Изменение иммунного статуса и антиоксидантной защиты у женщин с урогенитальным хламидиозом

• ¹ В ведение. Ежегодная заболеваемость хламидиозом в мире составляет около 89 миллионов случаев, так как 5-10 % сексуально активных людей хламидиозом УГХ [1], при этом в организме развивается смешанный инфекционный иммунитет и у пациентов нередко развивается вторичный иммунодефицит [2, 3]. Течение УГХ сопровождается крайне низким защитным действием противохламидийных антител и неэффективным ответом клеточного иммунитета, а в ряде случаев аутоиммунной реакцией.

Проведенные исследования показали, что изменения иммунологической реактивности у больных УГХ могут быть сведены к трем основным вариантам им-

ГОУ ВПО Ставропольский государственный университет Рособрнауки, кафедра физико-химических основ медицины, лабораторной диагностики и фармакологии

Тел.: (865-2) 35-50-68

of tocopherol acetase reduction that causes the significant мунодефицита по регуляторному звену иммунитета: гипер- или гипосупрессия и дисбаланс клеточного и гуморального звеньев иммунитета при относительно нормальном уровне регуляторных лимфоцитов [4].

В ответ на хламидийную инфекцию происходит нарушение перекисного окисления липидов продуктами распада тканей и антиоксидантной защиты, которое существенно зависит от выраженности патологических изменений в мочеполовом тракте, что характерно для любого хронического процесса [5]. Особенности жизненного цикла и низкая иммуногенность С. trachomatis, сложные ассоциации микроорганизмов [6], наблюдаемые у большинства больных, часто затрудняют интерпретацию полученных результатов лабораторных исследований и носят разноречивый характер.

Особенности паразитирования и размножения возбудителя УГХ — преимущественная локализация в восходящих отделах полового тракта, часто бессим- птомное течение, создают определенные трудности в диагностике этой патологии [7]. Поэтому проблема, связанная с повышением точности и своевременности диагностики, особенно латентно протекающего урогенитального хламидиоза, прогнозирование дальнейшего возможного развития заболевания, и по сей день не утратила своей актуальности [8].

Целью нашего исследования явилось изучение особенностей лабораторно-клинических и иммунологических показателей у женщин больных УГХ.

Методы. Для решения поставленных задач было обследовано 1389 женщин с воспалительными процессами женских половых органов, которые впервые обратились в амбулаторное венерологическое отделение Карачаево-Черкесского клинического кожновенерологического диспансера г. Черкесска в период с 2004 по 2007 годы. У 92 женщин в возрасте от 25 до 35 лет, диагноз УГХ выставлен впервые. Средний возраст больных составил 28,0 ± 5,2 лет. Следует отметить, что у женщин 28 лет частота встречаемости УГХ значительно выше, чем в другие возрастные периоды, в среднем в 1,5-2,6 раза.

Контрольную группу составили 53 практически здоровых женщин соответственно в возрасте от 25 до 35 лет. Обследуемые, клинически здоровые люди, не имели жалоб со стороны внутренних органов, отсутствовали острые воспалительные и гематологические заболевания, аллергические и аутоиммунные процессы в анамнезе. Данные лабораторных показателей изучали до лечения.

Применяли лабораторное обследование по направлениям:

• 1.    Установление диагноза УГХ методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) по верификации С. trachomatis, в сочетании с методом прямой иммунофлюоресценции (ПИФ) с моноклональными антителами;

• 2.    Исследование состояние клеточного и гуморального иммунитета в сыворотке крови женщин, больных УГХ, с поражением нижних и восходящих отделов урогенитального тракта:

• -    тест, основанный на регистрации поглощения объектов фагоцитоза, для изучения поглотительной активности нейтрофилов крови;

• -    субпопуляционный анализ лимфоцитов в периферической крови проводили ИФА-методом с использованием моноклональных антител к дифференцированным антигенам CD₃⁺ CD₄⁺ CD 8+ cD₁₆⁺ cD 20 ⁺ (НПЦ

«Биоспектр» г. Москва) Определяли относительное и абсолютное содержани^. е субпопуляций лимфоцитов и соотношение cD₄⁺/CD ₈⁺ клеток;

• -    определение антител Ig A, M, G, E-класса в сыворотке крови проводилось методом неконкурентного непрямого твердофазного иммуноферментного анализа с использованием поликлональных и моноклональных, анти-Ig-антител.

• 3.    Оценка интенсивности перекисного окисления липидов (ПОЛ) и состояния антиоксидантной системы (АОС):

• -    уровень МДА исследовали по методу Ishichara Minoru (Ishichara Minoru, 1978) в модификации НИИ дерматологии и венерологии г. Харьков. Материалом для определения уровня МДА служил осмотический гемолизат осадка эритроцитов;

• -    параллельно определению маркеров ПОЛ мы проводили изучение состояния АОС организма по содержанию естественного антиоксиданта — α-токоферола (α-ТФ) в плазме крови по методу Р.Ч. Черняускене;

• -    для оценки баланса в оксидант-антиоксидантной системе, использовали антиоксидантный коэффициент (АОК).

В настоящей работе статистическую обработку данных проводили с привлечением методов параметрического и непараметрического анализа с использованием пакета Microsoft Ехсel 6.

Результаты. Проведенное исследование показало, что у пациенток с хроническим УГХ, относительный показатель общего количества лимфоцитов достоверно не отличался от такового у доноров, а абсолютный показатель был понижен в 1,2 по сравнению с группой контроля.

При анализе регуляторной и эффекторной реакций иммунитета отмечено незначительное снижение абсолютного и относительного количества лимфоцитов и количества Т-лимфоцитов (CD3+), что характерно для длительнотекущего, без выраженных клинических проявлений, инфекционного процесса. Субпопуляции Т-хелперов (CD4+) характеризовались достоверным повышением относительных показателей на 12%, а Т-супрессоров/цитотоксических (CD8+) — на 26%, при этом абсолютные величины Т-хелперов повышались в 1,36, а Т-супрессоров/ци-тотоксических в 1,58 раза. Субпопуляции NС-клеток (CD16+) характеризовались повышением относительных значений в 1,5 раза, а абсолютных в 1,9 раз по

Таблица 1

Показатели клеточной иммунологической реактивности у больных хроническим УГХ (Х±м; p<0.05)

Показатели, ед. измерения	Контрольная группа (n=53)	Больные УГХ до лечения (n=92)
Лимфоциты, %	28,50 ± 2,40	27,20 ± 1,89
Лимфоциты, 10*9/л	2,14 ± 0,21	1,78 ± 0,15
Т-лимфоциты (СDЗ+), %	64,90 ± 1,80	66, 0 ± 1,43*
Т-лимфоциты (СDЗ+)10*9/л	0,92 ± 0,20	1,15 ± 0,50
СD4+ Т-клетки, %	38,90 ± 0,90	43,60 ± 1,23*
СD4+ Т-клетки 10*9/л	0,55 ± 0,03	0,75 ± 0,06*
СD 8+ клетки, %	26,90 ± 1,10	33,80 ± 1,16*
СD 8+10*9/л	0,38 ± 0,03	0,60 ± 0,05*
NС-клетки (СD16+)	11,90 ± 0,80	18,03 ± 1,73*
NС-клетки (СD16+)10*9/л	0,17 ± 0,02	0,32 ± 0,06*

Примечание: * - Достоверность различий в группах p<0.05.

Таблица 2

Показатели антиоксидантного статуса у больных хроническим УГХ (Х±м; p<0.05)

Показатели,	Контрольная группа	Больные УГХ до лечения
ед.измерения	(n=53)	(n=92)
МДА, мкмоль/л	4,13±0,14	7,83±0,24*
α-токоферол, мкмоль/л	20,52±1,51	13,9±1,07*
АОК, у. е.	4,96±0,11	1,80±0,52*

Примечание: * – Достоверность различий в группах; p<0.05.

сравнению с контрольной группой, что может иметь место при формировании активного лейкоцитарного ответа на хроническое воспаление, связанного с выходом Т и В-лимфоцитов в патологические очаги, а так же при поступлении в кровь в высоких дозах чужеродного антигена и токсинов, подавляющего функциональную активность лимфоцитов, а это приводит к увеличению числа т.н. «нулевых клеток».

У женщин, больных хроническим УГХ, гуморальный иммунный ответ не отличался от значений контрольной группы как относительного, так и абсолютного показателей содержания В-лимфоцитов. Уровень иммуноглобулинов классов М и G был снижен незначительно и отличие значений было недостоверным. При этом статистически значимые различия наблюдались в увеличении содержания IgA в 2,1 раза, так в контрольной группе его значения составили 1,24 ± 0,10 г/л, а в группе больных с УГХ 2,62 ± 0,34 г/л (p<0,001 г/л). Концентрация IgЕ у пациенток с УГХ составляли 50,71± 8,1 г/л и были выше, чем у здоровых женщин (28,4 ± 7,1 г/л) в 1,8 раза в сравнении с показателями контроля, а концентрация Ig G и IgМ незначительно отличались от значений контрольной группы (p>0.1).

При изучении факторов естественной резистентности не наблюдалось изменений относительного числа Д-фагоцитирующих нейтрофилов, что компенсировалось понижением абсолютного значения количества активных фагоцитов (КАФ) до 1,83 ± 0,17*109/л, что в 1,5 раза меньше контрольных величин составляющих 2,70 ± 0,20*109/л (p<0.005).

Известно, что воспалительный процесс отвечает не только иммунным сдвигом, но и активностью перекисного окисления липидов и антиоксидантного статуса. В результате исследования выявлено, что содержание МДА достоверно повышается в 1,7 раза (табл. 2) относительно нормы, что объясняется возникновением осложнений (уретриты, цервициты, сальпингоофориты, эктопии) и подтверждает факт участия продуктов пероксидации в распространении воспалительного процесса в мочеполовом тракте. При этом отмечается относительное снижение содержания природного антиокислителя ТФ и расчетного показателя антиоксидантной защиты АОК, что характерно для хронизации воспалительного процесса, и проявляется активизацией свободнорадикального окисления.

Обсуждение. Проведенные исследования подтверждают необходимость комплексного подхода к оценке характеристик «оксидантного взрыва», которые не только отражают хронизацию протекающего процесса, но и являются критерием периодов обострений хламидиоза. Эффект повреждения активными формами кислорода, в том числе и перекисью водорода, в большей степени зависит не от активации перекисного окисления липидов, а от уровня антиоксидантной защиты. Поэтому при оценке патологи- ческого процесса должны учитываться нарушения в системе перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты (АОК).

Вышеперечисленный комплекс исследований необходим для дальнейшей работы по изучению критериев выраженности иммуновоспалительной реакции, что, возможно, позволит прояснить некоторые причины и механизм развития хронического течения УГХ.

Заключение. В исследовании установлена реакция клеточного звена иммунитета, сопровождающаяся активным повышением относительных показателей Т-хелперов и Т-супрессоров, снижением их абсолютных значений, повышением субпопуляции NС-клеток (СD₁₆) и концентрации иммуноглобулинов классов А и Е, однако, при анализе факторов гуморального иммунитета не отмечается изменений субпопуляции В-лимфоцитов, при изучении факторов естественной резистентности отмечали компенсаторное снижение абсолютного значения количества активных фагоцитов (КАФ) на 40% по сравнению с контрольными величинами, также отмечена активизация перекисного окисления липидов на фоне тенденции к понижению ТФ, что проявляется значительным снижением антиоксидантной защиты организма.