Исследование гепатопротекторного действия биомассы спирулины и шрота косточек граната

Тархова Марина Олеговна, главный технолог Дубищев Алексей Владимирович, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой фармакологии удовлетворяет в полной мере [5, 11]. В настоящее время особый интерес представляют гепато-протекторы растительного происхождения. В связи с этим цель нашего исследования состояла в изучении гепатопротекторного действия биомассы спирулины, шрота косточек граната и их композиции в соотношении 1:1.

Для воспроизведения токсического поражения печени нами был выбран четыреххлористый углерод. Его введение в организм вызывает повреждение печени. При хроническом отравлении наблюдается увеличение печени и повышение уровня аминотрансфераз и ПОЛ. Поэтому нами было проведено введение четыреххлористого углерода крысам в виде масляного раствора в дозе 2,0 г/кг веса животного [8]. Для растворения четыреххлористого углерода использовалось абрикосовое масло, 50% масляный раствор четыреххлористого углерода вводился крысам внутримышечно ежедневно в течение 6-ти дней. Исследование гепатопротекторного действия биомассы спирулины и шрота косточек граната и их композиции осуществляли на 80 белых лабораторных крысах-самцах массой 240-260 г. В эксперименте участвовали половозрелые крысы одного месяца рождения с целью свести к минимуму возрастные различия ферментов. Крыс содержали в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и пище. Животные были разбиты на 8 групп, по 10 крыс в каждой (табл. 1).

Все группы животных были вовлечены в эксперимент одновременно, что исключает влияние внешних температурных, климатических и иных факторов на разницу активности ферментов у опытных и контрольных групп. Все образцы вводили однократно в желудок с помощью зонда в виде суспензии, приготовленной на воде очищенной в дозе 10 мг/100г массы животного, объемом 1 мл ежедневно в течение 6 дней параллельно с введением четыреххлористого углерода. Выбор доз обусловлен литературными данными [8]. На седьмой день крысы забивались в соответствии с этическими нормами под эфирным наркозом, методом декапитации, затем проводили извлечение печени. После извлечения печень промывали физиологическим раствором и сразу замораживали. Гомогенат из печени готовился механическим измельчением ткани печени массой 1 г с 9 мл трис-буфера (рН 7,4), со скоростью 5000

об/мин в сосуде с двойными стенками, постоянно охлаждаемым проточной водой [10]. Для проведения анализа токсического поражения нами исследовались следующие показатели: масса печени, активность каталазы, активность аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы, а также количество малонового диальдегида (МДА). Определение вышеуказанных параметров проводили по стандартным методикам [7]. Данные изучаемых нами показателей поражения представлены в таблицах.

Таблица 1. Группы экспериментальных животных

При исследовании токсического влияния четыреххлористого углерода и гепатопротекторного действия микроводоросли спирулины платенсис и шрота граната, а также их комбинации установлено, что в группах, вводимым яд, печень значительно увеличилась (табл. 2). Также нами исследовалось влияние вышеуказанных образцов на активность каталазы в крови опытных крыс

(табл. 3). В контрольной группе крыс, которой вводили четыреххлористый углерод, произошло увеличение массы печени относительно контроля на 48,62%, при этом в группе животных, принимавших помимо четыреххлористого углерода суспензию биомассы спирулины, печень увеличилась на 22,18%, суспензию гранатового шрота -на 29,95%, а композицию 30,08%.

Таблица 2. Изменение массы печени опытных крыс (г)

Примечание: в этой и всех последующих таблицах, различия достоверны при Р<0,05 1 - по сравнению с показателями животных контрольной группы, принимавшей четыреххлористый углерод

Таблица 3. Активность каталазы в крови опытных крыс (мкат/л)

Таким образом, в группе крыс, принимавшей воду очищенную на фоне введения четыреххлористого углерода, наблюдалось увеличение уровня активности каталазы на 239,24% относительно контроля, в группе, принимавшей помимо четыреххлористого углерода суспензию биомассы спирулины, активность каталазы возросла на 129,63%, суспензию гранатового шрота - на 254,84%, а композицию — на 199,22%. Была отмечена также тенденция к увеличению активности аспартатаминотрансферазы (табл. 4) и аланинаминотрансферазы (табл. 5) в тканях печени. Активность аспартатаминотрансферазы в группе крыс, принимавших только четыреххлористый углерод, возросла примерно в 7 раз, суспензию биомассы спирулины и четыреххлористый углерод — примерно в 4 раза, суспензию гранатового шрота и четыреххлористый углерод — примерно в 5,5 раз, а композицию и четыреххлористый углерод — в 5 раза. В группе крыс, принимавшей воду очищенную, вводимый четыреххлористый углерод активность аланинаминотрансферазы возросла на 43,11%, в группе, принимавшей помимо яда, суспензию биомассы спирулины - на 18,73%, суспензию шрота граната — на 50,00%, а композицию - на 23,37%. Также отмечается тенденция к возрастанию концентрации малонового диальдегида (табл. 6). В группе крыс, принимавшей воду очищенную, вводимый четыреххлористый углерод концентрация малонового диальдегида возросла на 91,01%, в группе, принимавшей помимо яда, суспензию биомассы спирулины -на 34,13%, суспензию шрота граната - на 120,63%, а композиции — на 45,50%.

Вывод: экспериментально доказано, что биомасса спирулины обладает выраженным гепато-протекторным действием, шрот косточек граната гепатопротектором не является, а композиция на основе указанных выше растительных объектов усугубляет действие четыреххлористого углерода на ткани печени.

Таблица 4. Активность аспартатаминотрансферазы в печени крыс (мкмоль/с-л)

Таблица 5. Активность аланинаминтрансферазы в печени крыс (мкмоль/с-л)

Таблица 6. Концентрация малонового диальдегида в печени крыс (мкмоль/л)