Исследование эффективности облучения культур опухолевых клеток ионами углерода
Автор: Липенгольц А.А., Хохлов В.Ф., Ижевский П.В., Кулаков В.Н., Шейно И.Н., Голубев А.А., Фертман А.Д., Лукьяшин В.Е., Марков Н.В., Григорьева Е.Ю., Колдаева Е.Ю., Лукашина М.И., Найденов М.Г.
Журнал: Сибирский онкологический журнал @siboncoj
Рубрика: Материалы конференции
Статья в выпуске: S2, 2009 года.
Бесплатный доступ
Короткий адрес: https://sciup.org/14055415
IDR: 14055415
Текст статьи Исследование эффективности облучения культур опухолевых клеток ионами углерода
Материал и методы. Контрольные и исследуемые образцы клеточной линии меланомы B16F10 засевали в полной среде в 6 луночные планшеты и подсчитывали количество колоний на 3, 5, 7 и 15 дни, с использованием инвертированного микроскопа ЛОМО (Россия) при увеличении х10. За колонию принимали группу не менее чем 20 живых клеток одинаковой морфологии, расположенных в непосредственном контакте друг с другом. Использовали следующую среду для культивирования: 500 мл RPMI1640 с 10% содержанием термически инактивированной (+56оС 30 мин. на водяной бане) телячьей эмбриональной сыворотки, L-глутамином 4 мМ, гентамицином (из 1000х стока до 1х концентрации), HEPES-Na 1мМ в итоговом объеме.
Для оценки действия радиации использовали МТТ-тест выживаемости клеток (Mosmann T.,
1983). Тест характеризует интенсивность окислительно-восстановительных процессов в клетках культуры и является косвенной характеристикой активной биомассы.
Результаты. Клетки облучали ионами С14 в дозах, эквивалентных 10 и 20 Гр, в двух положениях: «на входе» и «на пике Брэгга». После облучения клетки снимали с пластика и проводили оценку количества погибших клеток рутинным методом по включению трипанового синего. В первые часы после облучения разницы между контрольными и экспериментальными образцами по выживаемости не обнаружено отличий, в том числе в образцах, облученных «на входе» и «на пике Брэгга». Для оценки жизнеспособности опухолевых клеток после облучения проведена сравнительная оценка способности клеток образовывать колонии в зависимости от полученной дозы. Оценка количества колоний на 12–15-й дни после облучения показала достоверную разницу (p<0,05) между количеством образовавшихся колоний в подгруппах. Облучение клеток в дозе, эквивалентной 20 Гр «на входе» , вероят- но, вызвало стимуляцию пролиферации клеток, а, следовательно, и колониеобразования. Этот эффект может быть связан с неравномерностью облучения поверхности, занимаемой клетками.
Выводы. Эксперимент на культурах опухолевых клеток показал перспективность использования ускорителя ионов углерода для разработки новых методов лучевой терапии.
