Изучение профилактического кардиопротекторного действия некоторых отечественных антигипоксантов при ишемии и сахарном диабете

Таблица 1

Характеристика экспериментальных животных

Раздел исследования	Вид животных	п	Масса, г
Изучение размеров зон ишемии и некроза	Крысы	87	200 - 350
Исследование веществ на модели катехоламиновых микронекрозов	Мыши	100	18-22

Предметом исследования явились 3-гидроксиэтилпиридина малат (этоксидол, ВНЦ БАВ, Россия), 20% раствор деанола ацеглумата (нооклерин, «Пик-фарма», Россия) и жидкая форма дезоксирибонуклеина та натрия — препарат «Деринат» (НПО «Техномедсервис», Россия). Исследуемые соединения и препараты сравнения испытывали в эквитоксических дозах, составляющих 5,0 и 2,5 % от показателя LD50.

У всех животных моделировали инсулинзависимый сахарный диабет путем введения водного раствора противоопухолевого препарата стрептозотоцина в дозе 15 мг/кг, который разрушает р -клетки поджелудочной железы и вызывает развитие патологического состояния в течение 14 дней.

На первом этапе изучали противоишеми-ческое действие препаратов с помощью дифференциального индикаторного метода определения размеров зон некроза и ишемии у крыс. Наркотизированных белых крыс-самцов линии Vistar со срептозотоциновым сахарным диабетом на 15-е сутки переводили на искусственную вентиляцию легких, вскрывали грудную клетку и моделировали острую ишемию путем перевязки левой нисходящей артерии. Затем животных забивали, извлекали сердце и окрашивали его синькой Эванса (индикатор зоны ишемии) и красным формазаном (индикатор зоны некроза). Расчет зон повреждения проводили по следующей формуле:

X =

K1M1 + К2М2

К1(М1 + М2)

X 100,

где для расчета зоны некроза: X — размеры зоны некроза к общей массе миокарда, %; К1 — содержание красного формазана в неповрежденном участке, мг/кг; К2 — содержание красного формазана в поврежденном участке, мг/кг; М1 и М2 — соответственно массы поврежденного и неповрежденного участков миокарда, г.

Для расчета зоны ишемии: X — размеры зоны ишемии к общей массе миокарда, %; К1 — содержание синьки Эванса в неповрежденном участке, мг/кг; К2 — содержание синьки Эванса в поврежденном участке, мг/кг; М1 и М2 — соответственно массы поврежденного и неповрежденного участков миокарда, г.

На втором этапе изучали профилактическое кардиопротекторное действие препаратов при адреналиновом повреждении миокарда крыс. Для этого адреналина гидрохлорид в дозе 200,0 мкг/кг (0,1% раствор в ампулах по 1 мл, АО «Московский эндокринный завод», Россия) инъецировали внутрибрюшинно на 15-е сутки после однократного внутрибрюшинного введения раствора стрептозотоцина. Предварительно (за 2 — 3 мин до инъекции катехоламина) проводили интратрахеальную инстилляцию эфира для наркоза в объеме 0,1 мл/кг с помощью микропипетки. У подопытных животных ре гистрировали ЭКГ во II стандартном отведении. Критерием эффективности на данной модели являлась летальность животных, а также частота развития эктопических аритмий и блокад проведения.

Результаты исследования. При выполнении первого этапа исследований были проведены одна серия опытов на интактных крысах (контроль-1) и 11 серий опытов на белых крысах-самцах линии Vistar на 15-е сутки после внутрибрюшинного введения животным стерптозотоцина. Формирование инсулинзависимого сахарного диабета сопровождалось эскалацией тяжести ишемической альтерации сердца, что проявлялось в первую очередь в увеличении объема зоны гибели миокарда — он статистически достоверно увеличивался в среднем до 45 % от общей массы миокарда. Свидетельством тяжести поражения явилось и то, что у двух животных в серии воспроизведение инфаркта миокарда закончилось летально. Профилактическое введение цитопротекторов: парентеральное 3-гидроксиэтилпиридина малата (3-ГПМ) и дезоксирибонуклеината натрия и энтеральное — деанола ацеглумата, подобно препаратам сравнения пропранололу и триметазидину, ограничивает альтера-тивные процессы в миокарде крыс с инсулинзависимым сахарным диабетом преимущественно за счет уменьшения размера зоны некроза и увеличения соотношений размеров зоны ишемии к зоне некроза (рис.). При этом сила эффекта 3-гидроксиэтилпиридина малата превосходит таковую структурного аналога мексидола, поскольку антиишеми-ческое действие яблочнокислой соли оксипиридина сохраняется и в дозе, пропорциональной 2,5 % от показателя LD 50 .

На втором этапе нашей работы в контрольной серии опытов внутривенное введение адреналина гидрохлорида в дозе 100 мкг/кг сопровождалось развитием желудочковой аритмии и блокад проведения у всех животных с сахарным диабетом, что сопровождалось тотальной гибелью мышей на 13 — 16-й минутах опыта вследствие асистолии (табл. 2).

Первый препарат сравнения — пропранолол — в дозе 1,0 мг/кг достоверно снижал частоту развития нарушений ритма и проводимости, однако не предотвращал летальность животных, причиной которой, как правило, также была асистолия. Мы наблюдали лишь тенденцию к увеличению времени гибели мышей до 21 ±5 мин.

Рис. Отношение размеров зон некроза к общей массе миокарда сердца крысы с сахарным диабетом через 4 ч после ОКА, %

Таблица 2

Эффективность исследуемых веществ при профилактическом введении при адреналиновой интоксикации мышей с сахарным диабетом

Условия опыта, доза, мг/кг/сут	п	С желудочковой аритмией	С AV-блокадой	Погибло мышей	Время гибели, мин
Контроль	14	14	14	14	13 ± 3
Пропранолол, 1,0	14	5*	6*	11	21 ± 5
Мексидол, 22,0	14	12	11	11	64 ± 3*
3-ГПМ, 22,0	14	11	11	7*	134± 12*
Деанола ацеглумат, 250,0	14	11	12	8*	74 ± 7* #
ДН, 12,0	14	12	12	9*	52 ± 8* #

Примечание. * — отличия от группы контроля достоверны при р < 0,05; # — отличия от группы животных, получавших 3-ГПМ, достоверны при р < 0,05 ( t- критерий Стьюдента).

Терапевтический эффект препарата сравнения мексидола в исследуемой дозе проявлялся в статистически достоверном увеличении времени гибели животных и тенденции к снижению экспериментальной летальности, в то же время эктопическая активность в миокарде мышей и нарушения проведения импульса по проводящей системе сердца сохранялись на высоком уровне, близком к контрольным значениям.

Спектр фармакологических эффектов 3- гидроксиэтилпиридина малата, деанола аце-глумата и дезоксирибонуклеината натрия на данной модели повторял спектр мексидола: противоаритмического действия не регистрировали, не наблюдалось предотвращения развития блокад проведения, в то время как соединения увеличивали время наступления гибели животных с достоверным снижением числа погибших мышей. При этом наибольшее профилактическое действие проявило производное 3-гидроксипиридина малата, уве- личивавшее продолжительность жизни животных с адреналиновой интоксикацией в среднем до 134 с.

Выводы

• 1.    У животных со стрептозотоциновым сахарным диабетом 3-гидроксиэтилпириди-на малат, деанола ацеглумат и дезоксирибо-нуклеинат натрия при курсовом профилактическом введении в дозах, пропорциональных с учетом правил межвидового переноса, 5,0 и 2,5 % от показателя LD₅₀, проявляют

• 2.    При катехоламиновом повреждении миокарда мышей со стрептозотоциновым сахарным диабетом профилактическое введение 3-гидроксиэтилпиридина малата, деанола ацеглумата и дезоксирибонуклеината натрия сопровождается снижением летальности и увеличением продолжительности жизни животных.

антиишемическую активность: у крыс через 4 ч после развития острого инфаркта миокарда вещества ограничивают размеры зоны некроза.