обработки, сек – 10; оптическое увеличение 2,5х

Fig. 1. Quantitative composition of starch granule suspension of potato varieties in the electrosensitive aperture zone of cell counter element (n=3, collection nursery of A.K. Chaika Federal Research Center for Agrobiotechnology of the Far East, 2021). Cell size measurement range, μm - 5-60; concentration range, cells/ml – 1x104–1x107; processing time, sec – 10; optical magnification, 2.5x

Рис. 2. Распределение крахмала в сортах картофеля. (n=3, коллекционный питомник ФНЦ агробиотехнологий Дальнего Востока им. А.К. Чайки, 2021 год). Диапазон измерений размера клеток, мкм – 5–60; диапазон концентрации, клеток/мл – 1×104–1×107; время обработки, сек – 10; оптическое увеличение 2,5х клеток Countess II FL AutomatedCellCounter (ThermoFisherScientific, США)

Fig. 2. Starch distribution in potato varieties. (n=3, collection nursery of A.K. Chaika Federal Research Center for Agrobiotechnology of the Far East, 2021). Measurement range of cell size, μm - 5-60; concentration range, cells/ml – 1x104–1x107; processing time, sec – 10; optical magnification, 2.5x (sample cell counter internal reports of Countess II FL AutomatedCellCounter (ThermoFisherScientific, USA)

ных фракций (крупная и мелкая) мыли, взвешивали (вес клубней каждой фракции фиксировался и вычислялся средний), очищали от кожуры, измельчали на универсальном измельчителе M M R 08A1 (Bosch, Германия). Из полученной массы вымывали крахмал десятикратным количеством дистиллированной воды с последующим отстаиванием и фильтрацией через бумажный фильтр при пониженном давлении. Полученный осадок высушивали, взвешивали, отбирали навеску в 2,5 грамма и разводили в 500 мл дистиллированной воды [18]. 10 мкл полученной суспензии помещали пипет-дозатором на слайд многократного применения счетчика клеток C ountess II F L AutomatedCellCounter (ThermoFisherScientific, США) и проводили измерение размеров и количества полученных форменных элементов. Диапазон измерений размера клеток, мкм – 5–60; диапазон концентрации, клеток/мл – 1x104-1x107; время обработки, сек – 10;

оптическое увеличение, х – 2,5; применение световых кубов EVOS.

Обработку микрофотографий гранул крахмала, а также минимальную статистическую обработку полученных данных проводили в программе ImageJ по В.К. Хлёсткину [24]. Для проверки достоверности полученных результатов использовали статистические программы MSExcel 2007 и Statistica 10 («StatSoft, Inc.», США), рассчитывали средние ( M ) и t 0,05 ½SEM. Полученные данные были проанализированы с помощью t-распределения Стьюдента и уточнены с помощью поправки Дункана [26] для проверки значимости различий между средними значениями.

Результаты и обсуждение

В результате проведенных исследований на клеточном счетчике, изученные нами сорта отличались по размеру крахмальных гранул в зависимости от

Таблица. Морфологическая характеристика крахмальных гранул, полученных из разных сортов картофеля Table. Morphological characteristics of starch granules obtained from different potato varieties

Сорт картофеля

Группа спелости

Масса клубня, г

Концентрация крахмала

Средний размер, мкм

Распределение гранул по размеру (%)

до 20 мкм

от

20до 50 мкм

более 50 мкм

Юбиляр

Р

178,7

0,88×107/мл

17,88 ±0.04a

68,53±0.03e

30,93

0,54±0.01b

87,0

1,80×107/мл

12,28±0.02c

72,61±0.02b

27,13

0,26±0.01f

Laperla

Р

214,5

1,31×107/мл

18,18±0.03e

61,11±0.01b

38,13

0,76±0.01h

75,3

0,71×107/мл

15,95±0.01d

53,1±0.01b

46,90

-

Red Lady

Р

217,0

1,70×107/мл

16,23±0.03b

60,28±0.02b

39,44

0,28±0.02g

79,5

1,24×107/мл

15,06±0.01c

58,75±0.02b

41,25

-

Queen Anne

Р

236,7

1,39×107/мл

17,33±0.02e

68,00±0.02b

31,50

0,50±0.02e

81,5

1,19×107/мл

21,04±0.02e

32,14±0.01b

67,60

0,26±0.01c

Labella

Р

142,3

4,19×107/мл

13,45±0.03c

80,72±0.02ab

18,58

0,70±0.01h

89,0

1,12×107/мл

16,52±0.01b

66,06±0.02a

33,52

0,42±0.02f

Belmonda

СР

254,0

3,28×107/мл

18,31±0.03cd

64,67±0.02ab

34,96

0,37±0.02b

93,7

1,14×107/мл

20,51±0.03d

56,69±0.01ab

43,00

0,31±0.02b

Lilly

СР

232,0

1,95×107/мл

14,23±0.04c

73,7,00±0.01a

26,00

0,30±0.02b

82,7

2,94×107/мл

13,73±0.03e

77,27±0.02a

22,73

-

Дачный

СРП

185,0

1,17×107/мл

16,52±0.03e

69,50±0.02a

30,40

0,10±0.01b

84,3

0,19×107/мл

10,74±0.04b

77,81±0.01a

22,19

-

Августин

СРП

207,3

1,08×107/мл

17,71±0.04c

52,27±0.02a

47,18

0,55±0.02f

69,3

2,04×107/мл

17,21±0.03e

58,52±0.01a

41,25

0,23±0.01b

Смак

СП

211,0

2,03×107/мл

19,96±0.03c

7,78±0.02a

91,36

0,86±0.01g

67,5

1,10×107/мл

19,97±0.02cd

47,99±0.01a

49,93

0,63±0.01c

Казачок

СП

233,0

0,99×107/мл

21,75±0.01e

48,11±0.01c

50,24

1,77±0.01c

101,3

1,55×107/мл

20,41±0.01cd

36,23±0.02f

63,28

0,49±0.02f

Статистическ ая обработка

Критерий Шапиро – Уилка W

0,8336

0,8664

0,9718

0,9

0,8974

0,8297

Критерий Харке-Бера JB

2,803

9,286

0,7407

8,986

9,376

28,72

p-уровень значимости

0,2462

0,009626

0,6905

0,01118

0,009204

5,787E-07

Примечание: 1) Значения в одном столбце, сопровождаемые одной и той же буквой, статистически не различаются на уровне вероятности 0,05 с помощью ANOVA, с применением теста Дункана; 2) Р – ранний, СР – среднеранний, СРП – среднеспелый, СП – среднепоздний.

величины клубня и группы спелости (рисунок 1). Масса мелких клубней варьировала от 67,5 г до 101,3 г, масса крупных клубней составляла от 159,0 г до 258,5 г. Отмечено, что крупные и мелкие клубни сортов раннего, среднего и позднего срока созревания отличались по количеству и размеру крахмальных гра-нул.В ходе эксперимента было установлено,что нет четкой зависимости между долей мелких/средних крахмальных зерен и фракцией клубней картофеля.В тоже время, независимо от срока созревания, крупные клубни изучаемых сортообразцов имели большее количество гранул диаметром более 50 мкм,в сравнении с клубнями меньшей массы того же сорта. Наибольшее количество зерен, имеющих размер более 50 мкм, отмечено в крупных клубнях сорта симо от срока созревания и генетического происхождения, имели преимущественно гранулы округлой и овальной формы (табл.).

Следует отметить, что применение метода подразумевает игнорирование так называемых «живых» (live) и «мертвых» (dead) клеток, по которым клеточный счетчик автоматически дифференцирует популяцию. В процессе исследования следует учитывать только общую концентрацию клеток в суспензии (total) (рис.3). В целом, метод клеточного счетчика является достаточно точным, удобным в сравнении с уже известными методами визуализации крахмальных зерен.

Countess II Live/Dead Report

File name: kazachok big_R.pdf Date: 09.10.2020 09:23:39 AM

Results:

Concentration

Total               9.93 x 107m.

"Tire         95% 9.48 x 107mL

Dead        5% 4.52 x 10s/mL

Рис. 3. Учет общей концентрации клеток в суспензии

(рабочее поле счетчика клеток Countess II FL AutomatedCellCounter (ThermoFisherScientific, США

Fig. 3. Accounting for the total concentration of cells in suspension (working field of the Countess II FL AutomatedCellCounter cell counter (ThermoFisherScientific, USA)

Казачок – 1,77%. Было посчитано общее количество гранул в суспензии каждого сорта, оно варьировало от 1253 до 5621 штук.

В картофельном клубне крахмал находится в виде зерен овальной, многогранной и округлой формы с правильными и неправильными контурами различной величины, которая колеблется в пределах 1–110 мкм, чаще же составляет 20–30 мкм в диаметре [27, 28] (рис.2).

В ходе исследований установлено, что сорта раннего срока созревания имели преимущественно размер гранул менее 20 мкм не зависимо от фракции клубней, исключение составляет сорт Queen Anne, в мелких клубнях данного сорта гранулы крахмала размером более 20 мкм составляет 67,86%. Было отмечено, что доля средних и крупных зерен возрастала в сортах с более продолжительным периодом вегетации, так сорт Августин среднеспелого срока созревания имел долю средних и крупных зерен в крупном и мелком клубне 47,72 и 41,48 % соответственно. Максимальное количество гранул размером более 20 мкм отмечено у среднепоздних сортов Казачок (63,77%) и Смак (92,22%). Изученные сорта, незави-

Заключение

В результате изучения микроструктуры нативного крахмала установлены значительные различия в распределении гранул по размерам.Было отмечено увеличение доли средних и крупных крахмальных гранул в сортах среднего и среднепозднего срока созрева-ния.Наибольшее количество гранул размером более 20 мкм отмечено у среднепоздних сортов Казачок (63,77%) и Смак (92,22%). Максимальная доля гранул более 50 мкм установлена в крупных клубнях сорта Казачок (1,77%).

Метод с использованием клеточного счетчика и последующей обработкой микрофотографий гранул крахмала представляет собой доступный, экономичный, простой и эффективный подход к фенотипирова-нию сортов и гибридов картофеля Solanum tuberosum L. по физико-химическим параметрам крахмала. Данный метод может применяться для ускоренного анализа большого числа образцов на ограниченном количестве природного материала, в том числе в полевых и хозяйственных лабораториях.

Об авторах:

Dmitriy I.Volkov – PhD student, Head of Potato and Vegetable Growing Department. Correspondence Author, ,

Olga A.Sobko – PhD student, Researcher of the Laboratory of Selection and GeneticResearch of Field Crops, , ,

Petr V.Fisenko – Cand. Sci. (Biology), Leading Researcher, Acting Head of laboratory of selection and genetic research of field crops, ,

Nathalia V.Matsishina – Cand. Sci. (Biology), Senior Researcher laboratory of selection and genetic research of field crops, ,

Aleksandr A.Gisyuk – Junior Researcher of of the Department of Potato and Vegetable Growing

Irina V.Kim – Cand. Sci. (Agriculture), Leading Researcher of the Department of Potato and Vegetable Growing, Marina V.Ermak – Junior Researcher of laboratory of selection and genetic research of field crops, ,

Список литературы Использование клеточного счетчика для анализа морфологических характеристик и количественной оценки крахмальных гранул различных сортов картофеля (Solanum tuberosum L.)

  • Buléon A., Colonna P., Planchot V., Ball S. Starch granules: structure and biosynthesis. Int. J. Biol. Macromol. 1998;23(2):85-112. https://doi.org/10.1016/s0141-8130(98)00040-3
  • Hancock R.D., Tarbet B.J. The other double helix - the fascinating chemistry of starch. J. Chem. Educ. 2000;77:988-992. https://doi.org/10.1021/ed077p988.
  • Nakamura Y. Towards a better understanding of the metabolic system for amylopectin biosynthesis in plants: rice endosperm as a model tissue. Plant Cell Physiol. 2002;43:718-725. https://doi.org/10.1093/pcp/pcf091.
  • James M.G., Denyer K., Myers A.M. Starch synthesis in the cereal endosperm. Curr. Opin. Plant Biol. 2003;6:215-222. https://doi.org/10.1016/S1369-5266(03)00042-6.
  • Sakamoto W., Miyagishima S.Y., Jarvis P. Chloroplast biogenesis: control of plastid development, protein import, division and inheritance. Arab. Book. 2008;6.e0110. https://doi.org/10.1199/tab.0110.
  • Fajardo D., Haynes K.G. Jansky S. Starch Characteristics of Modern and Heirloom Potato Cultivars. Am. J. Potato Res. 2013; 90: 460-469. https://doi.org/10.1007/s12230-013-9320-5.
  • Matsushima R., Maekawa M., Fujita N., Sakamoto W. A rapid, direct observation method to isolate mutants with defects in starch grain morphology in rice. Plant Cell Physiol. 2010;51:728-741. https://doi.org/10.1093/pcp/pcq040.
  • Harz C.O. Beiträge zur systematik der Gramineen. Linnaea. 1880;43(9):1- 30. 9. Tateoka T. On the systematic significance of starch grains of seeds in Poaceae. J. Jap. Bot. 1954;29:341-347.
  • Tateoka T. Further studies on starch grains of seeds in Poaceae from the view point of systematic. J. Jap. Bot. 1955;30:199-208.
  • Czaja A.T. Structure of starch grains and the classification of vascular plant families. Taxon. 1978; 7(5-6):463-470. https://doi.org/10.2307/1219895.
  • Jane J.-L., Kasemsuwan T., Leas S. et al. Anthology of starch granule morphology by scanning electron microscopy. Starch-Starke. 1994;46(4):121- 129. https://doi.org/10.1002/star.19940460402.
  • Shapter F.M., Henry R.J., Lee L.S. Endosperm and starch granule morphology in wild cereal relatives. Plant Genet. Res. 2008;6:85-97. 14. Tateoka T. Starch grains of endosperm in grass systematic. Bot. Mag. Tokyo. 1962;75(892):377-383. https://doi.org/10.15281/jplantres1887.75.377.
  • Barker N.P., Clark L.G., Davis J.I. et al. Phylogeny and subfamilial classification of the grasses (Poaceae). Ann. Missouri Bot. Garden. 2001;88(3):373-457. https://doi.org/10.2307/3298585.
  • Cabálková J., Přibyl J., Skládal P., Kulich P, Chmelík J. Size, shape and surface morphology of starch granules from Norway spruce needles revealed by transmission electron microscopy and atomic force microscopy: effects of elevated CO2 concentration. Tree Physiology. 2008;28(10):1593-1599. https://doi.org/10.1093/treephys/28.10.1593.
  • Psota V., Bohaèenko I., Hartmann J. Budinská M. ,Chmelík J. Comparison of the GFFF and LALLS methods for the measurement of starch granule size distribution in spring barley caryopses. J. Inst. Brew. 2002;108(2):200-203. https://doi.org/10.1002/j.2050-0416.2002.tb00541.x.
  • Belitz H.-D., Grosch W., Schieberle P. Food Chemistry. 4th revis. expand. ed. Leipzig: Springer-Verlag, 2009. 1070 p.
  • Pérez S., Bertoft E. The molecular structures of starch components and their contribution to the architecture of starch granules: a comprehensive review. Starch/Starke. 2010;62(8):389-420. https://doi.org/10.1002/star.201000013.
  • Sjöö M.E., Eliasson A.-C., Autio K. Comparison of Different Microscopic Methods for the Study of Starch and Other Components within Potato Cells. Food. 2009;3(Special Is. 1):39-44.
  • Jagadeesan S., Govindaraju I., Mazumder N. Insight into the Ultrastructural and Physiochemical Characterization of Potato Starch: A Review. Am. J. Potato Res. 2020;97:464-476. https://doi.org/10.1007/s12230-020-09798-w.
  • Литвяк В.В., Заболотец А.А., Симаков Е.А., Митюшкин А.В., Журавлев А.А., Костенко В.Г. Особенности морфологической структуры гранул крахмала различных сортов картофеля. Достижения науки и техники АПК. 2019;33(11):55-59. EDN: THPMQH. https://doi.org/10.24411/0235-2451-2019- 11112
  • Li X.-Q., Zhang, J. Luo S., Liu G., Murphy A., Leclerc Y., Xing T. Effects of sampling methods on starch granule size measurement of potato tubers under a light microscope. Int. J. Plant Biol. 2011;2:14-18. https://doi.org/10.4081/pb.2011.e5
  • Хлесткин В.К., Эрст Т.В. Практическое руководство по оценке морфологии гранул картофельного крахмала методом микроскопирования. Вавиловский журнал генетики и селекции. 2017.21.(6):728-734. https://doi.org/10.18699/VJ17.290
  • The new and improved Countess® II FL Automated Cell Counter. https://www.thermofisher.com/ru/ru/home/references/newsletters-and-journals/bioprobes-journal-of-cell-biology-applications/bioprobes-70/countess-iifl-automated-cell-counter.html
  • Moroney M.J. Facts from figures. 3rd ed. Harmondsworth. Middlesex: Penguin Books Ltd., 1956. 472 p.
  • Eliasson A.C. Starch in food: structure, function and application. Cambridge: Woodhead Publishing ltd, 2004. 590 p. 28. Volkov D., Kim I. Klykov A., Matsishina N. Comparative Evaluation of Different Potato Varieties for Their Suitability for Starch Processing. Lecture Notes in Networks and Systems. 2022;353:443-45
Еще
Статья научная