Исследование влияния факторов космического полета на морфобиологические особенности растений картофеля

Значительное усложнение программы селекционной работы по созданию новых современных сортов с комплексом хозяйственноценных признаков и новым их фенотипическим сочетанием определяют необходимость использования экспериментальных методов, расширяющих генетическую изменчивость потомства и повышающих эффективность селекционного отбора (Симаков Е.А., 2010).

В настоящее время в современной селекции используются различные виды и способы получения, исходного селекционного материала: естественные популяции; гибридные популяции; самоопыленные линии (инцухт-линии); искусственные мутации и полиплоидные формы. Одним из основных методов получения ценного генетического материала является экспериментальный мутагенез. Искусственный или экспериментальный мутагенез – важнейший источник создания исходного селекционного материала, основанный на применении ионизирующих излучений и химических мутагенов. Он повышает частоту изменчивости признаков растений и расширяет возможности селекционера для отбора хозяйственно-ценных форм. Использование ценного исходного материала, полученного методами экспериментального мутагенеза в сочетании с тради-

Рубцов Сергей Леонидович, научный сотрудник лаборатории биотехнологии сельскохозяйственных растений. Дмитриева Надежда Николаевна, старший научный сотрудник лаборатории биотехнологии сельскохозяйственных растений.

Зотов Святослав Сергеевич, младший научный сотрудник.

ционными селекционными методами, позволило в последние десятилетия создать немало практически ценных форм и сортов (Равкин А.С., 1981, 1987).

В мире используется более 200 сортов сельскохозяйственных растений, созданных с помощью физического и химического мутагенеза. Среди них высокоурожайные сорта пшеницы, кукурузы, риса, сои, томатов, сорта кукурузы и пшеницы с повышенным содержанием в зерне белка и лизина, безалкалоидный сорт люпина, высокомасличные сорта подсолнечника с необычным химическим составом масла, устойчивые к полеганию карликовые и полукарликовые сорта пшеницы и ячменя, высокопродуктивные сорта хлопчатника с волокном высокого качества, интересные в декоративном отношении формы цветочных культур.

В последние годы начаты исследования по изучению химического мутагенеза в кло-новой селекции вегетативно размножаемых культур. Обработка мутагенами соматических клеток вызывает изменение отдельных признаков сорта при сохранении его основных достоинств и является перспективной для совершенствования сортимента. При этом важное значение имеет подбор сроков и доз обработки вегетативных почек химическими мутагенами, а также комбинированное воздействие мутагенов и физиологически активных веществ для повышения выхода жизнеспособных растений с мутационными изменениями. Необходимо изучить морфобиологические, анатомические и цитогенетические особенности мутантных форм (Се-макин В.П., 1982; Смыков А.В., 1999).

Однако до сих пор многие проблемы не решены до конца. Условия космического полёта (минимальное влияние магнитного поля Земли, отсутствие гравитации, ионизирующее и электромагнитное космическое излучение) теоретически может повлиять на процессы экспрессии генов и рекомбиногенеза, что может расширить веретено генотипической вариабельности и получить новые хозяйственно значимые генетические конструкции.

Целью исследований являлось изучение влияния факторов космического полёта (ФКП) на морфобиологические параметры меристем-ных растений картофеля для последующего создания высокопродуктивных генотипов и сортов, устойчивых к неблагоприятным абиотическим и биотическим факторам среды для использования в агропромышленном комплексе Российской Федерации.

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектами исследования служили: миниклубни сортов картофеля селекции ФГБНУ «Самарский НИИСХ» Жигулевский и Безенчукский, а также микрорастения in vitro, полученные из миниклубней, подвергшихся воздействию фак- торов космического полета на космическом аппарате «Фотон-М» №4 (рис. 1).

Рис. 1. Схема космического аппарата Фотон М-№4

Аппарат Фотон М-№4 предназначен для проведения в условиях микрогравитации исследований в области космической технологии и биотехнологии, обеспечивающих получение новых знаний по физике невесомости, получение отработанных технологических процессов производства полупроводниковых материалов, биомедицинских препаратов с улучшенными характеристиками. Исследования проводились на научной аппаратуре «СИГМА» ФГБНУ ИПУСС РАН.

Продолжительность экспонирования: 50 суток, с 14 июля по 1 сентября 2014 г.

Сорт Жигулевский - среднеспелый, универсальный. Растение высокое, промежуточного типа, полупрямостоячее. Лист от среднего размера до крупного, промежуточный, зеленый. Волнистость края средняя. Венчик очень крупный, белый. Максимальная урожайность - 341 ц/га. Клубень овальный с мелкими глазками. Кожура слегка шероховатая, желтая. Мякоть светло-желтая. Масса товарного клубня 100-208 г. Содержание крахмала 12,5-15,0%. Вкус удовлетворительный и хороший. Товарность 87-97%. Лежкость 78%.

Сорт Безенчукский - среднеспелый, столового назначения. Растение средней высоты, промежуточного типа, полупрямостоячее. Лист среднего размера, промежуточный, темно-зеленый. Венчик среднего размера до крупного. Интенсивность антоциановой окраски внутренней стороны венчика сильная. Максимальная урожайность - 323 ц/га. Клубень овально-округлый с глубокими глазками. Кожура красная. Мякоть светло-желтая. Масса товарного клубня - 125243 г. Содержание крахмала - 15,2-17,9%. Вкус отличный. Товарность - 88-96%. Лежкость - 93%.

Схема опыта предусматривала три варианта: 1. контроль (10 клубней, хранившиеся в наземных условиях); 2. вариант «ГИПО» (10 клубней, находившиеся во время полета в гипомагнит-ном модуле); 3. вариант «НЭ» (10 клубней, находившиеся во время полета в обычном модуле).

Наземные исследования и эксперименты проводились согласно методике по проведению работ с культурой ткани и клонального микроразмножения растений картофеля. Ввод растений в культуру in vitro осуществлен в соответствии с методикой ФГБНУ «Самарский НИИСХ» (Методика, 2017). От каждого миниклубня было получено по три микрорастения, принятых за повторность. Общее количество растений на каждом варианте - 30 штук, количество повторностей - 10. Растения культивировались в стеклянных пробирках с ватно-марлевыми пробками в течение 30 суток при шестнадцатичасовом фотопериоде на стандартной питательной среде Мурасиге-Скуга. После окончания вегетации измерялись следующие параметры: высота растений, количество листьев и междоузлий, длина корневой системы. На основании полученных биометрических данных по каждому сорту рассчитывали коэффициент размножения.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Двухфакторный дисперсионный анализ длины регенерантов выявил высокую достоверность различий по этому показателю, как по различным генотипам, так и по различным средовым воздействиям. Установлено достоверное снижение средней длины меристемных растений картофеля при их получении из миниклубней, подвергшихся воздействию факторов космического полета. Так, в контрольном варианте средняя длина регенерантов составила 9,08 см, в варианте ГИПО этот показатель составлял 8,37 см, а в варианте НЭ – 8,19 см (табл. 1). Между вариантами опыта достоверных различий по этому показателю не выявлено.

Также следует отметить, что микрорастения сорта Жигулевский, полученные из клубней в варианте ГИПО, не имели достоверного снижения длины в сравнении с контрольным вариантом.

Таблица 1. Длина меристемных растений картофеля в зависимости от действия факторов космического полета

Сорт	Длина растений, см.			Ср. по генотипам
	Контроль	ГИПО	НЭ
Жигулевский	10,02	9,85	9,24	9,70
Безенчукский	8,14	6,89	7,14	7,39
Среднее по средам	9,08	8,37	8,19

НСР по фактору А (сорт) = 0,29 см

НСР по фактору В (среда) = 0,36 см

НСР АВ (взаимодействие) = 0,51 см

Вариабельность длины меристемных растений была преимущественно обусловлена генотипическими факторами. Вклад генотипа в варьирование длины растения составил 83,3%, на фактор изменения условий среды приходилось 13,8%, а на взаимодействие факторов генотипа и среды лишь 2,9% от общего варьирования признака.

Количество междоузлий на меристемном растении картофеля важно для оценки количества черенков, которые могут быть получены с одного растения и, следовательно, для последующего прогнозирования коэффициента размножения. При анализе среднего количества междоузлий на одно меристемное растение установлено достоверное снижение этого показателя у регенерантов, полученных из клубней, подвергшихся действию факторов космического полета. Так, среднее количество междоузлий на одно растение составило 6,05 шт. в контрольном варианте и 5,13 шт. в вариантах ГИПО и НЭ (таблица 2).

Анализ воздействия генотипа, условий культивирования и их взаимодействия на варьирование количества междоузлий показал практически равный вклад генотипа и средовых воздействий. Вклад генотипа в изменчивость признака составил 49,9%, а факторы космического полета обусловили 49,1% общего варьирования признака. При этом достоверного взаимодействия генотипа и среды не выявлено, на него приходился лишь 1% варьирования.

Факторы космического полета привели к достоверному снижению длины корневой системы у полученных регенерантов. Средняя длина корневой системы на одном растении составила в контрольном варианте 4,95 см, в варианте ГИПО – 4,17 см, а в варианте НЭ – 4,25 см (табл. 3). При этом достоверных различий между вариантами опыта по этому показателю не выявлено.

Вариабельность длины корневой систе-

Таблица 2. Количество междоузлий у меристемных растений картофеля в зависимости от действия факторов космического полета

Сорт	Среднее количество междоузлий на одно растение, шт.			Ср. по генотипам
	Контроль	ГИПО	НЭ
Жигулевский	6,57	5,53	5,52	5,87
Безенчукский	5,53	4,73	4,74	5,00
Среднее по средам	6,05	5,13	5,13

НСР по фактору А (сорт) = 0,27 см

НСР по фактору В (среда) = 0,33 см

Таблица 3. Длина корневой системы у меристемных растений картофеля в зависимости от действия факторов космического полета

Сорт	Среднее длина корневой системы на одно растение, см			Ср. по генотипам
	Контроль	ГИПО	НЭ
Жигулевский	5,29	4,48	4,54	4,77
Безенчукский	4,61	3,86	3,95	4,14
Среднее по средам	4,95	4,17	4,25

НСР по фактору А (сорт) = 0,23 см

НСР по фактору В (среда) = 0,28 см мы у изученных регенерантов в максимальной степени была обусловлена средовыми факторами, на долю которых приходилось 55,4% от общего варьирования признака. Генотипическими факторами было обусловлено 44,4% варьирования, а достоверного взаимодействия факторов не выявлено, от него зависело лишь 0,2% изменчивости длины корневой системы.

Таким образом, у меристемных растений картофеля, полученных из миниклубней, которые были подвергнуты действию факторов космического полета, отмечено достоверное снижение в сравнении с контролем основных показателей роста и развития: длины растения, количества междоузлий и длины корневой системы. Достоверные различия по этим показателям между различными вариантами опыта не выявлено. Факторы космического полета в максимальной степени воздействовали на вариабельность длины корневой системы. Вариабельность количества междоузлий была в равной степени обусловлена генотипическими и средовыми факторами, а длина регенерантов преимущественно зависела от генотипических факторов.