Исследование острой токсичности экспериментального биоинсектицида "Антигаллерин" на кроликах

Введение . Восковая моль относится к числу наиболее опасных вредителей медоносной пчелы и распространена повсеместно. Личинки большой и малой восковой моли наносят большой ущерб пчеловодству. Они разрушают соты и восковое сырье, повреждают пчелиный расплод, портят мед, пергу, соторамки, стенки улья, утеплительный материал, снижают качество меда, перги.

Применяемые для борьбы с восковой молью химические инсектициды довольно часто оказывают отрицательное влияние на качество продукции и экологическое благополучие. Отдельные химические вещества, содержащиеся в инсектицидах, могут накапливаться в продуктах пчеловодства и оказывать отрицательное воздействие на здоровье человека.

Альтернативным методом борьбы с восковой молью является использование биоинсектицидов. Они содержат микроорганизмы и продукты их жизнедеятельности. Биоинсектициды экологически безопасны, избирательно действуют на личинок чешуекрылых, безвредны для людей и теплокровных животных.

В отделе микробиологии ФГБНУ ДальЗНИВИ на основе штамма Bacillus thuringiensis 846-Bt, запатентованного под номером RCAM 00045 [5], разработан опытный образец биоинсектицида для борьбы с большой восковой молью [1] – «Антигаллерин», обладающий высокой энтомо-патогенной активностью против личинок большой восковой моли.

Любой препарат, кормовая добавка и средство, используемое в качестве кормовой добавки, подлежит исследованию на токсичность [3]. Ранее в лаборатории микробиологии ФГБНУ ДальЗНИВИ были проведены исследования по изучению токсичности опытного биопрепарата «Антигаллерин» для медоносной пчелы [2]. Однако сведения о токсическом действии препаратов на основе Bacillus thuringiensis на организм теплокровных животных весьма ограничены.

Цель исследования : изучение острой токсичности опытного препарата «Антигаллерин» на кроликах.

Материалы и методы исследования . Исследование по изучению острой токсичности проведено на кроликах в условиях вивария и отдела микробиологии ФБГНУ ДальЗНИВИ в соответствии с требованиями к доклиническому изучению новых фармакологических веществ при постановке контроля, подбору аналогов, соблюдению одинаковых условий кормления и содержания животных в период исследований и согласно методическим указаниям по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве [4].

Кролики были разделены на группы по 3 головы в каждой. Одна группа служила контролем (интактная), остальные опытные. Токсичность изучали при нанесении препарата на кожу, при введении в желудок и ингаляционном воздействии в трех дозах: 1) при содержании 1,5 тыс. м.т./мл; 2) 3,0 тыс. м.т./мл и 3) 6,0 тыс. м.т./мл. После оказания соответствующего воздействия за животными наблюдали в течение последующих двух недель, обращали внимание на поведение животных, потребление воды и корма, состояние волосяного покрова и слизистых оболочек. По окончании эксперимента проводили забор крови и определяли количество эритроцитов, лейкоцитов и содержание гемоглобина по общепринятым методикам. Рассчитывали содержание гемоглобина в одном эритроците. В сыворотке крови определяли содержание общего белка и соотношение белковых фракций.

Результаты исследования и их обсуждение . Исследование острой токсичности на кроликах показало, что однократное нанесение на предварительно выстриженный участок кожи препарата «Антигаллерин» в выше указанных дозах не вызывает изменения кожной складки, гиперемии, отеков, расчесов и других признаков токсического действия. Рост волос был равномерным, как и у животных контрольной группы.

Однократное введение в желудок 10 мл препарата содержащих 1,5 тыс. м.т./мл; 3,0 тыс. и 6,0 тыс. м.т./мл индивидуально вместе с кормом не оказывало влияния на поведение и внешний вид опытных животных, акт приема воды и корма.

Ингаляционное воздействие (длительность ингаляции 10 мин с последующей выдержкой в ингаляционной камере до 1 ч) не вызывало изменения частоты дыхательных движений и не оказывало раздражающего действия на слизистые оболочки дыхательных путей.

Результаты гематологических исследований при различных видах воздействия препарата «Антигаллерин» представлены в таблице 1.

Гематологические показатели кроликов при различных видах воздействия препаратом «Антигаллерин»

Таблица 1

Группа (испытуемая доза, тыс.м.т./мл)	Эритроциты, 1012/л	Лейкоциты, 109/л	Гемоглобин, г/л	Среднее содержание гемоглобина в эритроците
1	2	3	4	5
Контрольная	5,1±0,21	7,5±0,42	149±9,7	29,2±1,34
Воздействие на кожу
1 опытная (1,5)	5,2±0,21	6,6±0,25	120±8,4	23,1±3,02
2 опытная (3,0)	5,0±0,17	6,5±0,25	126±9,2	25,2±0,97

Окончание табл. 1

1	2	3	4	5
3 опытная (6,0)	5,0±0,21	10,4±1,18	138±6,3	27,6±2,44
Ингаляционное воздействие
1 опытная (1,5)	5,5±0,17	7,0±0,55	120±7,6	22,0±2,06
2 опытная (3,0)	5,0±0,17	6,5±0,42	140±5,0	28,3±1,93
3 опытная (6,0)	5,1±0,17	10,5±0,71	124±6,7	24,4±3,15
Введение в желудок
1 опытная (1,5)	5,3±0,25	8,0±0,59	122±7,6	23,0±3,53
2 опытная (3,0)	5,2±0,13	8,8±0,88	142±4,2	27,1±1,47
3 опытная (6,0)	5,0±0,21	10,5±1,00	140±5,0	28,4±2,14

Результаты исследования показали, что однократное воздействие препаратом «Антигал-лерин» не оказало отрицательного влияния на гематологические показатели крови подопытных кроликов (см. табл. 1). При этом нельзя не отметить, что в опытных группах, испытавших воздействие препарата в дозе 6,0 тыс. м.т./мл, наблюдалось достоверное увеличение числа лейкоцитов в 1,4 раза при различных путях введения биоинсектицида в организм животных.

Следует отметить, что количество лейкоцитов у животных в этих группах находится в пределах верхней границы физиологической нормы.

Результаты исследования белкового обмена у кроликов при воздействии экспериментальным препаратом «Антигаллерин» отражены в таблице 2.

Таблица 2

Группа (испытуемая доза, тыс. м.т./мл)	Общий белок, г/л	Альбумины, %	а-глобулины, %	в-глобулины, %	Y-глобулины, %
Контрольная	74,0±0,29	57,3±2,10	10,6±1,00	10,1±1,80	21,8±1,47
Воздействие на кожу
1 опытная (1,5)	66,0±0,21	56,3±1,59	11,0±1,22	11,7±2,27	20,9±2,06
2 опытная (3,0)	69,0±0,46	58,8±3,99	11,1±2,06	11,4±1,89	18,6±0,76
3 опытная (6,0)	66,0±0,13	56,0±1,59	10,8±1,13	10,4±0,92	25,1±1,13
Ингаляционное воздействие
1 опытная (1,5)	77,0±0,17	57,2±2,73	11,4±0,71	9,1±1,95	22,2±1,30
2 опытная (3,0)	67,0±0,13	56,4±2,98	12,1±0,97	9,2±0,29	22,4±1,55
3 опытная (6,0)	62,0±0,17	52,9±1,43	10,7±1,89	10,8±1,51	25,4±1,05
Введение в желудок
1 опытная (1,5)	71,0±0,50	60,0±1,43	8,7±1,42	9,5±0,67	21,8±0,67
2 опытная (3,0)	70,0±0,21	56,9±2,06	11,9±0,97	12,1±0,84	18,9±1,51
3 опытная (6,0)	65,0±0,08	54,6±2,60	10,6±1,18	12,8±1,64	21,9±0,50

Показатели белкового обмена у кроликов при различных видах воздействия препаратом «Антигаллерин»

Исследование содержания общего белка в сыворотке крови и соотношения белковых фракций показало, что достоверно значимые различия в показателях белкового обмена животных контрольной и опытных групп отсутствуют.

Заключение

Полученные результаты свидетельствуют, что опытный образец препарата «Антигалле-рин» при однократном воздействии в трех испытуемых дозах при разных путях воздействия не вызывает видимых отклонений в общем состоянии лабораторных животных, при специальных исследованиях – не вызывает изменений в клиническом состоянии. На основании проведенных испытаний можно сделать заключение об отсутствии токсического влияния препарата «Антигаллерин» на организм кроликов при однократном его применении.

Во время проведения опытов по изучению острой токсичности опытного образца препарата «Антигаллерин» для теплокровных животных визуальных различий в общем клиническом состоянии кроликов, поведении, акте приема корма и воды между контрольными и опытными группами не замечено. Местного раздражающего действия препарата при нанесении на кожу и при вдыхании ингаляции не установлено.

По действию на основные гематологические показатели выраженного влияния на содержание гемоглобина и количественный состав форменных элементов крови и лейкограмму животных не установлено. В содержании общего белка и его отдельных фракций существенные изменения отсутствуют.

Таким образом, комплекс проведенных нами клинических, физиологических, гематологических и биохимических исследований не выявил наличия признаков острой токсичности препарата «Антигаллерин» для кроликов.