Изменения активности процессов липопброксидации под влиянием экстракта очитка большого (Sedum maximum (L.) Hoffm.)

Проблема оксидативного стресса и состояния активности процессов липопероксидации в норме и при различных формах патологии привлекает внимание многих специалистов [Бобырев, 1989; Заггщуллина. 2005; Гнусина, 2007]. В настоящее время нс вызывает сомнения тот факт, что активация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) является типовым патологическим процессом, сопровождающим развитие различных патологических состояний, в частности, в этиологии и клинических проявлениях бактериальных инфекций и интоксикаций, неоплазий, эндокринных, сердечно-сосудистых, желудочно-кишечных и др. заболеваний [Афанасьева, Чеснокова, 2009].

В большинстве случаев исход развития патологии определяется не только особенностями происхождения, механизмами воздействия этиологических факторов, но и интенсивностью вторичных неспсцифичсских функциональных и метаболических сдвигов, развивающихся, зачастую, по сте-

(С Пластун В. О., Комарова Е. Э Урнова Н А.. Афанасьева Г. А., Курчатова М. Н.; Андреева Н. В., 2015

реотипным механизмам и в значительной мере потенцирующих действие патогенного агента. Поэтому актуальное значение приобретает проблема фармакологической коррекции свободно-радикальных процессов с использованием препаратов, оказывающих антиоксидантное и антигипоксант-ное действие.

Одним из перспективных направлений поиска новых средств патогенетической и симптоматической терапии заболеваний и патологических процессов является исследование возможностей эффективной регуляции процессов ПОЛ с помощью биологически активных соединений растительного происхождения. Преимуществами этих веществ ЯВЛЯЮТСЯ отсутствие токсических, побочных эффектов. «мягкое» воздействие на организм, что позволяет использовать их не только для коррекции патологических СДВИГОВ, НО и в целях профилактики развития заболеваний и осложнений.

Очиток большой VSedum maximum (L.) НоЛпт. Crassuiaceae) широко применяется в народной медицине. в том числе как тонизирующее и адапто-генное средство [Шнякина. Краснов, 1974: Барна) лов и др., 2001]. однако спектр действия его БАВ пока мало изучен. Имеются сведения о способности отвара близкородственного вида о. пурпурного (S. lelephium L.) ингибировать окислительные процессы in vitro [Барнаулов и др., 2001]. До настоящего момента в отечественной и зарубежной литературе отсутствуют сведения о влиянии биологически активных компонентов травы о.

большого на состояние активности процессов ли-попероксидации в условиях нормы и патологии.

Целью работы явилось установление возможностей влияния водного раствора спиртового экстракта травы очитка большого на активность свободнорадикального окисления липидов в экспериментальных условиях.

Материалы и методы исследования

Материалом для исследований являлась трава о. большого, собранная на территории Саратовской области в августе 2013 г. Спиртовые извлечения были получены методом двукратной экстракции 95%-ным этанолом, после чего упарены насухо. Спиртовые экстракты упаривали насухо, после чего растворяли сухой остаток в воде.

Исследования проводили в экспериментах in vivo на 54 беспородных белых крысах-самцах массой 180.0 ± 20.0 г, которые содержались в одинаковых условиях на стандартном пищевом рационе. Оксидативный стресс моделировали путем внутрибрюшинного введения экспериментальным животным 1%-ного раствора диоксидина (ДО) в дозе 100 мг/мл. ДО часто используется в экспериментах в качестве прооксиданта, поскольку индуцирует образование в организме свободных форм кислорода (Н2О2. Он-радикалов) [Дурнев и др,, 1989; Абдуллин и др., 2002; Празднова. 2013].

В эксперименте были использованы 9 групп но 6 крыс в каждой (таблица). Все животные содержались в стандартных условиях вивария.

Группы животных» использованных в эксперименте

№ группы	Название группы	Вводимые вещества и их концентрации, мг/кг
1	Интактная
2	Контроль 1 (позитивный)	ДО 100
3	Контроль 2 (негативный)	Вода юо
4	Опытная 1	ДО 100; экстракт 100
5	Опытная 2	Экстракт 100
6	Опытная 3	ДО 100; экстракт 200
7	Опытная 4	Экстракт 200
8	Опытная 5	ДО 100; экстракт 300
9	Опытная 6	Экстракт 300

Все препараты вводились внутрибрюшинно один раз в день на протяжении 4 сут. На четвертые сутки через 1 ч. после введения растворов животных дскапитировали и отбирали кровь для анализа. Состояние активности процессов свободнорадикального окисления липидов оценивали по содержанию в сыворотке крови экспериментальных крыс промежуточных продуктов ПОЛ - гидроперекисей липидов (ГПЛ) и малонового диальдегида (МДА). Уровень ГПЛ и МДА определяли общепринятыми епскрофотометрическими методами на спектрофотометре «Shimadzu» СФ-UV 1800. Уро вень аутоинтоксикации определяли по содержанию в сыворотке крови молекул средней массы (МСМ) [Медицинские .... 2002].

Статистическую обработку проводили при помощи пакета программного обеспечения StatSoft Статистика 10.0. Достоверность полученных результатов оценивалась с использованием критерия Манна - Уитни, различия групп считались достоверными при уровне значимости р<0.05.

Результаты и их обсуждение

Как показали результаты проведенных иссле- дований, после внутрибрюшинного введения белым крысам 1%-ного раствора ДО на протяжении 4 сут. в дозе 100 мг/кг происходило повышение уровня МДА (рис. 1. б) в сыворотке крови на 90%.

ГПЛ (рис. 2. б) на 20% раза (р<0.05) по сравнению с аналогичными показателями интактной группы животных (рис. 1. а: рис. 2. а) и группой негативного контроля (рис.1, в. рис.2, в).

группы

Рис. 1. Концентрация МДА в сыворотке крови экспериментальных белых крыс: а - интактная группа; б - контроль 1; в - контроль 2; г - опытная 1; д - опытная 2; е - опытная 3; ж -опытная 4; з - опытная 5; и - опытная 6

группы

Рис. 2. Концентрация ГПЛ в сыворотке крови экспериментальных белых крыс.

Обозначения такие же, как на рис. 1

Накопление промежуточных продуктов липо-пероксидации на фоне введения диоксидина сочеталось с развитием выраженной эндогенной интоксикации белых крыс, что подтверждалось увеличением содержания в сыворотке крови МСМ (рис. 3. б) на 40% по сравнению с показателями животных, которым вводили эквивалентный объем воды (р<0.01) (рис. 3, в). Полученные результаты свидетельствовали об активации процессов липопсрок-сидации под влиянием ДО.

В последующих сериях экспериментов исследовали возможности биологически активных веществ водного раствора спиртового экстракта травы о. большого коррегировать прооксидантные эффекты ДО. Как оказалось, при сочетании введе ния на протяжении 4 сут. 1%-ного раствора ДО в дозе 100 мг/кг и последующего внутрибрюшинного введения водного раствора спиртового экстракта о. большого в дозе 200 мг/кг происходило значительное снижение уровня продуктов липоперок-сидации в сыворотке крови белых крыс: МДА на 40% (рис. 1, е). ГПЛ на 75% (р<0.01) (рис. 2, е). Фоновое введение экстракта о. большого в дозе 200 мг/кг вызывало незначительное повышение уровня этих веществ в сыворотке экспериментальных животных (рис. 1. ж; рис. 2, ж) в сравнении с интактной группой и было сопоставимо с их уровнем у группы негативного контроля.

Уровень эндогенной интоксикации у экспериментальных животных, оиенивемый по содержа- нию МСМ в сыворотке крови, при использовании этой концентрации экстракта о. большого сохранялся на том же уровне, что и у животных контрольных групп. Отличие количества МСМ как в о. большого в сочетании с ДО. от позитивного контроля. так и у группы животных, получавших только экстракт от негативного контроля, было не значимо (р>0.05: рис. 3, е. ж).

сыворотке крови животных, получавших экстракт

группы

Рис. 3. Концентрация МСМ в сыворотке крови экспериментальных белых крыс.

Обозначения такие же, как на рис. 1

Далее была изучена зависимость протекторных эффектов водного раствора спиртового экстракта травы о. большого от величины используемой дозы растительного препарата. Для этого провели сравнительную оценку содержания промежуточных продуктов липопероксидации (ГПЛ, МДА) и интегративного показателя аутоинтоксикации -МСМ в крови белых крыс при использовании экстракта о. большого в дозах 100 мг/кг и 300 мг/ кг.

Полученные результаты свидетельствовали об отсутствии протекторного эффекта препарата при использовании его в дозе 100 мг/кг. что подтверждалось сохранением высокого содержания МДА (рис. 1, г, д) и ГПЛ (рис.2, г, д) в сыворотке крови животных, сопоставимого с таковым в группе позитивного контроля.

В серии экспериментов с сочетанным введением ДО с экстрактом о. большого в дозе 300 мг/кг отмечалось снижение уровня обоих продуктов липопероксидации не только по сравнению с соответствующими показателями группы животных, которым вводился только ДО. но и с показателями белых крыс, получавших ДО в сочетании с экстрактом травы о. большого в дозе 200 мг/кг.

Уровень эндогенной интоксикации в сыворотке крови экспериментальных животных одинаков во всех группах, которым вводили ДО в сочетании с экстрактом, независимо от его концентрации, и значимо не отличается от группы позитивного контроля (р<0.05). В группах, получавших только экстракт о. большого в различных концентрациях, эндогенная интоксикация сохраняется на уровне негативного контроля дтя концентраций 100 и 200

мг/мл (р<0.05). При введении исследуемого экстракта в концентрации 300 мг/мл количество МСМ в сыворотке крови экспериментальных животных снижается относительно позитивного контроля на 20% (р<0.05) и становится сопоставимо с количеством МСМ у интактной группы. В целом, уровень эндогенной интоксикации, оцениваемый по концентрации МСМ в сыворотке крови экспериментальных животных, слабо коррелирует с концентрацией вводимых веществ и интенсивностью протекающих процессов ПОЛ.

Заключение

Установлено, что водный раствор спиртового экстракта о. большого обладает способностью снижать содержание промежуточных продуктов ПОЛ (МДА и ГПЛ) в сыворотке крови крыс, подвергшихся прооксидантному действию ДО. Способность компонентов экстракта подавлять интенсивность процессов липопероксидации в условиях патологии носит дозозависимый характер и проявляется при использовании экстракта о. большого в дозе 200 мг/кг и более. В связи с этим является перспективным более детальное изучение его антиоксидантных свойств по другим маркерам окси-дативного стресса.