Исследование острой токсичности кормовой добавки «Комплисорбин» на белых крысах

Микотоксины представляют собой вторичные метаболиты мицелиальных грибов и оказывают политоксическое действие на здоровье человека и животных, в том числе через продукцию животного происхождения, такую как мясо, молоко и яйца [1; 2]. Зерновые культуры в сельскохозяйственной практике могут быть заражены микотоксинами во время сбора урожая, транспортировки, переработки и хранения [3; 4]. Уже известно около 200 видов мицелиальных грибов, продуцирующих микотоксины, среди которых наиболее распространенными и токсическими являются афлатоксин В1, фумонизин B1, Т-2 токсин, ДОН и зеараленон [5–7]. Для снижения действия микотоксинов применяют множество способов, но метод энтеросорбции остается наиболее экономичным, не ухудшающим питательного качества корма, безвредным для организма животных и птицы [8–12].

Ранее нами было доказано, что использование поликомпонентного сорбента «Ком-плисорбин» при полимикотоксикозе белых крыс снижает токсическое действие токсинов на печень и другие внутренние органы-мишени [13].

Обязательной процедурой при разработке новых кормовых добавок является проведение доклинических испытаний для объективной оценки безвредности, наличия и обратимости токсических действий на органы и ткани, установления безопасной дозы применения [14].

Цель исследования – изучение острой токсичности кормовой добавки «Комплисор-бин» на белых крысах.

Объекты и методы

Работа проведена в условиях вивария ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Объект исследования – кормовая добавка «Комплисорбин» на основе шунгита, цеолита, лигнина и глюкана, представляющая собой порошок темно-серого цвета. Кормовую добавку вводили однократно внутрижелудочно в виде водной взвеси белым крысам после 8-часового голодания. Каждому животному дозу введения рассчитывали индивидуально в зависимости от массы тела. Диапазон исследуемых доз составлял 2000, 3000, 4000 и 5000 мг/кг массы тела. Через час после введения животные получали свободный доступ к воде и корму. Определение параметров острой токсичности проводилось с использованием

Vestnik of Omsk SAU, 2024, no.1 53)

VETERINARY AND ZOOTECHNY метода Кербера. Для проведения эксперимента сформировали 5 групп крыс по 12 животных в каждой, внутри группы было равное количество самцов и самок. Контрольным животным в эквивалентном объеме вводили растворитель препарата – дистиллированную воду.

Схема эксперимента представлена в табл. 1.

Таблица 1

Схема эксперимента

Группа		2             1	3               1	4	5
Рацион	Кормовая добавка «Комплисорбин»				Дистиллированная вода
	доза 2000 мг/кг	доза 3000 мг/кг	доза 4000 мг/кг	доза 5000 мг/кг
Количество животных, голов	2	2	2	2	2

Наблюдение за животными для выявления отклонений в состоянии здоровья и летальных исходов проводили один раз в день непосредственно перед введением препарата. При осмотре отмечали внешний вид животных, поведение каждой особи, состояние экскрементов и др. При обнаружении отклонений проводили подробный клинический осмотр.

Крыс взвешивали перед введением препаратов и в соответствии с запланированными исследованиями на весах «Ньютон» для лабораторных животных. Масса тела регистрировалась непосредственно перед введением препарата для расчета объема введения, далее на 14-е сут.

Ректальная температура регистрировалась непосредственно перед первым введением препарата, далее 1 раз в 3 дня с помощью медицинского термометра «Little Doctor».

На 14-е сут проводили эвтаназию животных и забор крови для изучения гематологических показателей (лейкоциты, лимфоциты, моноциты, гранулоциты, эритроциты, гемоглобин, средний объем эритроцита, среднее содержание гемоглобина в эритроците, средняя концентрация гемоглобина в одном эритроците, тромбоциты, тромбокрит) с помощью гематологического анализатора Mythic 18 Vet.

Патоморфологическое исследование включало некропсию, макроскопическое исследование, взвешивание внутренних органов. Парные органы взвешивали вместе, однако если присутствовали аномалии в массе или размерах, парные органы взвешивали отдельно. Массовые коэффициенты внутренних органов рассчитывали как отношение массы органа к массе тела (г/кг).

Обработку данных проводили с вычислением среднего арифметического (М) и ошибки среднего значения (m) с использованием критерия t-Стъюдента. Различия считали достоверными при уровне значимости р < 0,05.

Результаты исследований

В течение 30 мин после введения кормовой добавки «Комплисорбин» в дозах от 2000 до 5000 мг/кг при выполнении клинического осмотра у всех подопытных крыс отмечали незначительное понижение поведенческой активности, сохранение мышечного тонуса и двигательной активности, адекватную реакцию на звук и свет, взъерошен-ность шерсти, отсутствие функциональных нарушений в пищеварительной и мочевыделительной системе. Изменение психоэмоциональной возбудимости, вероятно, было связано с проведением манипуляций и объемом принудительно вводимых веществ. В последующие два часа происходило улучшение общей клинической картины и возвращение к показателям референтных значений, которые не имели отличий от биологического контроля.

По результатам наблюдения установлена 100%-ная выживаемость исследуемых крыс, живая масса всех крыс прибавилась синхронно и находилась в пределах нижней

Vestnik of Omsk SAU, 2024, no.1 53)

VETERINARY AND ZOOTECHNY границы и средних значений норм веса крыс данного возраста (рис. 1). Исходя из этого, можно заключить, что ни одна доза «Комплисорбина» не привела к гибели крыс, явным признакам интоксикации и снижению живой массы.

Грамм

Рис. 1. Данные прироста живой массы белых крыс на 4сут эксперимента, г (М ± m) (n = 2)

При 95%-ном уровне вероятности не было достоверных отличий между опытом и контролем.

Не было зарегистрировано достоверного изменения ректальной температуры белых крыс, которым вводили различные дозы кормовой добавки, в сравнении с показателями контрольных животных.

Данные гематологических исследований представлены в табл. 2.

Таблица 2

Гематологические показатели крыс при внутрижелудочном введении кормовой добавки «Комплисорбин» на 14-й день исследования, (M ± m)

Пол	Лейкоциты, × 03/мкл	Эритроциты, × 06 /мкл	Гемоглобин, г/л	Тромбоциты, × 03/мкл	Лимфоциты, %	Моноциты, %
1 группа
Самцы	3,0 ± 0,4	8,9 ± 0,	30,0 ± 0,9	59 ,3 ± 6 ,7	60,4 ± 2,4	,7 ± 0,
Самки	3,2 ± 0,3	8,9 ± 0,	34,7 ± ,5	523, ± 87,4	6 ,8 ± 2,7	, ± 0,
2 группа
Самцы	3,2 ± 0,4	8,8 ± 0,3	35,8 ± 2,4*	584,5 ± 79,	63,0 ± 3,0	,8 ± 0,
Самки	3,6 ± 0,3	9, ± 0,3	36,2 ± 2,6	593,2 ± 78,	63,5 ± 3,0	0,9 ± 0,
3 группа
Самцы	2,6 ± 0,3	9,7 ± 0,2	27,6 ± 3,	420,0 ± 82,7	59,7 ± 2,4	,6 ± 0,
Самки	2,7 ± 0,4	9,4 ± 0,2*	35,6 ± 3,2	482,5 ± 54,4	6 , ± 2,4	, ± 0,
4 группа
Самцы	2,8 ± 0,3	9, ± 0,2	34, ± 2,7	570,7 ± 67,6	60, ± 2,3	,3 ± 0, *
Самки	3, ± 0,4	9,2 ± 0, *	33,8 ± 2,6	620,4 ± 68,0	6 ,3 ± 2,5	,4 ± 0,2
5 группа
Самцы	2,9 ± 0,5	9,0 ± 0,	32,2 ± ,2	636,3 ± 66,3	60,7 ± 2,8	,4 ± 0, *
Самки	3,0 ± 0,6	8,9 ± 0,	33,0 ± 2,2	596,4 ± 66,	6 ,3 ± 2,6	,5 ± 0,2

*р < 0,05 по сравнению с контролем (группа 5)

Vestnik of Omsk SAU, 2024, no.1 53)

VETERINARY AND ZOOTECHNY

При анализе результатов морфологических исследований крови зарегистрировали повышение гемоглобина на 4% у самок крыс из 1 группы, эритроцитов на 6% и 4% у самок из 3 и 4 групп.

В результате вскрытия не было зафиксировано макроскопических изменений органов животных из всех групп.

Влияние введения различных доз кормовой добавки «Комплисорбин» на массовые коэффициенты органов представлено на рис. 2 и 3.

Рис. 2. Массовые коэффициенты органов самок крыс на 4-й день эксперимента (г/кг) (М ± m) (n = 2)

Рис. 3. Массовые коэффициенты органов самцов крыс на 4-й день эксперимента (г/кг) (М ± m) (n = 2)

Исходя из данных рис. 2 и 3, у самцов и самок белых крыс при введении различных доз кормовой добавки «Комплисорбин» не было достоверных различий показателей массовых коэффициентов внутренних органов по сравнению с данными контроля.

Vestnik of Omsk SAU, 2024, no. 1 53) VETERINARY AND ZOOTECHNY

Таким образом, при однократном внутрижелудочном введении в дозах от 2000 до 5000 мг/кг живой массы кормовая добавка «Комплисорбин» не вызывала гибели животных и не оказывала отрицательного влияния на клинико-гематологические показатели, массу тела, макроскопическую картину вскрытия. Вследствие того, что исследуемые дозы не вызывали гибели крыс, среднесмертельная доза средства не была определена.

Заключение

Таким образом, при однократном внутрижелудочном введении крысам кормовой добавки «Комплисорбин» в дозах от 2000 до 5000 мг/кг массы тела не наблюдалось отрицательного воздействия на общее состояние животных, массу тела, гематологические показатели и массовые коэффициенты внутренних органов. В результате морфометрического анализа и макроскопического исследования внутренних органов животных летальная доза не установлена. Максимальная доза введения кормовой добавки – 5000 мг/кг. Выявленные факты позволяют отнести средство «Комплисорбин» к веществам 4 класса опасности – малоопасные вещества согласно ГОСТу 12.1.007–76.