Исследование содержания атипичных/ гибридных опухолевых клеток в асцитической жидкости больных раком яичников

ми у женщин, приходится на РЯ. Асцитическая жидкость является перспективным биологическим материалом для получения информации о характере опухолевого процесса. Однако прогностические факторы, связанные со злокачественным асцитом, изучены недостаточно. Недавние исследования показали, что опухолевые клетки могут гибридизироваться с макрофагами, образуя ати-пичные/гибридные формы EpСam CD45 клеток. В связи с этим, целью нашего исследования явилась оценка уровня атипичных/гибридных опухолевых клеток в асцитической жидкости у больных РЯ.

Исследование выполнено при финансовой поддержке гранта Президента РФ МД-544.2018.7

Материалы и методы: В проспективное исследование включены 16 больных с впервые диагностированным РЯ, с Ic-IV стадиями по системе FIGO и 7 больных с пограничными опухолями яичников в возрасте от 36 до 76 лет, поступившие на лечение в НИИ онкологии Томского НИМЦ. Материалом для исследования служила асцитическая жидкость стабилизированная ЭДТА, взятая во время лапароскопии. Содержание атипичных/гибридных популяций опухолевых клеток в асцитической жидкости определяли методом многоцветной проточной лазерной цитометрии на аппарате BDFACSCanto (США) с помощью программного обеспечения BD FACSDiva. Для этого асцитическую жидкость инкубировали с меченными различными флюо-рохромами моноклональными антителами к CD45, EpCAM, CD44, CD24, CD133. После чего эритроциты, находящиеся в образце лизировали раствором BD Facs lysing solution и дважды отмывали CellWash буфером, затем к клеточному осадку добавляли 1 мл BD Flow. Все образцы хранили в темноте при 4°С и были проанализированы на проточном цитофлуориметре в течении часа. Уровень клеток выражали в количестве клеток в 1 мкл асцитической жидкости. Достоверность различий оценивали с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни в программном пакете для статистического анализа «Statistica 12.0», компании StatSoft. Данные представлены в виде медианы (Ме), верхнего и нижнего квартилей (Q1–Q3). Различия считались достоверными при уровне значимости р < 0,05. Исследование одобрено локальным этическим комитетом НИИ Онкологии Томского НИМЦ (протокол № 4 от 02.04.2018 г.). Результаты: В результате исследования асцитической жидкости больных раком яичников было выявлено наличие атипичных/гибридных форм EpСam CD45 клеток как с признаками стволовости, так и без таковых. Сравнительный анализ между группами больных раком яичников и больных с пограничными опухолями яичников показал, что количество атипичных/гибридных клеток ЕрСam CD45 CD44 CD24/-CD133 в асците больных РЯ в 4,2 раза был выше, чем в группе с пограничными опухолями яичников (р=0,046).

Заключение: Исследование различных популяций опухолевых клеток в асцитической жидкости, их связь с клиническим течением и эффективностью химиотерапии больных раком яичников является весьма целесообразным и открывает большие перспективы для практических разработок в области жидкостной биопсии.