Исследование эффективности облучения культур опухолевых клеток ионами углерода

Липенгольц А.А. Хохлов В.Ф. Ижевский П.В. Кулаков В.Н. Шейно И.Н. Голубев А.А. Фертман А.Д. Лукьяшин В.Е. Марков Н.В. Григорьева Е.Ю. Колдаева Е.Ю. Лукашина М.И. Найденов М.Г.

Журнал: Сибирский онкологический журнал @siboncoj

Рубрика: Материалы конференции

Статья в выпуске: S2, 2009 года.

Бесплатный доступ

Короткий адрес: https://sciup.org/14055415

IDS: 14055415

Текст статьи Исследование эффективности облучения культур опухолевых клеток ионами углерода

Материал и методы. Контрольные и исследуемые образцы клеточной линии меланомы B16F10 засевали в полной среде в 6 луночные планшеты и подсчитывали количество колоний на 3, 5, 7 и 15 дни, с использованием инвертированного микроскопа ЛОМО (Россия) при увеличении х10. За колонию принимали группу не менее чем 20 живых клеток одинаковой морфологии, расположенных в непосредственном контакте друг с другом. Использовали следующую среду для культивирования: 500 мл RPMI1640 с 10% содержанием термически инактивированной (+56оС 30 мин. на водяной бане) телячьей эмбриональной сыворотки, L-глутамином 4 мМ, гентамицином (из 1000х стока до 1х концентрации), HEPES-Na 1мМ в итоговом объеме.

Для оценки действия радиации использовали МТТ-тест выживаемости клеток (Mosmann T.,

1983). Тест характеризует интенсивность окислительно-восстановительных процессов в клетках культуры и является косвенной характеристикой активной биомассы.

Результаты. Клетки облучали ионами С14 в дозах, эквивалентных 10 и 20 Гр, в двух положениях: «на входе» и «на пике Брэгга». После облучения клетки снимали с пластика и проводили оценку количества погибших клеток рутинным методом по включению трипанового синего. В первые часы после облучения разницы между контрольными и экспериментальными образцами по выживаемости не обнаружено отличий, в том числе в образцах, облученных «на входе» и «на пике Брэгга». Для оценки жизнеспособности опухолевых клеток после облучения проведена сравнительная оценка способности клеток образовывать колонии в зависимости от полученной дозы. Оценка количества колоний на 12–15-й дни после облучения показала достоверную разницу (p<0,05) между количеством образовавшихся колоний в подгруппах. Облучение клеток в дозе, эквивалентной 20 Гр «на входе» , вероят- но, вызвало стимуляцию пролиферации клеток, а, следовательно, и колониеобразования. Этот эффект может быть связан с неравномерностью облучения поверхности, занимаемой клетками.

Выводы. Эксперимент на культурах опухолевых клеток показал перспективность использования ускорителя ионов углерода для разработки новых методов лучевой терапии.