Исследование перспективы комплексной переработки надземной части татарника колючего Onopordum acanthium L
Автор: Рыжов Виталий Михайлович, Бельченко Анастасия Сергеевна
Журнал: Известия Самарского научного центра Российской академии наук @izvestiya-ssc
Рубрика: Биологические ресурсы: флора
Статья в выпуске: 1-3 т.16, 2014 года.
Бесплатный доступ
Татарник колючий Onopordum acanthium L. - перспективный источник биологически активных соединений, обладающих антиоксидантной, адаптогенной и противовоспалительной активностью. Проведены сравнительные хроматографические и спектральные исследования плодов татарника колючего, произрастающего в Самарской области, и плодов расторопши пятнистой. Выявлен высокий уровень сходства хроматографических профилей водно-спиртовых извлечений плодов сравниваемых видов во всех использованных хроматографических системах. Были обнаружены фенольные соединения, сходные по подвижности и характеру детектирования с силибином - флаволигнаном расторопши пятнистой. Сравнительное спектроскопическое исследование выявило наличие в кривой спектра водно-спиртового извлечения из плодов татарника колючего, характерного для флаволигнанов, максимума поглощения при 289 нм. Количественное определение целевых групп веществ в плодах татарника показала высокое содержание фенольных соединений - 2,80% и терпеноидной - 5,20%. Полученные данные подтверждают перспективность использования плодов татарника в комплексной переработке его надземной части для получения современных препаратов с антиоксидантной и противовоспалительной активностью.
Флаволигнаны, силибин, тритерпены, комплексная переработка
Короткий адрес: https://sciup.org/148202843
IDR: 148202843
Текст научной статьи Исследование перспективы комплексной переработки надземной части татарника колючего Onopordum acanthium L
Бельченко Анастасия Сергеевна, студентка
Рядом ученых уже изучался химический состав некоторых морфологических органов татарника колючего. Известно, что в листьях татарника колючего содержатся сесквитерпеновые лактоны арктиопикрин и онопордопикрин [11], а также стериновые соединения тараксастерол, тараксастерилацетат [10]. На сегодняшний день изучен аминокислотный и минеральный состав травы татарника колючего. Установлено наличие 15 свободных аминокислот, 8 из которых являются незаменимыми [1]. По литературным данным, тритерпенолы татарника обыкновенного представлены следующими компонентами – α-амирином, β-амирином и лупеолом. В жирном масле плодов татарника найдены β-ситостерол, стигмастерол, кампестерол и аконизид [9].
Для извлечений из травы татарника колючего рядом исследователей обнаружена анти-флогистическая, противовоспалительная, антиоксидантная активность [2]. Эти данные позволяют рассматривать надземную часть татарника колючего, в частности, траву, как источник ценных биологически активных веществ, возможных для использования в медицинской практике, однако плоды и их фенольный и стериновый состав изучены недостаточно.
Цель работы: исследование перспективы использования плодов татарника колючего Onopordum acanthium L., произрастающего в Самарской области, в комплексной переработке его надземной части.
Объект и методы исследования. Исследованию подвергали плоды татарника колючего, заготовленные в июле-августе 2013 г. в совхозе «Черновский» Волжского района Самарской области. В качестве сравнения использовали плоды расторопши пятнистой, а также стандартные образцы веществ флаволигнановой природы - ГСО силибин (СамГМУ 2011 г.), флавоноидной природы: РСО триандрин, РСО лютеолин, РСО рутин, РСО циннарозид (СамГМУ 2011 г.), а также стериновой природы - РСО в-ситостерин (СамГМУ 2011 г.).
В качестве методов исследования использовали хроматографию в тонком слое сорбента (ТСХ), а также спектральные методы исследования. Хроматографическое разделение суммы компонентов, анализируемого сырья проводили на пластинках «Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ» (Россия) в хроматографических системах: - бутанол-уксус-вода - 4:2:1 (гликозидная система pH<7);
-
- хлороформ-этанол-вода - 26:16:3 (гликозидная система pH=7);
-
- хлороформ-этанол - 16:1 (агликоновая система).
Детектирование веществ проводили при просматривании в УФ-свете при Х=254 нм, 366 нм, а также обработкой реактивами: раствором диазобензолсульфокислоты (ДСК) (обнаружение фенольных соединений) [12], 10% раствором фосфорно-молибденовой кислоты в спирте (ФМК) (стерины, тритерпены, фенольные соединения), 20% раствором фосфорно-воль-фрамовой кислоты (ФВК) (стерины, тритерпены, флавоноиды), 20% раствором серной кислоты (стерины, тритерпены, флавоноиды) [12]. В качестве экстрагента использовался спирт этиловый в концентрациях 70%, 96% и хлороформ.
Результаты и их обсуждение. На начальном этапе исследования нами проанализированы хроматографические профили водно-спиртовых извлечений из плодов татарника колючего и рас-торопши пятнистой в сравнении со стандартными веществами. ТСХ-анализ подтвердил ряд литературных данных, в частности, присутствие в-ситостерина в плодах обоих видов. в-ситостерин детектируется на хроматограммах в виде пятна с фактором подвижности (рис. 1). Помимо в-ситостерина выявлено содержание тритерпеновых соединений в- и а-амирина, а также лупеол, проявляющихся на хроматограммах в виде розовых пятен (Rf=0,55; Rf=0,19; Rf=0,1) при обработке реактивом ФВК (рис. 1Б).

Рис. 1. Хроматограмма извлечений из семян расторопши, татарника (система бутанол-уксус-вода - 4:1:2.)
А) - обработка ФМК; Б) - ФВК. 1 - извлечение плодов расторопши пятнистой 96% этанолом; 2 - извлечение плодов татарника колючего 96% этанолом; 3 - извлечение плодов расторопши пятнистой 70% этанолом; 4 -извлечение плодов татарника колючего 70% этанолом; 5 - РСО в-ситостерин
Необходимо отметить, что вещества, а также выявленные тритерпеновые структуры с фактором подвижности R f = 0,19 и R f = 0,1, содержатся в обоих сравниваемых образцах. Вещество с подвижностью Rf= 0,55, напротив, присутствует только в плодах татарника колючего. Сравнение водно-спиртовых извлечений из плодов с образцами фавоноидов не выявило содержания искомых веществ в объектах (рис. 2). Что касается детектирования флаволигнана си-либина, необходимо отметить присутствие вещества фенольной природы (реакция с ДСК) в извлечениях из плодов татарника колючего в виде пятна с R f =0,86 (на уровне пятна силибина), что позволяет предположить лигнановую природу обнаруженного соединения (рис. 2Б). Обобщенный анализ хроматографических профилей водно-спиртовых извлечений из плодов расто-ропши пятнистой и татарника колючего позволил выявить высокий уровень сходства сравниваемых образцов.
Для подтверждения лигнановой природы обнаруженного в ТСХ-анализе вещества водноспиртовых извлечений из плодов татарника нами были проведены дополнительные исследования оценки спектральных характеристик. Как известно, качественным показателем спектральной кривой для флаволигнанов расторопши пятнистой (силибин) является наличие одного максимума поглощения при Х=289 нм [3]. Сравнение спектральных кривых водно-спиртового извлечения (96%) из плодов татарника колючего со спектральной кривой ГСО силибина выявило наличие максимума поглощения в области 289 нм (рис. 3А), что косвенно позволяет сделать вывод о флаволигнановой структуре веществ, входящих в состав плодов татарника.
Для выявления перспективы использования плодов при комплексной переработке надземной части нами проведено количественное определение фенольных соединений методом прямой спектрофотометрии в пересчете на ГСО силибин при λ=289 нм, результаты анализа приведены на гистограмме (рис. 3Б). Анализ показал, что содержание фенолов (флаволигнанов) в плодах расторопши пятнистой составляет около 3%, что согласуется с литературными данными [3, 7]. Содержание фенольных соединений в плодах татарника при прочих равных условиях анализа составило 2,80%.

Rf=0.65
Rf=0.65
Рис. 2. Хроматограмма извлечений из семян расторопши, татарника (система хлороформ-этанол-вода - 26:16:3). А) обработка ФМК; Б) обработка ДСК. 1 - извлечение плодов расторопши пятнистой 96% этанолом; 2 - извлечение плодов татарника колючего 96% этанолом; 3 - извлечение плодов расторопши пятнистой 70% этанолом; 4 - извлечение плодов татарника колючего 70% этанолом; 5 - ГСО силибин; 6 - РСО триандрин; 7 -РСО люте-олин; 8 - ГСО рутин; 9 - РСО циннарозид

А
Б
Рис. 3. Спектральный анализ фенолов в пересчете на ГСО Силибин
А - спектральные кривые поглощения извлечений образцов (96% этанол); Б - гистограмма сравнительного количественного содержания фенольных соединений в плодах
ТСХ-анализ позволил выявить присутствие в изучаемых объектах веществ стериновой и тритерпеновой природы. Так, как указанные вещества являются фармакологически активными, они могут рассматриваться как потенциальная группа БАС данного ЛРС. Известно, что тритерпеновые соединения не обладают диагностически значимыми максимумами поглощения в ультрафиолетовой области спектра. Однако имеющиеся методы позволяют детектировать данные группы БАС при спектрофотометрировании в среде концентрированной серной кислоты (Муравьёв, И.А. 1972). При этом для тритерпенов и стеринов имеются характерные максимумы поглощения при длинах волн в области 310 нм [5].
В качестве экстрагента использовали хлороформ. Пробоподготовку проводили по методике (Муравьёв, И.А. 1972) [5]. Анализ спектральных кривых показал сходные спектральные характеристики извлечений из плодов татарника и расторопши. У обоих образцов спектральная кривая имеет один максимум поглощения при
313 нм (рис. 4А). Пересчет содержания терпеноидов производили при длине волны λ= 310 нм на РСО урсоловая кислота. Результаты определения представлены в гистограмме (рис. 4Б). Из гистограммы видно, что наибольшее содержание тритерпеновых соединений определяется в плодах расторопши пятнистой - 7,60%, в плодах татарника колючего сумма тритерпеновых веществ составляет 5,20%.

А
Б
Рис. 4. Спектральный анализ фенолов в пересчете на ГСО β-ситостерин
А – спектральные кривые поглощения извлечений образцов (хлороформ); Б – гистограмма сравнительного количественного содержания фенольных соединений в плодах
Выводы:
-
1. Проведен сравнительный хроматографический анализ водно-спиртовых извлечений из плодов изучаемых видов (расторопша пятнистая, татарник колючий). Выявлен высокий уровень сходства хроматографических профилей водноспиртовых извлечений плодов сравниваемых видов во всех использованных хроматографических системах.
-
2. Обнаружены фенольные соединения, сходные по подвижности и характеру детектирования с силибином – флаволигнаном расторопши пятнистой. Кроме того, обнаружены соединения тритерпеновой и стероидной природы во всех сравниваемых образцах плодов.
-
3. Сравнительное спектроскопическое исследование позволило выявить наличие в кривой спектра водно-спиртового извлечения из плодов татарника колючего, характерного для флаво-лигнанов максимума поглощения при 289 нм.
-
4. Количественное определение целевых групп веществ в плодах татарника показала высокое содержание фенольных соединений – 2,80%, тритерпеновых – 5,20%.
Полученные данные подтверждают перспективность использования плодов татарника в комплексной переработке надземной части для получения современных препаратов с антиоксидантной и противовоспалительной активностью.
Список литературы Исследование перспективы комплексной переработки надземной части татарника колючего Onopordum acanthium L
- Иванова, Л.Р. Аминокислотный и минеральный состав травы татарника колючего//Новые мед. технологии. 2007. № 7. С. 34-36.
- Иванова, Л.Р. Противовоспалительная активность экстракта травы татарника колючего/Л.Р. Иванова, Т.А. Лысенко, В.Г. Сбежнева, М. Н. Ивашев//Фармация. 2007. № 4. С. 39-40.
- Куркин, В.А. Количественное определение флавоноидов и суммы флаволигнанов в плодах Silybum marianum (L.)/В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная, Е.В. Авдеева и др.//Растительные ресурсы. 1996. Т. 32, вып. 3. С. 80-87.
- Куркин, В.А. Итоги и перспективы исследований в области создания препаратов на основе лекарственного растительного сырья, содержащего фенилпропаноиды/В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная, Е.В. Авдеева//Поиск, разработка и внедрение новых лекарственных средств и организационных форм фармацевтической деятельности: мат-лы докл. Междунар. науч. конф. -Томск, 2000. С. 40-42.
- Муравьёв, И.А. Спектрометрический метод количественного определения урсоловой кислоты/И.М. Муравьев, В.В Шатило, В.Ф. Семченко//Химия природных соединений. 1972. №6. С. 738-740.
- Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование. Сем. Asteraceae/под ред. П.Д. Соколова. -СПб.: Наука, 1993. 357 с.
- Рыжов, В.М. Исследования по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе плодов расторопши пятнистой [Silybum marianum (L.) Gaertn.]: дис. канд. фарм. наук: 15.99.02. -Курск, 2009. 159 с.
- Смирнов, С.В. Триба Cardueae Cass. (Asteraceae) на Алтае: дис. … канд. биол. наук: 03.00.05. -Барнаул, 2001. С. 124-125.
- Ульченко, Н.Т. Неглицеридный комплекс масла семян Onopordum acanthium/Н.Т. Ульченко, Э.И Гигиенова, У.А. Абдуллаев, А.У. Умаров//Химия природ. Соединений. 1979. №5. С. 612-615.
- Халилов, Л.М. Спектры ЯМР ¹H и ¹³C биологически активных соединений. XII Тараксастерол и его ацетат из надземной части Onopordum acanthium L./Л.М. Халилов, А.З. Халилова, Э.Р. Шакурова и др.//Химия природ. соединений. 2003. № 3. С. 223-225.
- Халилова, А.З. Тритерпеноиды татарника колючего Onopordum acanthium L./А.З. Халилова, Э.Р. Шакурова, И.Ф. Нуриев и др.//Растительные ресурсы. 2006. № 4. С. 38-42.
- Шаршунова, М. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии/М. Шаршунова, В. Шварц, Ч. Михалец. -М.: Мир, 1980. Т. 1, 2. С. 20.