Изучение модифицирующего регуляторного воздействия цАМФ при экспериментальной терапии опухолей

ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» МЗ РФ, г. Ростов-на-Дону

Актуальность. Прогрессия злокачественных опухолей в организме, как известно, приводит к глубоким системным нарушениям гомеостаза, что определяет актуальность задачи по разработке способов патогенетической терапии, основанных на регуляторных воздействиях. Одним из ключевых «передатчиков» регуляторного воздействия гормонов и медиаторов является циклический аденозинмонофосфат (цАМФ). Использование цАМФ при экспериментальной химиотерапии опухолей обусловлено не только доступностью цАМФ к ключевым механизмам энергообразующих процессов, клеточной дифференцировке и пролиферации, опосредованной через различные факторы экспрессии генов, но и к адаптивной регуляции в условиях патологических процессов.

Цель исследования. Изучение влияния цАМФ на эффективность химиотерапии циклофосфана (ЦФ) опухолей (саркома 45) поздних сроков развития у животных (крыс), а также оценка некоторых показателей клеточной резистентности и продолжительности жизни экспериментальных животных.

Материал и методы. Эксперименты проводились на белых беспородных крысах-самцах (n = 45, вес ~ 220 ± 30 г). Для перевивания опухоли использовали штамм С-45 из банка трансплантатов опухолей РОНЦ им. Н.Н. Блохина. По достижении объема опухоли 2,5–3,5 см³ производили внутрибрюшинное введение ЦФ в дозе 50 мг/кг на протяжении 2,5 нед с интервалом 4–5 дней. Параллельно производили ежедневное пероральное введение цАМФ по три воздействия с интервалом

2 ч (суммарная доза 0,03 мг/мл в день). Контроль эффективности терапии проводили по показателям объема опухолей, кинетики роста опухолей, срокам жизни животных от начала лечения. Для оценки регуляторного влияния цАМФ исследовали активность дегидрогеназ лимфоцитов. Пролиферативная активность лимфоидных клеток оценивалась методом проточной цитометрии (BD Facs Cantoo II). Также проводили идентификацию адаптационных реакций и их соотношение.

Результаты. В результате проведенных исследований влияния цАМФ при химиотерапии ЦФ показано выраженное ослабление автокаталитического роста саркомы 45 и ее регресс. Среднее значение объема опухоли в группе животных, подвергаемых сочетаемому воздействию цАМФ и ЦФ, уменьшилось к моменту окончания лечения в 1,3 раза. При этом в группе, подвергаемой монотерапии ЦФ, отмечалось менее выраженное ингибирующее воздействие, характеризующееся в период лечения стабилизацией опухолевого роста, а спустя 10 дней после лечения 60 % опухолей возобновляли свой рост. Показатель продолжительности жизни животных при терапии цАМФ + ЦФ был выше на 30 % относительно группы животных, подвергаемых только ЦФ воздействию. Анализ активности дегидрогеназ лимфоцитов периферической крови показал, что уровень сукцинатдегидрогеназы в 1,7 раза превышает уровень α-глицерофосфатдегидрогеназы при использовании цАМФ, что свидетельствует о преобладании энергопродукции цикла Кребса над гликолизом. При сочетании цАМФ и ЦФ скорость пролиферации лимфоцитов уменьшилась в 3,7 раза относительно введения только ЦФ. Также наблюдалось формирование симптомокомплекса физиологических реакций тренировки (42,7 ± 3,8 %) и спокойной активации (50,7 ± 4,1 %), доля стресса была незначительная.

Выводы. Применение цАМФ в сочетании с ЦФ химиотерапией влияет на патогенетические механизмы опухолевого роста. Это проявляется на уровне как клеточных элементов иммунной системы, так и интегральных реакций организма, что обусловливает повышение эффективности химиотерапии и увеличивает продолжительность жизни животных.

аЗ аБ ка к ЛИЧ нн Г ИММУн ИМИЧ к Г П Д Да ДЛя П Д Л нИя ЭПИД МаЛЬн Г Фак а а

.а. ка П нк , а.И. БУ ак кИ , а.а я Б а, М.н. ИШк ИЧ

ГНУ «Институт биоорганической химии НАН Беларуси», г. Минск

Актуальность. Эпидермальный фактор роста (ЭФР) относится к группе ростовых факторов, участвующих в механизмах контроля инвазии, неоваскуляризации и пролиферации опухолей, тем самым являясь перспективным маркером биологического поведения опухоли, позволяющим диагностировать ранние стадии возникновения патологического процесса. В силу этого возникает необходимость его идентификации и количественной оценки в сыворотке крови, что возможно при помощи современных методов иммунохимиче-ского анализа, в частности иммуноферментного анализа (ИФА), сочетающего высокую чувствительность и специфичность иммунной реакции «антиген-антитело», с одной стороны, и простоту исполнения – с другой.

Цель исследования. Разработать технологию нового метода ИФА ЭФР и провести апробацию на клиническом материале с целью обоснования возможности его использования в медицинской практике в качестве количественного клиникодиагностического и патогенетического критерия при онкопатологии различного генеза, ассоциированной с его гиперэкспрессией.

Материал и методы. Содержание ЭФР определяли в сыворотках крови условно здоровых лиц (n=16) – группа контроля, больных раком мочевого пузыря (n=23) – группа сравнения и больных немелкоклеточным раком легкого (n=30) разработанным методом непрямого твердофазного иммуно-ферментного анализа («сэндвич»-вариант).

Результаты. Концентрация ЭФР в сыворотках крови составила в группе контроля 68,9 ± 10,2 пг/мл, что соответствует критическому порогу содержания ЭФР у здоровых лиц – 200 пг/мл. У больных с раком мочевого пузыря гиперэкспрессии ЭФР не обнаружено: средняя величина содержания данного маркера составила 51,6 ± 7,8 пг/мл, что подтверждается результатами других авторов о противоречивости взаимосвязи уровня ЭФР и его роли в развитии рака мочевого пузыря. Установленная динамика содержания ЭФР в сыворотке крови при немелкоклеточном раке легкого свидетельствует о наличии процесса его гиперэкспрессии (средняя величина составила 645,6 ± 24,3 пг/мл), что, в свою очередь, подтверждает ведущую роль ЭФР в развитии опухолевого процесса и его прогрессирования при немелкоклеточном раке легкого.

Выводы. Поскольку ЭФР является основным лигандом для семейства тирозинкиназных рецепторов, играющих существенную роль в функционировании организма в норме и при онкопатологии, повышение концентрации ЭФР в сыворотке крови может указывать на гиперэкспрессию этих рецепторов и инициацию опухолевого процесса. Поэтому выявленное увеличение концентрации ЭФР позволяет предположить, что уровень данного маркера может быть информативным показателем прогрессирования онкологического процесса. Внедрение в медицинскую практику разработанного метода может повысить эффек-