Использование современных ростостимулирующих экопрепаратов при микроклональном размножении брусники обыкновенной (Vaccinium vitis-idaea L.)

Автор: Чудецкий А.И., Заушинцена А.В., Родин С.А., Кузнецова И.Б., Клевцов Д.Н.

Журнал: Лесохозяйственная информация @forestry-information

Рубрика: Охрана и защита лесов

Статья в выпуске: 2, 2022 года.

Бесплатный доступ

Приведены результаты исследований по культивированию in vitro брусники обыкновенной (Vaccinium vitis-idaea L.) сортов Костромская розовая, Костромичка и Koralle с использованием питательной среды Андерсона (AN), в том числе в вариантах с разбавленным в 2 и 4 раза минеральным составом. В качестве росторегулирующих веществ использовали цитокинин 2-iP в концентрациях 1,0 и 2,0 мг/л, ауксины ИМК и ИУК в концентрациях 1,0 и 2,0 мг/л; в качестве стимуляторов роста - растворы препаратов Циркон в концентрации 0,5 мл/л и HB-101 в концентрации 0,1 мл/л. В результате исследований получены следующие данные. На этапе «собственно микроразмножение» максимальная суммарная длина побегов брусники обыкновенной (8,1-8,4 см) отмечена на питательной среде AN при концентрации цитокинина 2-iP 0,2 мг/л и добавлении стимулятора роста HB-101 0,1 мл/л. На этапе «укоренение микропобегов» максимальная суммарная длина корней брусники обыкновенной in vitro (9,6-10,8 см) зафиксирована при концентрации в питательной среде ауксина ИУК 2,0 мг/л и добавки препарата HB-101 в концентрации 0,1 мл/л. Добавление в питательную среду стимулятора роста HB-101 в концентрации 0,1 мл/л способствовало увеличению (в 1,4-1,6 раза) суммарной длины микропобегов и корней брусники.

Еще

Брусника обыкновенная, лесные ягодные растения, микроклональное размножение, in vitro, органогенез, ризогенез, ростостимулирующие вещества

Короткий адрес: https://sciup.org/143178760

IDR: 143178760   |   DOI: 10.24419/LHI.2304-3083.2022.2.05

Текст научной статьи Использование современных ростостимулирующих экопрепаратов при микроклональном размножении брусники обыкновенной (Vaccinium vitis-idaea L.)

В о всем мире возрастает спрос на продукцию лесных ягодных растений, обладающих высокой пищевой и лекарственной ценностью. Однако в связи с повышением антропогенной нагрузки на экосистемы и ухудшением экологической обстановки в мире в настоящее время наблюдается тенденция интенсивного сокращения естественных запасов ягодников. Выращивание и переработка хозяйственно ценных лесных ягодных растений приобретают еще большую актуальность при организации многоцелевого, рационального и неистощительного использования лесов [1].

На торфяных залежах верхового и переходного типов до их разработки нередко произрастают дикорастущие ягодники, ценные в пищевом и лекарственном отношении (брусника, клюква, голубика и др.) [2–4]. Для центральной зоны европейской части России (преимущественно в Нечерноземье) решение проблемы рекультивации земель, вышедших из-под торфодобычи, и дальнейшего их использования имеет важное природоохранное и народнохозяйственное значение. В России, а также в странах ближнего и дальнего зарубежья имеется опыт создания плантаций хозяйственно ценных лесных ягодных растений на выработанных торфяниках, который, помимо целей рекультивации, в значительной мере будет способствовать восстановлению запасов ягодников [5, 6].

C 1980-х гг. сотрудники Костромской лесной опытной станции ВНИИЛМ проводили исследования по культивированию брусники на выработанных торфяных месторождениях, доказавшие перспективность работ в данном направлении. Однако большинство сортов брусники зарубежной селекции по ряду важнейших признаков не подходит для выращивания в условиях таежной зоны европейской части России. В связи с этим возникла необходимость создания высокопродуктивных гибридов и сортов брусники, соответствующих природно-климатическим условиям региона, в которых их выращивают. По итогам многолетней работы в 1990-е гг. были выведены три первых российских сорта брусники обыкновенной ( Vaccinium vitis-idaea L.) – Костромская розовая, Костромичка и Рубин [6, 7].

Для получения большого количества вы-сокачественного и оздоровленного сортового посадочного материала лесных ягодных растений при создании плантаций в короткие сроки целесообразно использовать метод микрокло-нального размножения [8–10]. Выращиванием брусники в культуре in vitro в течение нескольких десятилетий занимались многие ученые в мире, в том числе на территории России и стран СНГ. Однако в настоящее время технологии микроклонирования зимостойких и крупноплодных российских сортов, адаптированных к условиям выращивания, нуждаются в совершенствовании. При этом для экономии затрат на компоненты минеральной основы питательной среды, регуляторы роста, адаптогены и т.д., ввиду их высокой себестоимости, и с целью повышения эффективности размножения целесообразно применять ростостимулирующие препараты универсального назначения. Сейчас разработан ряд современных экопрепаратов, эффективно выполняющих свои функции на разных этапах микроклонального размножения.

Цель исследований – изучить влияние состава питательной среды Андерсона и современных экопрепаратов на процессы образования микропобегов и корней брусники обыкновенной in vitro .

Объекты и методика исследований

Исследования по микроклональному размножению растений проводили в 2019–2021 гг. на базе Центрально-европейской лесной опытной станции ВНИИЛМ по общепринятым методикам [10]. В качестве объектов исследования использовали растения-регенеранты брусники обыкновенной сортов российской (Костромская розовая, Костромичка) и зарубежной (Koralle) селекции. Растения-регенеранты брусники культивировали на питательной среде Андерсона (AN) [11], в том числе в вариантах с уменьшенным в 2 (AN 1/2) и 4 (AN 1/4) раза содержанием микро-и макросолей, в условиях световой комнаты при фотопериоде 16 ч света и 8 ч темноты, температуре 23…25 °C, влажности 75–80 %.

В качестве росторегулирующих веществ на этапе «собственно микроразмножение» использовали 2-изопенталаденин (2-iP) в концентрациях 1,0 и 2,0 мг/л, на этапе укоренения микропобегов – индолилмасляную (ИМК) и ин-долилуксусную (ИУК) кислоты в концентрациях 1,0 и 2,0 мл/л. На обоих этапах микроклональ-ного размножения добавляли ростостимулирующие экопрепараты – Циркон в концентрации 0,5 мл/л и HB-101 в концентрации 0,1 мл/л.

Циркон (действующее вещество – смесь ги-дроксикоричных кислот) – многофункциональный экологически безопасный биостимулятор негормонального происхождения (из экстракта эхинацеи пурпурной), регулирующий и ускоряющий процессы цветения, роста, корнеобразо-вания и плодоношения растений. Использование препарата способствует более быстрому созреванию плодов, повышению их сохранности, количества, урожайности (примерно на 50 %) [12].

HB-101 – разработанный в Японии экологически чистый, нетоксичный стимулятор роста и активатор иммунной системы для культивирования всех видов растений на основе экстракта из хвои гималайского кедра, кипариса, сосны, коры платана и листьев подорожника. Препарат также является многокомпонентным микроудобрением и регулятором физиологических процессов в тканях растений, не нуждается в специальных условиях хранения и имеет неограниченный срок годности. Препарат способствует улучшению цвета и формы листьев и плодов, повышению их питательной ценности, вкусовых качеств и содержания сахаров и витамина C, а также значительному увеличению урожайности и сохранности урожая [13].

В качестве контрольного использовали вариант без добавления ростостимулирующих препаратов. Повторность опыта – 10-кратная, по 30 растений в каждой.

Для статистической обработки экспериментальных данных использовали программы Microsoft Office Excel 2016 и AGROS v.2.11. Оценку достоверности результатов проводили с помощью наименьшей существенной разности на 5 %-м уровне значимости (НСР05) [14].

Применяли трехфакторный дисперсионный анализ, где: фактор A – состав питательной среды; фактор B – концентрация росторегулирующего вещества (цитокинина или ауксина); C – добавление экопрепарата.

Результаты и обсуждение

В ходе проведенных исследований выявлено, что на этапе «собственно микроразмножение» количество микропобегов у растений-регенерантов брусники обыкновенной на питательной среде AN было незначительно больше, чем на средах AN 1/2 и AN 1/4, и варьировало у исследуемых сортов при концентрации 2-iP 2,0 мг/л от 3,3 до 3,9 шт., при концентрации 1,0 мг/л – от 2,2 до 2,6 шт. (табл. 1). Повышение концентрации цитокинина 2-iP от 1,0 до 2,0 мг/л на питательной среде AN способствовало существенному увеличению количества микропобегов только у сортов Костромичка (в среднем от 2,6 до 3,8 шт.) и Koralle (от 2,2 до 3,9 шт.). У растений-регенерантов сорта Костромская розовая на всех питательных средах различия по этому показателю были статистически незначимы.

Количество микропобегов у исследуемых сортов брусники обыкновенной в вариантах с добавлением в питательные среды препаратов HB-101 в концентрации 0,1 мл/л и Циркон в концентрации 0,5 мл/л было незначительно больше, чем в контроле, и составляло в среднем 3,0–3,3 шт. и 2,7–2,9 шт. соответственно.

Средняя длина микропобегов брусники обыкновенной in vitro не имела статистически значимых различий в зависимости от состава питательной среды и концентрации цитокинина 2-iP (в среднем – от 1,2 до 2,7 см), а также от добавления в питательную среду стимуляторов роста: в контрольном варианте показатель составлял в среднем 1,4–1,7 см; при добавлении Циркона 0,5 мл/л – 1,6–2,0 см; при добавлении HB-101 0,1 мл/л – 1,7–2,1 см.

Суммарная длина микропобегов брусники обыкновенной in vitro была значительно больше в вариантах с питательной средой AN и варьировала у исследуемых сортов в среднем

Таблица 1. Количество микропобегов брусники обыкновенной in vitro в зависимости от питательной среды, концентрации цитокинина 2-iP и добавления стимуляторов роста

Питательная среда

Концентрация 2-iP,

Количество

побегов, шт.

мг/л

Контроль

Циркон 0,5 мл/л

HB-101 0,1 мл/л

Среднее

Костромская розовая

AN

1,0

2,3

2,5

2,8

2,5

2,0

3,0

3,3

3,5

3,3

AN 1/2

1,0

2,0

2,6

3,2

2,6

2,0

2,9

3,0

3,6

3,2

AN 1/4

1,0

1,7

2,2

3,0

2,3

2,0

2,1

2,5

2,9

2,5

Среднее

2,3

2,7

3,2

-

НСР05 фактор А = 1,67, фактор В = 1,08, фактор С = 1,02, общ. = 1,98

Костромичка

AN

1,0

2,5

2,6

2,6

2,6

2,0

3,4

3,8

4,1

3,8

AN 1/2

1,0

2,1

2,5

3,0

2,5

2,0

3,1

3,4

3,8

3,4

AN 1/4

1,0

1,8

2,3

2,9

2,3

2,0

2,3

2,9

3,2

2,8

Среднее

2,5

2,9

3,3

-

НСР05 фактор А = 1,86, фактор В = 1,15, фактор С = 1,79, общ. = 1,90

Koralle

AN 1,0 2,2 2,3 2,0 2,2 2,0 3,4 3,9 4,5 3,9 AN 1/2 1,0 1,8 2,0 2,2 2,0 2,0 2,8 3,3 3,6 3,2 AN 1/4 1,0 1,5 2,2 2,7 2,1 2,0 1,9 2,4 2,8 2,4 Среднее 2,3 2,7 3,0 - НСР05 фактор А = 1,74, фактор В = 1,28, фактор С = 1,52, общ. = 1,82 при концентрации 2-iP 2,0 мг/л от 6,8 до 7,4 см, при концентрации 1,0 мг/л – от 5,1 до 6,8 см (табл. 2).

При одинаковых концентрациях цитокинина 2-iP в питательных средах существенных различий по суммарной длине микропобегов брусники не выявлено (рисунок).

Добавление в питательные среды стимулятора роста HB-101 в концентрации 0,1 мл/л способствовало существенному увеличению (в 1,4–1,6 раза) суммарной длины микропобегов брусники по сравнению с контрольным вариантом. Наибольших значений (8,1–8,4 см) этот показатель достигал на питательной среде AN при концентрации цитокинина 2-iP 2,0 мг/л и добавлении стимулятора роста HB-101 0,1 мл/л.

На этапе «укоренение микропобегов» исследования продолжали на среде AN. При этом максимальное количество корней брусники обыкновенной in vitro отмечалось в вариантах с ауксином ИУК в концентрации 2,0 мг/л и варьировало у исследуемых сортов от 1,9 до 2,7 шт., в то время как при концентрации 1,0 мг/л – от 1,1 до 1,6 шт. (табл. 3).

Таблица 2. Суммарная длина микропобегов брусники обыкновенной in vitro в зависимости от питательной среды, концентрации цитокинина 2-iP и добавления стимуляторов роста

Питательная среда

Концентрация 2-iP,

Суммарная длина побегов, см

мг/л

Контроль

Циркон 0,5 мл/л

HB-101 0,1 мл/л

Среднее

Костромская розовая

AN

1,0

5,1

7,0

8,4

6,8

2,0

6,0

7,3

8,4

7,2

AN 1/2

1,0

4,2

6,0

8,0

6,1

2,0

4,7

4,8

6,1

5,2

AN 1/4

1,0

3,1

3,5

4,5

3,7

2,0

2,5

3,5

4,9

3,6

Среднее

4,3

5,3

6,7

-

НСР05 фактор А = 1,47, фактор В = 2,10, фактор С = 1,89, общ. = 3,22

Костромичка

AN

1,0

5,8

6,5

7,3

6,5

2,0

6,8

7,2

8,2

7,4

AN 1/2

1,0

4,2

5,5

7,8

5,8

2,0

4,7

5,8

6,8

5,8

AN 1/4

1,0

2,7

3,2

4,3

3,4

2,0

3,0

4,1

4,5

3,9

Среднее

4,5

5,4

6,5

-

НСР05 фактор А = 1,32, фактор В = 1,96, фактор С = 1,74, общ. = 3,12

Koralle

AN

1,0

4,4

5,5

5,4

5,1

2,0

5,4

7,0

8,1

6,8

AN 1/2

1,0

2,7

3,2

3,1

3,0

2,0

3,6

4,6

5,8

4,6

AN 1/4

1,0

1,8

3,3

4,1

3,1

2,0

1,9

2,9

3,6

2,8

Среднее

3,3

4,4

5,0

-

НСР05 фактор А = 1,10, фактор В = 1,87, фактор С =1,69, общ. = 2,96

При добавлении в питательную среду AN стимуляторов роста количество корней брусники обыкновенной незначительно увеличилось по сравнению с контролем и составило у исследуемых сортов в среднем: в вариантах с препаратом Циркон 0,5 мл/л – 1,6–1,7 шт., с препаратом HB-101 0,1 мл/л – 1,8–1,9 шт.

Средняя длина корней брусники обыкновенной in vitro была существенно больше при использовании ауксина ИУК в концентрации 2,0 мг/л и составляла в среднем у сортов: Костромская розовая – 3,4 см, Костромичка – 3,2 см, Koralle – 2,8 см.

В вариантах с добавлением в питательную среду AN стимуляторов роста средняя длина корней незначительно превышала контроль (табл. 4).

Суммарная длина корней брусники обыкновенной in vitro была существенно больше в вариантах с ауксином ИУК в концентрации 2,0 мг/л и достигала в среднем у сортов: Костромская розовая – 8,3 см, Костромичка – 8,2 см, Koralle – 7,6 см (табл. 5).

Наличие в питательной среде AN препарата HB-101 в концентрации 0,1 мл/л способствовало существенному увеличению суммарной длины

Растения-регенеранты брусники обыкновенной in vitro с добавлением 2-iP в концентрациях 1,0 мг/л ( 1 ) и 2,0 мг/л ( 2 ) на питательных средах:

а – AN; б – AN 1/2; в – AN 1/4

Таблица 3. Количество корней брусники обыкновенной in vitro на питательной среде AN в зависимости концентрации ауксинов и добавления стимуляторов роста

Ауксин

Концентрация

Количество корней, шт.

ауксина, мг/л

Контроль

Циркон 0,5 мл/л

HB-101 0,1 мл/л

Среднее

Костромская розовая

ИМК

1,0

1,3

1,6

1,8

1,6

2,0

1,1

1,4

1,4

1,3

ИУК

1,0

1,0

1,2

1,3

1,2

2,0

2,0

2,4

2,7

2,4

Среднее

1,3

1,6

1,8

-

НСР05 фактор А = 1,32, фактор В = 1,18, фактор С = 1,24, общ. = 1,85

Костромичка

ИМК

1,0

1,2

1,4

1,3

1,3

2,0

1,3

1,5

1,4

1,4

ИУК

1,0

1,2

1,5

1,7

1,1

2,0

2,3

2,5

2,8

1,9

Среднее

1,5

1,7

1,8

-

НСР05 фактор А = 1,40, фактор В = 1,21, фактор С = 1,17, общ. = 1,39

Koralle

ИМК

1,0

1,3

1,4

1,5

1,4

2,0

1,5

1,3

1,2

1,3

ИУК

1,0

1,4

1,6

1,7

1,6

2,0

2,4

2,6

3,0

2,7

Среднее

1,6

1,7

1,9

-

НСР05 фактор А = 1,62, фактор В = 1,34, фактор С = 1,27, общ. = 1,72

Таблица 4. Средняя длина корней брусники обыкновенной in vitro на питательной среде AN в зависимости концентрации ауксинов и добавления стимуляторов роста

Ауксин

Концентрация

Средняя длина корней, см

ауксина, мг/л

Контроль

Циркон 0,5 мл/л

HB-101 0,1 мл/л

Среднее

Костромская розовая

ИМК

1,0

1,0

1,1

0,8

1,0

2,0

1,5

1,4

1,5

1,5

ИУК

1,0

1,4

1,6

1,5

1,5

2,0

2,8

3,5

4,0

3,4

Среднее

1,7

1,9

2,0

-

НСР05 фактор А = 1,72, фактор В = 1,54, фактор С = 1,60, общ. = 1,80

Костромичка

ИМК

1,0

1,1

1,3

1,2

1,2

2,0

1,7

1,8

1,6

1,7

ИУК

1,0

1,3

1,5

1,7

1,5

2,0

2,5

3,3

3,8

3,2

Среднее

1,6

2,0

2,1

-

НСР05 фактор А = 1,81 фактор В = 1,52, фактор С = 1,64, общ. = 1,94

Koralle

ИМК

1,0

1,0

1,2

1,4

1,2

2,0

1,5

1,3

1,6

1,5

ИУК

1,0

1,2

1,4

1,5

1,4

2,0

2,4

2,9

3,2

2,8

Среднее

1,5

1,7

1,9

-

НСР05 фактор А = 1,69, фактор В = 1,45, фактор С = 1,34, общ. = 1,79

Таблица 5. Суммарная длина корней брусники обыкновенной in vitro на питательной среде AN в зависимости концентрации ауксинов и добавления стимуляторов роста

Ауксин

Концентрация

Суммарная длина корней, см

ауксина, мг/л

Контроль

Циркон 0,5 мл/л

HB-101 0,1 мл/л

Среднее

Костромская розовая

ИМК

1,0

1,3

1,8

1,4

1,5

2,0

1,7

2,0

2,1

1,9

ИУК

1,0

1,4

1,9

1,9

1,7

2,0

5,7

8,4

10,8

8,3

Среднее

2,5

3,5

4,1

-

НСР05 фактор А = 1,74, фактор В = 1,33, фактор С = 1,10, общ. = 2,96

Костромичка

ИМК

1,0

1,4

1,8

1,6

1,6

2,0

2,3

2,7

2,2

2,4

ИУК

1,0

1,6

2,3

2,9

2,3

2,0

5,8

8,2

10,6

8,2

Среднее

2,8

3,7

4,3

-

НСР05 фактор А = 1,61, фактор В = 1,28, фактор С = 1,03, общ. = 2,92

Окончание табл. 5

Ауксин

Концентрация

Суммарная длина корней, см

ауксина, мг/л

Контроль

Циркон 0,5 мл/л

HB-101 0,1 мл/л

Среднее

Koralle

ИМК 1,0 1,3 1,7 2,1 1,7 2,0 2,4 1,7 1,9 2,0 ИУК 1,0 1,7 2,2 2,5 2,1 2,0 5,8 7,5 9,6 7,6 Среднее 2,8 3,3 4,0 - НСР05 фактор А = 1,75, фактор В = 1,44, фактор С = 1,08, общ. = 2,76 корней брусники обыкновенной исследуемых сортов (до 4,0–4,3 см) по сравнению с контролем (2,5–2,8 см). При этом наибольших значений суммарная длина корней достигала при концентрации в питательной среде ауксина ИУК 2,0 мг/л с добавлением препарата HB-101 в концентрации 0,1 мл/л ((см. табл. 5). Существенных различий в суммарной длине корней растений между сортами не выявлено.

Можно предположить, что увеличение количества и длины микропобегов и корней брусники обыкновенной in vitro обусловлено тем, что действующие вещества, входящие в состав препаратов Циркон и HB-101, усиливают действие цитокининов и ауксинов на разных этапах микроклональ-ного размножения. Таким образом, совместное применение этих препаратов с росторегулирующими веществами цитокининовой и ауксиновой групп является элементом совершенствования технологии микроклонирования брусники.

Выводы

В результате исследований установлено, что на этапе «собственно микроразмножение»

в вариантах с питательной средой AN суммарная длина микропобегов брусники обыкновенной in vitro была больше, чем в вариантах с AN 1/2 и AN 1/4. Зафиксировано положительное влияние стимулятора роста HB-101 в концентрации 0,1 мл/л на суммарную длину микропобегов брусники обыкновенной. Максимальная суммарная длина побегов брусники обыкновенной отмечена на питательной среде AN при совместном применении цитокинина 2-iP в концентрации 0,2 мг/л и стимулятора роста HB-101 в концентрации 0,1 мл/л.

На этапе «укоренение микропобегов» суммарная длина корней брусники обыкновенной in vitro на питательной среде AN была существенно больше в вариантах с ауксином ИУК в концентрации 2,0 мг/л, а также при наличии в питательной среде препарата HB-101 в концентрации 0,1 мл/л. При их совместном применении суммарная длина побегов достигала максимальных значений. Полученные результаты указывают на эффективность использования HB-101 на различных этапах микроклонального размножения брусники обыкновенной зимостойких и крупноплодных сортов российской селекции.

Список литературы Использование современных ростостимулирующих экопрепаратов при микроклональном размножении брусники обыкновенной (Vaccinium vitis-idaea L.)

  • Проблемы использования и воспроизводства фитогенных пищевых и лекарственных ресурсов леса на землях лесного фонда Костромской области / С.С. Макаров, Е.С. Багаев, С.Ю. Цареградская, И.Б. Кузнецова // Лесной журнал. - 2019. - № 6. - С. 118-131.
  • Торф, торфяные почвы, удобрения / Н.Г. Ковалев, А.И. Поздняков, Д.А. Мусекаев, Л.А. Позднякова. - М., 1998. - 240 с.
  • Торфяные болота России: к анализу отраслевой информации. - М. : Геос, 2001. - 190 с.
  • Выработанные торфяные месторождения, их характеристика и функционирование / Л.И. Инишева, В.Е. Аристархова, Е.В. Порохина, А.Ф. Боровкова. - Томск : изд-во ТГПУ, 2007. - 185 с.
  • Основные направления действий по сохранению и рациональному использованию торфяных болот России. - М., 2003. - 24 с.
  • Тяк, Г.В. Создание на выработанных торфяниках посадок лесных ягодных растений как метод их биологической рекультивации / Г.В. Тяк, Л.Е. Курлович // Проблемы рационального использования природных ресурсов и устойчивое развитие Полесья : сб. докл. Междунар. науч. конф. (Минск, 14-17 сентября 2016 г.). - Минск : Белоруская навука, 2016. - Т. 2. - С. 351-353.
  • Тяк, Г.В. Опыт выращивания брусники в условиях Костромской области / Г.В. Тяк, А.Ф. Черкасов, С.А. Алтухова // Вопросы использования и восстановления древесных и недревесных ресурсов леса южной тайги. - М. : ВНИИЛМ, 1998. - С. 50-63.
  • Бутенко, Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе / Р.Г. Бутенко. - М. : ФБК-Пресс, 1999. - 160 с.
  • Сельскохозяйственная биотехнология и биоинженерия : учеб. ; изд. 4-е, перераб. и доп. / под. ред. В.С. Шевелухи. — М. : URSS, 2015. - 715 с.
  • Калашникова, Е.А. Клеточная инженерия растений : учеб. и практикум для вузов / Е.А. Калашникова. -М. : Юрайт, 2020. - 333 с.
  • Anderson, W.C. Propagation of Rhododendrons by Tissue Culture. 1. Development of a Culture Medium for Multiplication of Shoots / W.C. Anderson // Proc. Int. Plant Prop. Soc. - 1975. - Vol. 25. - P. 129-135.
  • Государственный каталог пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации (по сост. на 08.02.2021 г.). - М., 2021. - 803 с.
  • Доспехов, Б.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований) : учеб. - изд. 6-е / Б.А. Доспехов. - М. : Альянс, 2011. - 350 с.
Еще
Статья научная