Изучение гепатопротекторное действие стимусола при хроническом токсическом гепатите

В настоящее время в клинике остается высокой потребность в гепатопротекторных средствах, повышающих резистентность печени к действию химических агентов и нормализующих ее метаболизм в условиях напряжения детоксицирующей функции. Исследованиями последних лет подтверждена целесообразность применения фитопрепаратов, обладающих гепатопротекторными свойствами, использование которых способствует уменьшению синдрома цитолиза гепатоцитов, нормализации или существенному улучшению гликогенообразующей способности печени, усилению дезинтоксикационной, пигментообразующей, экскреторной функции [6]. Помимо цитолитического синдрома важную роль в генезе заболеваний печени и желчевыводящих путей играют холестаз и нарушения реологических свойств желчи, приводящие к снижению секреторной и метаболической функции печени, нарушению детоксикации экзо- и эндотоксинов [13].

В связи с этим, изыскание новых лекарственных средств растительного и природного происхождения, сочетающих гепатопротекторную и желчегонную активность является одним из актуальных задач современной медицины.

Целью данной работы явилось изучение влияния стимусола на процессы перекисного окисления липидов и желчеобразовательную функцию печени при хроническом токсическом гепатите.

Материалы и методы

Впервые нами проведены исследования антиоксидантного и желчегонного действия стимусола при хроническом токсическом гепатите. Стимусол это условное название препарата, который является биоактивной композицией состоящий из сухого экстракта корня солодки голой и мумие в соотношении 1:1. Мумие – природный смолоподобный продукт, представляющий собой бесформенные куски с неравномерно-ячеистой или гладкой поверхностью, твердой или упругой консистенции, обладающие характерным бальзамическим запахом [10]. Данная биоактивная композиция - стимусол был разработан учёнными Ташкентского Фармацевтического института [15].

Эксперименты проведены на 45 белоголовых крысах - самцах массой 150-210 г. Хронический токсический гепатит вызывали путём внутрибрюшинным введением гелиотрина в дозе 10 мг/кг в течение одной недели с последующим убыванием дозы гепатотоксина: вторая неделя 7,5 мг/кг и третья неделя 5 мг/кг [1]. Гепатозащитная активность стимусола изучалось в сравнении силибором. Экспериментальные животные были распределены на 4 группы:

• 1    – интактные, здоровым крысам давали физиологический раствор хлорида натрия перорално в течение одного месяца.

• 2    – контрольные, животным внутрибрюшинно вводился гелиотрин.

• 3    –опытные, перорально через зонд вводили стимусол в дозе 10 мг/кг+гелиотрин.

• 4    – группа сравнения, перорально через зонд вводили силибор в дозе 100 мг/кг+гелиотрин.

Исследуемые препараты вводили предварительно с профилактической целью в течение 5 дней затем одновременно с гепатотоксином в течение 25 дней. После последнего введения препаратов животных декапитировали, соблюдая условия эвтаназии, извлекали печень общепринятыми методами. В гомогенате ткани печени определяли содержание диеновых конъюгатов [14], малонового диальдегида [5] и активность ферментов антиоксидантной системы – каталазы (КТ) [4] и супероксиддисмутазы (СОД) [2].

Желчевыделительную функцию печени изучали по методу Cкакун Н.П. [7]. В желчи животных определяли уровень желчных кислот, холестерина и билирубина [3]. Холатохолестериновый коэффициент рассчитывали как отношения суммы желчных кислот к общему количеству холестерина.

Полученные результаты обрабатывали методом вариационной статистики при Р=0,05 [8].

Результаты и обсуждение

Полученные результаты проведенных исследовании показали, что у животных с хроническим токсическим гепатитом отмечается общая слабость, взъерошенность, уменьшение блеска шерсти, вздутие живота, развития асцита и у 40-45 % отмечается смертельный исход. Под влиянием гепатотоксина – гелиотрина с нарушениями общего состояние животных в ткани печени отмечается повышение содержание диеновых конъюгатов и малонового диальдегида. Одновременно с накоплением продуктов перекисного окисления липидов наблюдается снижение активности СОД и

КТ соответственно на 64 и 42 % по отношению к результатам животных интактной группы (таблица 1). Снижение активности энзимов антиоксидантной системы в свою очередь, приводит к образованию супероксидного аниона, этот радикал вступая в реакцию перекисью водорода увеличивает образование реактогенного кислорода и гидроксильного радикала. Образовавщийся эти радикалы вызывают деструкцию биомембран гепатоцитов и приводят к развитию белковой и жировой дистрофии клеток печени [11]. Полученные эти результаты свидетельствуют о том, что гелиотрин как и другие гепатотоксины обладает прооксидантным действием, усиливает синдром цитолиза и приводит к нарушению метаболических процессов печени.

Наряду с усилением процессов ПОЛ и снижением антиоксидантный защиты организма отмечается нарушение желчеобразовательной функции печени, это в свою очередь приводит к развитию синдрому холестаз. У животных контрольной группы отмечается снижение интенсивности выделения желчи как по часам и так за 4 часа наблюдения. Общее количество выделенной желчи за 4 часа снижалась на 51,3 % по отношению показателям животных интактной группы. Обнаруживалось резкие сдвиги химическом составе выделенной желчи. Снижалось содержание желчных кислот на 54,8 %, холестерина – 55,5 % и билирубина – 70,6 % (таблица 2, 3). Эти нарушения под действием гелиотрина вероятно, связаны с угнетением синтеза холестерина, желчных кислот и билирубина, а также с ингибированием фермента уридиндифосфатглюкуронилтрансферазы [12].

Таблица 1

Влияние стимусола на показатели перекисного окисления липидов (М±m, Р = 0,05, n=6)

Условия эксперимента	n	Конъюгирован ные диены D/1 мг липида	Конъюгирован ные диенкетоны D/1 мг липида	МДА нмоль/1г ткани	СОД    усл. ЕД/мин.мг. белка	Каталаза нмоль/мин. мг. Белка
1. Интактная (физ. Р-р)	6	0,450±0,023	0,224±0,014	36,1±1,01	1,45±0,08	0,43±0,016
2. Контроль (гелиотрин в теч. 1 мес.)	5	0,736±0,0217	0,397±0,028	71,3±1,14	0,52±0,042	0,25±0,019
3. Стимусол + гелиторин	5	0,488±0,03	0,245±0,02	42,2±1,2	0,91±0,037	0,38±0,019
4. Силибор + гелиотрин	5	0,560±0,024	0,254±0,021	46,8±1,74	0,89±0,07	0,34±0,02

Введение стимусола и силибора с профилактической целью препятствуют к резким  нарушениям  антиоксидантной системы и желчеобразовательную функцию печени. В результате применения стимусола в течение одного месяца привело к уменьшению содержание конъюгированных диенов на 33,7 % и диенкетонов на 38,3 %. Снижался уровень малонового диальдегида на 40,4%. Уменьшения содержании продуктов ПОЛ связан с активацией ферментов СОД и КТ соответсвенно на 75 и 52 % по отношению к результатом животных контрольной группы (таблица 1). Тогда как, под влиянием гепатопротектора - силибор усиливалась активность этих энзимов на 71 % и 36 %. Если учесть этот факт, то стимусол состоящий из экстракта корня солодки и мумие, аналогично силибору оказывают антиоксидантное действие и препятствуют к усилению интенсивности процесса ПОЛ. Антиоксидантное действие стимусола по-видимому, связан с наличием в составе биологически активных веществ, так как, в составе корня солодки и мумие содержится активные биолиганды, флавоноидные соединения, аминокислоты и витаминные вещества. Большинства этих веществ обладают прямым и косвенным антиоксидантным действием. Вероятно, эти вещества приводят к усилению активности ферментов и повышению функции антиоксидантной системы организма. Помимо этого, эти вещества обладают противовоспалительным, желчегонным, иммуномодулирующим действиям и повышающим регенераторный потенциал клеток печени [10, 15].

Стимусол как силибор оказывал выраженное гепатопротекторное действие уменьшая синдром холестаза. Под влиянием этого препарата общее количество выделенной желчи за 4 часа увеличился на 1,26 раза, повышалась секреция желчных кислот на 1,07 раза, холестерина – 76,5 % и билирубина на 2,35 раза по сравнению показателями животных контрольной группы (таблица 2, 3). Под действием гепатопротектора силибора эти показатели были менее выражены.

Таблица 2

Влияние стимусола на интенсивность секреции желчи (М±m; n=6,р=0,05)

Условия эксперимента	Интенсивность секреции желчи мг/мин. 100 г веса				Общее количество выделенной желчи (мг/100 г) за 4 ч
	1-час	2-час	3-час	4-час
1. Интактная (физ. Р-р)	4,0±0,23	4,2±0,23	4,2±0,22	4,1±0,22	985±56
2. Контроль (гелиотрин в теч. 1 мес.)	2,0±0,16	2,1±0,18	2,2±0,11	2,0±0,13	505±32
3. Стимусол + гелиторин	4,4±0,25	4,8±0,18	4,8±0,18	5,1±0,16	1144±29
4. Силибор + гелиотрин	2,8±0,22	3,0±0,41	3,9±0,52	3,8±0,45	811±69

"Экономика и социум" №1(10) 2014                50

Таблица 3

Влияние стимусола на химический состав желчи (М±m; n=6,р=0,05)

Условия эксперимента	Общее количество мг/мин. 100 г за 4 часа			Холато/холесте риновый коэффицент
	Желчные кислоты	Холестерин	Билирубин
1. Интактная (физ. Р-р)	16,42±0,61	0,144±0,006	0,058±0,003	114±5,0
2. Контроль (гелиотрин в теч. 1 мес.)	5,42±0,58	0,064±0,007	0,017±0,002	83±1,4
3. Стимусол + гелиторин	11,26±0,83	0,113±0,007	0,057±0,002	100±10,36
4. Силибор + гелиотрин	7,2±0,67	0,079±0,011	0,034±0,0042	93±8,96

Гепатопротекторная и желчегонная активность стимусола вероятно связана с синергизмом биоактивных лиганд содержащих в составе корня солодки и мумие. Биоактивная лиганда – глицирризин образует комплекс с цитохромом Р450, ингибируя инактивацию изолированного цитохрома P450KLM2 и вызывая образование гемопротеина. Помимо этого, этот биофлаваноид предотвращает разрушение естественного антиоксиданта – глютатиона [9]. По-видомому, стимусол повышает активность микросомальных ферментов печени и стимулирует синтез желчных кислот, холестерина и повышает конъюгацию билирубина.

Таким образом, биоактивная композиция из экстракта корня солодки и мумие условно названный препарат - стимусол обладает выраженным гепатозашитным и желчегонным действием при хроническом токсическом гепатите. По этим эффектам он не уступал гепатопротектору – силибор.