Исследование биопленок микобактерий при воздействии йодсодержащего препарата

В статье представлены данные по изучению мор-фологических и денситометрических особенностей формирования микобактериями биопленок до и после воздействия йодсодержащего препарата «Йодлукман». В опытах использовали культуры микроорганизмов Mycobacterium B5, которые культивировали на среде Левенштейна-Йенсена при 37 ºС. Формирование био-пленок микобактерий исследовали до и после воздейст-вия препарата «Йодлукман». Оптическую плотность жидкости определяли в фотометрическом анализато-ре. В лунки вносили по 200 мкл культур микроорганиз-мов и культивировали 24 ч при 37 0С. В каждую лунку вносили по 200 мкл 0,1 %-го раствора кристаллвиоле-та. Через 20 мин лунки трижды промывали буферным раствором, подсушивали и фиксировали в течение 30 мин 200 мкл 95° этилового спирта. Для изучения этапов формирования биопленок применяли способ культивирования бактерий в МПБ. Для контроля роста и развития бактерий использовали окраску 1,0 %-м вод- ным раствором метиленового синего. Наряду с обще- принятым методом применяли фиксацию парами 25,0 %-го раствора глутарового альдегида в течение 3-5 ч, контрастирование препаратов проводили парами 2,0-4,0 %-го водного раствора осмиевой кислоты (OsO4) в течение 2-3 мин. При исследовании биопленок микобактерий выявляли этапы: седиментация; фикса-ция; коаггрегация, рост микроколоний; формирование кластеров и архитектоники биопленки; дисперсия. Воз-действие препарата «Йодлукман» в концентрации 2,5 %, при расходе рабочего раствора 250 мл/м² и экспо-зиции не менее 3 ч полностью обеззараживало поверх-ности тест-объектов, которые были эксперименталь- но контаминированы микобактериями. Происходило разрушение межклеточного матрикса, целостность клеток, находившихся под биопленкой, нарушалась, что сопровождалось увеличением светопреломления и сни-жением оптической плотности. Для обеззараживания поверхностей тест-объектов, контаминированных микобактериями, установлена эффективность дезин-фицирующего препарата «Йодлукман», представляю-щего собой комплекс йода кристаллического и полимер-ного поверхностно-активного компонента.